分析化学专业优秀论文分析化学专业优秀论文 苏丹红苏丹红号酶联免疫分析方法的建立号酶联免疫分析方法的建立关键词：苏丹红关键词：苏丹红号号 酶联免疫分析方法酶联免疫分析方法 食品分析食品分析 多克隆抗体多克隆抗体 高效液相色谱高效液相色谱摘要：苏丹红 1 号，即 1-苯基偶氮-2-萘酚，是一种人工合成的油溶性化工染 色剂，并被证明是一种潜在的致癌物，在食品中禁止添加。酶联免疫吸附分析 法(ELISA)是一种简单、准确的分析方法，具备灵敏度高、特异性强等特点，己 广泛应用于临床医学检验、生物分析、食品分析和环境分析等领域中。本实验 用自制的免疫抗原免疫动物，制得高质量的抗体，建立了食品中苏丹红 I 酶联 免疫吸附分析方法。实验中合成了两种不同碳桥长度的苏丹红衍生物，并将该 衍生物与载体蛋白质交联。衍生物与牛血清蛋白(BSA)的结合物为免疫原 (Sudan-Clt;,3gt;-BSA，Sudan-Clt;,4gt;-BSA)，与卵 血清白蛋白(OV)的结合物为包被抗原(Sudan-Clt;,3gt;-OV, Sudan- Clt;,4gt;-OV)。两种免疫原分别免疫两只家兔，获得四种多克隆抗 体。两种包被抗原，四种抗体构成 8 种测试组合，其中有 7 种组合可用于苏丹 红的免疫分析。在这些测试组合中，苏丹红的标准曲线的浓度范围为 0.1- 100ng/ml，包被抗原的使用浓度为 0.02-1 ng/mL，抗血清的使用浓度为 0.3- 2.0ng/mL，灵敏度(IClt;,50gt;值)为 0.3-2.0 ng/ml(IClt;,50gt;为标准曲线中信号抑制 50所对应的浓度，其 值越小，灵敏度越高)。其中最佳组合为：Sudan-Clt;,3gt;-OV 为 包被抗原，兔血清 Clt;,3gt;-为抗体，IClt;,50gt; 值为 0.3 ng/ml。四种抗体与苏丹红同系染料 Sudan ，和的交叉反应为 0.1-14.3，与食品中的可添加染料日落黄，柠檬黄，苋菜红，胭脂红，亮兰， 靛蓝几乎没有交叉反应，说明所制备的四种抗体对苏丹红 I 都有很高的特异性。 选择了六种市售食品用作加标实验样品。经简单的样品处理后，萃取液直接稀 释，用于 ELISA 测定。在六种食品中苏丹红 I 号的加标回收率为 92.4-114， 变异系数为 5.9-24.8。用高效液相色谱仪(HPLC)分析加标样品，并与 ELISA 分析结果对比。两种方法有较高相关性(r=0.84：n=7)。综上所述，本实验所建 立的苏丹红号分析方法具有灵敏度高、特异性强、样品处理简单、分析快速 以及测试量大的特点，可以用于食品中对苏丹红号的快速筛选和定量分析。正文内容正文内容苏丹红 1 号，即 1-苯基偶氮-2-萘酚，是一种人工合成的油溶性化工染色 剂，并被证明是一种潜在的致癌物，在食品中禁止添加。酶联免疫吸附分析法 (ELISA)是一种简单、准确的分析方法，具备灵敏度高、特异性强等特点，己广 泛应用于临床医学检验、生物分析、食品分析和环境分析等领域中。本实验用 自制的免疫抗原免疫动物，制得高质量的抗体，建立了食品中苏丹红 I 酶联免 疫吸附分析方法。实验中合成了两种不同碳桥长度的苏丹红衍生物，并将该衍 生物与载体蛋白质交联。衍生物与牛血清蛋白(BSA)的结合物为免疫原(Sudan- Clt;,3gt;-BSA，Sudan-Clt;,4gt;-BSA)，与卵血清白蛋 白(OV)的结合物为包被抗原(Sudan-Clt;,3gt;-OV, Sudan- Clt;,4gt;-OV)。两种免疫原分别免疫两只家兔，获得四种多克隆抗 体。两种包被抗原，四种抗体构成 8 种测试组合，其中有 7 种组合可用于苏丹 红的免疫分析。在这些测试组合中，苏丹红的标准曲线的浓度范围为 0.1- 100ng/ml，包被抗原的使用浓度为 0.02-1 ng/mL，抗血清的使用浓度为 0.3- 2.0ng/mL，灵敏度(IClt;,50gt;值)为 0.3-2.0 ng/ml(IClt;,50gt;为标准曲线中信号抑制 50所对应的浓度，其 值越小，灵敏度越高)。