动物遗传育种与繁殖专业毕业论文动物遗传育种与繁殖专业毕业论文 精品论文精品论文 鹌鹑胚胎早期鹌鹑胚胎早期PGCsPGCs 迁移规律以及性腺发育的研究迁移规律以及性腺发育的研究关键词：鹌鹑关键词：鹌鹑 PGCsPGCs 性腺分化性腺分化 性腺发育性腺发育摘要：本课题对鹌鹑原始生殖细胞(primordial germ cells，PGCs)的发生、迁 移及性腺的分化和发育规律，在显微水平上进行了全面而系统的研究。试验的 主要结果如下： 1.采用免疫组化的方法追踪鹌鹑胚胎早期 PGCs 发生和迁移 的过程，染色结果观察显示，鹌鹑 PGCs 在未孵化期几乎都分布在胚盘暗区，主 要在与明区相交界的部位，有分离的细胞也有成对存在的。孵化 12h 的胚盘， PGCs 大多数位于明区，紧靠明暗交界区域，并有三个聚在一起出现的。孵化 19h 的胚盘，PGCs 集中分布于胚体头前侧部的明区中，即生殖新月区。未分化 期时的 PGCs 数为 23 个，到原条期已增至 100 多个，亦为 PGCs 的增殖高峰期。 而在一体节之后，PGCs 群落分布趋向于血管网的形成区域。孵化 27h，已有少 量 PGCs 分布于明区的血管中。到孵化 36h 时，有大量的的 PGCs 聚集在明区血 管网中，左右两侧都有，PGCs 数目为检测各个时期最多。孵化 45h 时，从头部 到脐肠系膜 PGCs 均有散在和聚团分布，并主要聚集在头部间充质的血管中。 2.在对鹌鹑胚胎期性腺分化时间的研究中，观察到，孵化第 4d，PGCs 已经迁移 到原始性腺内，并与其一起形成未分化的性腺。在孵化第 5d 时，性腺开始显现 出卵巢和睾丸的特征。卵巢分化时可以明显观察到性腺上皮有一层 PGCs 大小样 的细胞层，其与下层明显分为两部分，即致密的皮质层和疏松的髓质层；精巢 分化时，上皮下为几层间充质细胞形成的早期白膜，使实质内细胞团与上皮分 开，实质内的细胞团索有向早期曲精细管索发育的趋向。因此在组织学水平上， 孵化第 5d 即为鹌鹑胚胎性腺分化的时间。 3.通过组织学方法观察鹌鹑胚胎 各期睾丸的组织结构特征，研究睾丸的发育规律。结果表明：孵化第 79d， 睾丸的形态特征逐渐明显；孵化第 10d，睾丸索形成并且 PGCs 分化为精原细胞； 孵化第 12d，精原细胞呈葡萄状或链状分布在曲精细管内，并有少量的成熟型 间质细胞和血管填充于管腔之间；孵化第 15d 时，曲细精管明显变粗、数量增 多，精原细胞进入有丝分裂而迅速增殖；到孵化结束第 17d 时，睾丸的形态趋 于成熟，曲精细管清晰可辨，大量的间质细胞、结缔组织和血管填充于管腔内。4.对鹌鹑胚胎期卵巢的连续切片进行 H.E 染色，结果观察到：孵化第 7d， 右侧卵巢开始慢慢退化，极少数 PGCs 开始分化为卵原细胞；孵化 10 d，卵巢 明显区分为皮质和髓质部分，皮质部外区分布有大量增殖的卵原细胞群，呈合 胞体结构；孵化 11 d，卵原细胞数量增加，皮质部逐渐变厚，髓质部变小；孵 化 13 d，卵巢皮质部开始出现早期的原始卵泡；孵化 14 d，卵巢皮质部出现大 量原始卵泡，数量逐渐增多；孵化第 17 和出雏 1d 时，卵巢的形态趋于成熟， 观察到初级卵泡和次级卵泡，卵泡形态清晰，数量较多，卵泡间基质丰富，髓 质中充满血管。 