儿科学专业毕业论文儿科学专业毕业论文 精品论文精品论文 高氧致新生大鼠肺损伤高氧致新生大鼠肺损伤 T T 淋巴淋巴细胞动态变化的研究细胞动态变化的研究关键词：肺损伤关键词：肺损伤 高氧环境高氧环境 T T 淋巴细胞淋巴细胞 细胞动态变化细胞动态变化摘要：目的： 探讨高氧致新生大鼠肺损伤过程中脾脏及胸腺中 T 淋巴细胞的 动态变化。 方法： 72 只出生 12 小时内的清洁级 Sprague-Dawley(S-D)大 鼠(简称新生大鼠)作为研究对象。随机分为 2 组：、空气对照组，、高氧 暴露组，每组 36 只。组置于正常空气中喂养，组置于 80-85氧浓度下喂 养。分别于第 1、4、7、14、21 天时，以常规组织学方法观察肺脏形态结构变 化；运用常规计数法检测脾脏中淋巴细胞数量变化；采用流式细胞术检测脾脏 中 CD4+、CD8+T 细胞的百分比的变化；以混合淋巴细胞反应(MTT 法)检测脾淋 巴细胞对植物血凝素和自身肺组织的增殖反应；用常规组织学和免疫组化法观 察胸腺形态结构变化及增殖细胞核抗原(PCNA)表达和 CD4+、CD8+细胞分布。 结果： 1.肺脏组织学变化：与空气对照组相比，高氧组 4d 时肺组织充血、 水肿；7d 时肺组织出血、水肿、炎性细胞浸润明显；14d 时炎症反应减轻，肺 间质增宽，纤维增生；21d 肺泡数量减少，肺间质纤维细胞增生，肺泡节段性 高充气与膨胀不全交替，形成特征性囊泡样改变。 2.脾组织中淋巴细胞数量 与活性变化：实验 4d 时，高氧组脾脏中淋巴细胞数量开始增多，CD4+、CD8+淋 巴细胞百分比较对照组明显增多(plt;0.01)，至实验 7d 时，CD4+淋巴细 胞百分比明显高于对照组(plt;0.01)，此后 CD4+、CD8+淋巴细胞百分比 逐渐下降，到实验 21d 时 CD4+、CD8+淋巴细胞百分比接近对照组，而绝对数明 显低于对照组(p 值均lt;0.01)；此外，淋巴细胞活性检验发现，实验 4d 至 7d 时，脾淋巴细胞对自身肺组织和对 PHA 刺激的增殖反应活性较对照组均明 显增高(p 值均lt;0.01)；实验 14d 至 21d 时，脾淋巴细胞对自身肺组织 刺激的增殖反应活性逐渐下降，但均明显高于对照组(p 值均lt;0.01)， 而对 PHA 刺激后的增殖反应活性均明显低于对照组(p 值均lt;0.01)。 3.胸腺组织学变化：与对照组相比，实验 4d 至 7d 时，高氧组胸腺指数逐渐升 高，PCNA 表达逐渐增强，两组间差异均有显著性统计学意义(p 值均 lt;0.01)：但实验 14d 至 21d 时，高氧组胸腺指数、PCNA 指数逐渐下降， 其中 PCNA 指数在 21d 时已明显低于对照组(plt;0.01)，形态学检查发现 高氧组胸腺蜷曲退化，脂肪细胞及纤维细胞增生，免疫组化显示 CD4+、CD8+淋 巴细胞数量减少且呈区域性分布。 结论： 1.80-85高氧持续暴露 21d 可 造成新生大鼠高氧性肺损伤，病理表现主要为肺泡节段性高充气和与膨胀不全 交替的囊泡样改变等，与新生儿慢性肺损伤的病理改变相符。 2.高氧性肺损 伤早期脾脏中 CD4+、CD8+淋巴细胞百分比明显增高、活性逐渐增强，后期脾脏 CD4+、CD8+淋巴细胞数量明显减少，淋巴细胞活性显著减低。 3.高氧性肺损 伤可导致新生大鼠的胸腺发生阶段性病理改变，即病理性成熟加速迅速转变为 病理性萎缩，表现为 CD4+、CD8+淋巴细胞数量明显减少并呈异常的点状局限性 和区域性分布。 4.高氧性肺损伤过程中有自身反应性 T 淋巴细胞的参与。其 自身反应性损伤的发生发展与胸腺的免疫组织学改变之间存在的对应关系可能 与高氧损伤诱导的胸腺病理性加速成熟有关。 5.高氧性肺损伤所致的免疫功 能低下可能与胸腺异常发育及淋巴细胞亚群数量和功能紊乱有关。