其中最佳组合为：Sudan-Clt;,3gt;-OV 为 包被抗原，兔血清 Clt;,3gt;-为抗体，IClt;,50gt; 值为 0.3 ng/ml。四种抗体与苏丹红同系染料 Sudan ，和的交叉反应为 0.1-14.3，与食品中的可添加染料日落黄，柠檬黄，苋菜红，胭脂红，亮兰， 靛蓝几乎没有交叉反应，说明所制备的四种抗体对苏丹红 I 都有很高的特异性。 选择了六种市售食品用作加标实验样品。经简单的样品处理后，萃取液直接稀 释，用于 ELISA 测定。在六种食品中苏丹红 I 号的加标回收率为 92.4-114， 变异系数为 5.9-24.8。用高效液相色谱仪(HPLC)分析加标样品，并与 ELISA 分析结果对比。两种方法有较高相关性(r=0.84：n=7)。综上所述，本实验所建 立的苏丹红号分析方法具有灵敏度高、特异性强、样品处理简单、分析快速 以及测试量大的特点，可以用于食品中对苏丹红号的快速筛选和定量分析。 苏丹红 1 号，即 1-苯基偶氮-2-萘酚，是一种人工合成的油溶性化工染色剂， 并被证明是一种潜在的致癌物，在食品中禁止添加。酶联免疫吸附分析法 (ELISA)是一种简单、准确的分析方法，具备灵敏度高、特异性强等特点，己广 泛应用于临床医学检验、生物分析、食品分析和环境分析等领域中。本实验用 自制的免疫抗原免疫动物，制得高质量的抗体，建立了食品中苏丹红 I 酶联免 疫吸附分析方法。实验中合成了两种不同碳桥长度的苏丹红衍生物，并将该衍 生物与载体蛋白质交联。衍生物与牛血清蛋白(BSA)的结合物为免疫原(Sudan- Clt;,3gt;-BSA，Sudan-Clt;,4gt;-BSA)，与卵血清白蛋 白(OV)的结合物为包被抗原(Sudan-Clt;,3gt;-OV, Sudan- Clt;,4gt;-OV)。两种免疫原分别免疫两只家兔，获得四种多克隆抗 体。两种包被抗原，四种抗体构成 8 种测试组合，其中有 7 种组合可用于苏丹 红的免疫分析。在这些测试组合中，苏丹红的标准曲线的浓度范围为 0.1- 100ng/ml，包被抗原的使用浓度为 0.02-1 ng/mL，抗血清的使用浓度为 0.3- 2.0ng/mL，灵敏度(IClt;,50gt;值)为 0.3-2.0 ng/ml(IClt;,50gt;为标准曲线中信号抑制 50所对应的浓度，其 值越小，灵敏度越高)。其中最佳组合为：Sudan-Clt;,3gt;-OV 为包被抗原，兔血清 Clt;,3gt;-为抗体，IClt;,50gt; 值为 0.3 ng/ml。四种抗体与苏丹红同系染料 Sudan ，和的交叉反应为 0.1-14.3，与食品中的可添加染料日落黄，柠檬黄，苋菜红，胭脂红，亮兰， 靛蓝几乎没有交叉反应，说明所制备的四种抗体对苏丹红 I 都有很高的特异性。 选择了六种市售食品用作加标实验样品。经简单的样品处理后，萃取液直接稀 释，用于 ELISA 测定。在六种食品中苏丹红 I 号的加标回收率为 92.4-114， 变异系数为 5.9-24.8。用高效液相色谱仪(HPLC)分析加标样品，并与 ELISA 分析结果对比。两种方法有较高相关性(r=0.84：n=7)。综上所述，本实验所建 立的苏丹红号分析方法具有灵敏度高、特异性强、样品处理简单、分析快速 以及测试量大的特点，可以用于食品中对苏丹红号的快速筛选和定量分析。 苏丹红 1 号，即 1-苯基偶氮-2-萘酚，是一种人工合成的油溶性化工染色剂， 并被证明是一种潜在的致癌物，在食品中禁止添加。酶联免疫吸附分析法 (ELISA)是一种简单、准确的分析方法，具备灵敏度高、特异性强等特点，己广 泛应用于临床医学检验、生物分析、食品分析和环境分析等领域中。