5.对于目前热点研究中的转基因技术，家禽中比较集中于鸡， 鹌鹑作为实验动物的优点，是本实验选取其作为实验素材的原因。填补此空白 并想在鹌鹑上进行相关转基因技术和胚胎干细胞技术，就必须对早期胚胎在体 内发育的基本理论进行了解，系统的描述早期 PGCs 的起源、迁移和增殖规律， 以及性腺分化和发育的规律。本实验确定了鉴定早期鹌鹑 PGCs 的优化方法，得 到了很好的免疫荧光染色效果。正文内容正文内容本课题对鹌鹑原始生殖细胞(primordial germ cells，PGCs)的发生、迁移 及性腺的分化和发育规律，在显微水平上进行了全面而系统的研究。试验的主 要结果如下： 1.采用免疫组化的方法追踪鹌鹑胚胎早期 PGCs 发生和迁移的 过程，染色结果观察显示，鹌鹑 PGCs 在未孵化期几乎都分布在胚盘暗区，主要 在与明区相交界的部位，有分离的细胞也有成对存在的。孵化 12h 的胚盘， PGCs 大多数位于明区，紧靠明暗交界区域，并有三个聚在一起出现的。孵化 19h 的胚盘，PGCs 集中分布于胚体头前侧部的明区中，即生殖新月区。未分化 期时的 PGCs 数为 23 个，到原条期已增至 100 多个，亦为 PGCs 的增殖高峰期。 而在一体节之后，PGCs 群落分布趋向于血管网的形成区域。孵化 27h，已有少 量 PGCs 分布于明区的血管中。到孵化 36h 时，有大量的的 PGCs 聚集在明区血 管网中，左右两侧都有，PGCs 数目为检测各个时期最多。孵化 45h 时，从头部 到脐肠系膜 PGCs 均有散在和聚团分布，并主要聚集在头部间充质的血管中。 2.在对鹌鹑胚胎期性腺分化时间的研究中，观察到，孵化第 4d，PGCs 已经迁移 到原始性腺内，并与其一起形成未分化的性腺。在孵化第 5d 时，性腺开始显现 出卵巢和睾丸的特征。卵巢分化时可以明显观察到性腺上皮有一层 PGCs 大小样 的细胞层，其与下层明显分为两部分，即致密的皮质层和疏松的髓质层；精巢 分化时，上皮下为几层间充质细胞形成的早期白膜，使实质内细胞团与上皮分 开，实质内的细胞团索有向早期曲精细管索发育的趋向。因此在组织学水平上， 孵化第 5d 即为鹌鹑胚胎性腺分化的时间。 3.通过组织学方法观察鹌鹑胚胎 各期睾丸的组织结构特征，研究睾丸的发育规律。结果表明：孵化第 79d， 睾丸的形态特征逐渐明显；孵化第 10d，睾丸索形成并且 PGCs 分化为精原细胞； 孵化第 12d，精原细胞呈葡萄状或链状分布在曲精细管内，并有少量的成熟型 间质细胞和血管填充于管腔之间；孵化第 15d 时，曲细精管明显变粗、数量增 多，精原细胞进入有丝分裂而迅速增殖；到孵化结束第 17d 时，睾丸的形态趋 于成熟，曲精细管清晰可辨，大量的间质细胞、结缔组织和血管填充于管腔内。4.对鹌鹑胚胎期卵巢的连续切片进行 H.E 染色，结果观察到：孵化第 7d， 右侧卵巢开始慢慢退化，极少数 PGCs 开始分化为卵原细胞；孵化 10 d，卵巢 明显区分为皮质和髓质部分，皮质部外区分布有大量增殖的卵原细胞群，呈合 胞体结构；孵化 11 d，卵原细胞数量增加，皮质部逐渐变厚，髓质部变小；孵 化 13 d，卵巢皮质部开始出现早期的原始卵泡；孵化 14 d，卵巢皮质部出现大 量原始卵泡，数量逐渐增多；孵化第 17 和出雏 1d 时，卵巢的形态趋于成熟， 观察到初级卵泡和次级卵泡，卵泡形态清晰，数量较多，卵泡间基质丰富，髓 质中充满血管。 