正文内容正文内容目的： 探讨高氧致新生大鼠肺损伤过程中脾脏及胸腺中 T 淋巴细胞的动 态变化。 方法： 72 只出生 12 小时内的清洁级 Sprague-Dawley(S-D)大鼠 (简称新生大鼠)作为研究对象。随机分为 2 组：、空气对照组，、高氧暴 露组，每组 36 只。组置于正常空气中喂养，组置于 80-85氧浓度下喂养。 分别于第 1、4、7、14、21 天时，以常规组织学方法观察肺脏形态结构变化； 运用常规计数法检测脾脏中淋巴细胞数量变化；采用流式细胞术检测脾脏中 CD4+、CD8+T 细胞的百分比的变化；以混合淋巴细胞反应(MTT 法)检测脾淋巴细 胞对植物血凝素和自身肺组织的增殖反应；用常规组织学和免疫组化法观察胸 腺形态结构变化及增殖细胞核抗原(PCNA)表达和 CD4+、CD8+细胞分布。 结 果： 1.肺脏组织学变化：与空气对照组相比，高氧组 4d 时肺组织充血、水 肿；7d 时肺组织出血、水肿、炎性细胞浸润明显；14d 时炎症反应减轻，肺间 质增宽，纤维增生；21d 肺泡数量减少，肺间质纤维细胞增生，肺泡节段性高 充气与膨胀不全交替，形成特征性囊泡样改变。 2.脾组织中淋巴细胞数量与 活性变化：实验 4d 时，高氧组脾脏中淋巴细胞数量开始增多，CD4+、CD8+淋巴 细胞百分比较对照组明显增多(plt;0.01)，至实验 7d 时，CD4+淋巴细胞 百分比明显高于对照组(plt;0.01)，此后 CD4+、CD8+淋巴细胞百分比逐 渐下降，到实验 21d 时 CD4+、CD8+淋巴细胞百分比接近对照组，而绝对数明显 低于对照组(p 值均lt;0.01)；此外，淋巴细胞活性检验发现，实验 4d 至 7d 时，脾淋巴细胞对自身肺组织和对 PHA 刺激的增殖反应活性较对照组均明显 增高(p 值均lt;0.01)；实验 14d 至 21d 时，脾淋巴细胞对自身肺组织刺 激的增殖反应活性逐渐下降，但均明显高于对照组(p 值均lt;0.01)，而 对 PHA 刺激后的增殖反应活性均明显低于对照组(p 值均lt;0.01)。 3. 胸腺组织学变化：与对照组相比，实验 4d 至 7d 时，高氧组胸腺指数逐渐升高， PCNA 表达逐渐增强，两组间差异均有显著性统计学意义(p 值均lt;0.01)： 但实验 14d 至 21d 时，高氧组胸腺指数、PCNA 指数逐渐下降，其中 PCNA 指数 在 21d 时已明显低于对照组(plt;0.01)，形态学检查发现高氧组胸腺蜷曲 退化，脂肪细胞及纤维细胞增生，免疫组化显示 CD4+、CD8+淋巴细胞数量减少 且呈区域性分布。 结论： 1.80-85高氧持续暴露 21d 可造成新生大鼠高 氧性肺损伤，病理表现主要为肺泡节段性高充气和与膨胀不全交替的囊泡样改 变等，与新生儿慢性肺损伤的病理改变相符。 2.高氧性肺损伤早期脾脏中 CD4+、CD8+淋巴细胞百分比明显增高、活性逐渐增强，后期脾脏 CD4+、CD8+淋 巴细胞数量明显减少，淋巴细胞活性显著减低。 3.高氧性肺损伤可导致新生 大鼠的胸腺发生阶段性病理改变，即病理性成熟加速迅速转变为病理性萎缩， 表现为 CD4+、CD8+淋巴细胞数量明显减少并呈异常的点状局限性和区域性分布。4.高氧性肺损伤过程中有自身反应性 T 淋巴细胞的参与。其自身反应性损伤 的发生发展与胸腺的免疫组织学改变之间存在的对应关系可能与高氧损伤诱导 的胸腺病理性加速成熟有关。 5.高氧性肺损伤所致的免疫功能低下可能与胸 腺异常发育及淋巴细胞亚群数量和功能紊乱有关。 目的： 探讨高氧致新生大鼠肺损伤过程中脾脏及胸腺中 T 淋巴细胞的动态变 化。 方法： 72 只出生 12 小时内的清洁级 Sprague-Dawley(S-D)大鼠(简 称新生大鼠)作为研究对象。随机分为 2 组：、空气对照组，、高氧暴露组， 每组 36 只。组置于正常空气中喂养，组置于 80-85氧浓度下喂养。