本实验用 自制的免疫抗原免疫动物，制得高质量的抗体，建立了食品中苏丹红 I 酶联免 疫吸附分析方法。实验中合成了两种不同碳桥长度的苏丹红衍生物，并将该衍 生物与载体蛋白质交联。衍生物与牛血清蛋白(BSA)的结合物为免疫原(Sudan- Clt;,3gt;-BSA，Sudan-Clt;,4gt;-BSA)，与卵血清白蛋 白(OV)的结合物为包被抗原(Sudan-Clt;,3gt;-OV, Sudan- Clt;,4gt;-OV)。两种免疫原分别免疫两只家兔，获得四种多克隆抗 体。两种包被抗原，四种抗体构成 8 种测试组合，其中有 7 种组合可用于苏丹 红的免疫分析。在这些测试组合中，苏丹红的标准曲线的浓度范围为 0.1- 100ng/ml，包被抗原的使用浓度为 0.02-1 ng/mL，抗血清的使用浓度为 0.3- 2.0ng/mL，灵敏度(IClt;,50gt;值)为 0.3-2.0 ng/ml(IClt;,50gt;为标准曲线中信号抑制 50所对应的浓度，其 值越小，灵敏度越高)。其中最佳组合为：Sudan-Clt;,3gt;-OV 为 包被抗原，兔血清 Clt;,3gt;-为抗体，IClt;,50gt; 值为 0.3 ng/ml。四种抗体与苏丹红同系染料 Sudan ，和的交叉反应为 0.1-14.3，与食品中的可添加染料日落黄，柠檬黄，苋菜红，胭脂红，亮兰， 靛蓝几乎没有交叉反应，说明所制备的四种抗体对苏丹红 I 都有很高的特异性。 选择了六种市售食品用作加标实验样品。经简单的样品处理后，萃取液直接稀 释，用于 ELISA 测定。在六种食品中苏丹红 I 号的加标回收率为 92.4-114， 变异系数为 5.9-24.8。用高效液相色谱仪(HPLC)分析加标样品，并与 ELISA 分析结果对比。两种方法有较高相关性(r=0.84：n=7)。综上所述，本实验所建 立的苏丹红号分析方法具有灵敏度高、特异性强、样品处理简单、分析快速 以及测试量大的特点，可以用于食品中对苏丹红号的快速筛选和定量分析。 苏丹红 1 号，即 1-苯基偶氮-2-萘酚，是一种人工合成的油溶性化工染色剂， 并被证明是一种潜在的致癌物，在食品中禁止添加。酶联免疫吸附分析法 (ELISA)是一种简单、准确的分析方法，具备灵敏度高、特异性强等特点，己广 泛应用于临床医学检验、生物分析、食品分析和环境分析等领域中。本实验用 自制的免疫抗原免疫动物，制得高质量的抗体，建立了食品中苏丹红 I 酶联免 疫吸附分析方法。实验中合成了两种不同碳桥长度的苏丹红衍生物，并将该衍 生物与载体蛋白质交联。衍生物与牛血清蛋白(BSA)的结合物为免疫原(Sudan- Clt;,3gt;-BSA，Sudan-Clt;,4gt;-BSA)，与卵血清白蛋白(OV)的结合物为包被抗原(Sudan-Clt;,3gt;-OV, Sudan- Clt;,4gt;-OV)。两种免疫原分别免疫两只家兔，获得四种多克隆抗 体。两种包被抗原，四种抗体构成 8 种测试组合，其中有 7 种组合可用于苏丹 红的免疫分析。在这些测试组合中，苏丹红的标准曲线的浓度范围为 0.1- 100ng/ml，包被抗原的使用浓度为 0.02-1 ng/mL，抗血清的使用浓度为 0.3- 2.0ng/mL，灵敏度(IClt;,50gt;值)为 0.3-2.0 ng/ml(IClt;,50gt;为标准曲线中信号抑制 50所对应的浓度，其 值越小，灵敏度越高)。其中最佳组合为：Sudan-Clt;,3gt;-OV 为 包被抗原，兔血清 Clt;,3gt;-为抗体，IClt;,50gt; 值为 0.3 ng/ml。四种抗体与苏丹红同系染料 Sudan ，和的交叉反应为 0.1-14.3，与食品中的可添加染料日落黄，柠檬黄，苋菜红，胭脂红，亮兰， 靛蓝几乎没有交叉反应，说明所制备的四种抗体对苏丹红 I 都有很高的特异性。 选择了六种市售食品用作加标实验样品