分别于第 1、4、7、14、21 天时，以常规组织学方法观察肺脏形态结构变化；运用 常规计数法检测脾脏中淋巴细胞数量变化；采用流式细胞术检测脾脏中 CD4+、CD8+T 细胞的百分比的变化；以混合淋巴细胞反应(MTT 法)检测脾淋巴细 胞对植物血凝素和自身肺组织的增殖反应；用常规组织学和免疫组化法观察胸 腺形态结构变化及增殖细胞核抗原(PCNA)表达和 CD4+、CD8+细胞分布。 结 果： 1.肺脏组织学变化：与空气对照组相比，高氧组 4d 时肺组织充血、水 肿；7d 时肺组织出血、水肿、炎性细胞浸润明显；14d 时炎症反应减轻，肺间 质增宽，纤维增生；21d 肺泡数量减少，肺间质纤维细胞增生，肺泡节段性高 充气与膨胀不全交替，形成特征性囊泡样改变。 2.脾组织中淋巴细胞数量与 活性变化：实验 4d 时，高氧组脾脏中淋巴细胞数量开始增多，CD4+、CD8+淋巴 细胞百分比较对照组明显增多(plt;0.01)，至实验 7d 时，CD4+淋巴细胞 百分比明显高于对照组(plt;0.01)，此后 CD4+、CD8+淋巴细胞百分比逐 渐下降，到实验 21d 时 CD4+、CD8+淋巴细胞百分比接近对照组，而绝对数明显 低于对照组(p 值均lt;0.01)；此外，淋巴细胞活性检验发现，实验 4d 至 7d 时，脾淋巴细胞对自身肺组织和对 PHA 刺激的增殖反应活性较对照组均明显 增高(p 值均lt;0.01)；实验 14d 至 21d 时，脾淋巴细胞对自身肺组织刺 激的增殖反应活性逐渐下降，但均明显高于对照组(p 值均lt;0.01)，而 对 PHA 刺激后的增殖反应活性均明显低于对照组(p 值均lt;0.01)。 3. 胸腺组织学变化：与对照组相比，实验 4d 至 7d 时，高氧组胸腺指数逐渐升高， PCNA 表达逐渐增强，两组间差异均有显著性统计学意义(p 值均lt;0.01)： 但实验 14d 至 21d 时，高氧组胸腺指数、PCNA 指数逐渐下降，其中 PCNA 指数 在 21d 时已明显低于对照组(plt;0.01)，形态学检查发现高氧组胸腺蜷曲 退化，脂肪细胞及纤维细胞增生，免疫组化显示 CD4+、CD8+淋巴细胞数量减少 且呈区域性分布。 结论： 1.80-85高氧持续暴露 21d 可造成新生大鼠高 氧性肺损伤，病理表现主要为肺泡节段性高充气和与膨胀不全交替的囊泡样改 变等，与新生儿慢性肺损伤的病理改变相符。 2.高氧性肺损伤早期脾脏中 CD4+、CD8+淋巴细胞百分比明显增高、活性逐渐增强，后期脾脏 CD4+、CD8+淋 巴细胞数量明显减少，淋巴细胞活性显著减低。 3.高氧性肺损伤可导致新生 大鼠的胸腺发生阶段性病理改变，即病理性成熟加速迅速转变为病理性萎缩， 表现为 CD4+、CD8+淋巴细胞数量明显减少并呈异常的点状局限性和区域性分布。4.高氧性肺损伤过程中有自身反应性 T 淋巴细胞的参与。其自身反应性损伤 的发生发展与胸腺的免疫组织学改变之间存在的对应关系可能与高氧损伤诱导 的胸腺病理性加速成熟有关。 5.高氧性肺损伤所致的免疫功能低下可能与胸 腺异常发育及淋巴细胞亚群数量和功能紊乱有关。 目的： 探讨高氧致新生大鼠肺损伤过程中脾脏及胸腺中 T 淋巴细胞的动态变 化。 方法： 72 只出生 12 小时内的清洁级 Sprague-Dawley(S-D)大鼠(简 称新生大鼠)作为研究对象。随机分为 2 组：、空气对照组，、高氧暴露组， 每组 36 只。组置于正常空气中喂养，组置于 80-85氧浓度下喂养。分别 于第 1、4、7、14、21 天时，以常规组织学方法观察肺脏形态结构变化；运用 常规计数法检测脾脏中淋巴细胞数量变化；采用流式细胞术检测脾脏中 CD4+、CD8+T 细胞的百分比的变化；以混合淋巴细胞反应(MTT 法)检测脾淋巴细 胞对植物血凝素和自身肺组织的