5.对于目前热点研究中的转基因技术，家禽中比较集中于鸡， 鹌鹑作为实验动物的优点，是本实验选取其作为实验素材的原因。填补此空白 并想在鹌鹑上进行相关转基因技术和胚胎干细胞技术，就必须对早期胚胎在体 内发育的基本理论进行了解，系统的描述早期 PGCs 的起源、迁移和增殖规律， 以及性腺分化和发育的规律。本实验确定了鉴定早期鹌鹑 PGCs 的优化方法，得 到了很好的免疫荧光染色效果。 本课题对鹌鹑原始生殖细胞(primordial germ cells，PGCs)的发生、迁移及性 腺的分化和发育规律，在显微水平上进行了全面而系统的研究。试验的主要结 果如下： 1.采用免疫组化的方法追踪鹌鹑胚胎早期 PGCs 发生和迁移的过程， 染色结果观察显示，鹌鹑 PGCs 在未孵化期几乎都分布在胚盘暗区，主要在与明区相交界的部位，有分离的细胞也有成对存在的。孵化 12h 的胚盘，PGCs 大多 数位于明区，紧靠明暗交界区域，并有三个聚在一起出现的。孵化 19h 的胚盘， PGCs 集中分布于胚体头前侧部的明区中，即生殖新月区。未分化期时的 PGCs 数为 23 个，到原条期已增至 100 多个，亦为 PGCs 的增殖高峰期。而在一体 节之后，PGCs 群落分布趋向于血管网的形成区域。孵化 27h，已有少量 PGCs 分 布于明区的血管中。到孵化 36h 时，有大量的的 PGCs 聚集在明区血管网中，左 右两侧都有，PGCs 数目为检测各个时期最多。孵化 45h 时，从头部到脐肠系膜 PGCs 均有散在和聚团分布，并主要聚集在头部间充质的血管中。 2.在对鹌 鹑胚胎期性腺分化时间的研究中，观察到，孵化第 4d，PGCs 已经迁移到原始性 腺内，并与其一起形成未分化的性腺。在孵化第 5d 时，性腺开始显现出卵巢和 睾丸的特征。卵巢分化时可以明显观察到性腺上皮有一层 PGCs 大小样的细胞层， 其与下层明显分为两部分，即致密的皮质层和疏松的髓质层；精巢分化时，上 皮下为几层间充质细胞形成的早期白膜，使实质内细胞团与上皮分开，实质内 的细胞团索有向早期曲精细管索发育的趋向。因此在组织学水平上，孵化第 5d 即为鹌鹑胚胎性腺分化的时间。 3.通过组织学方法观察鹌鹑胚胎各期睾丸的 组织结构特征，研究睾丸的发育规律。结果表明：孵化第 79d，睾丸的形态 特征逐渐明显；孵化第 10d，睾丸索形成并且 PGCs 分化为精原细胞；孵化第 12d，精原细胞呈葡萄状或链状分布在曲精细管内，并有少量的成熟型间质细胞 和血管填充于管腔之间；孵化第 15d 时，曲细精管明显变粗、数量增多，精原 细胞进入有丝分裂而迅速增殖；到孵化结束第 17d 时，睾丸的形态趋于成熟， 曲精细管清晰可辨，大量的间质细胞、结缔组织和血管填充于管腔内。 4.对 鹌鹑胚胎期卵巢的连续切片进行 H.E 染色，结果观察到：孵化第 7d，右侧卵巢 开始慢慢退化，极少数 PGCs 开始分化为卵原细胞；孵化 10 d，卵巢明显区分 为皮质和髓质部分，皮质部外区分布有大量增殖的卵原细胞群，呈合胞体结构； 孵化 11 d，卵原细胞数量增加，皮质部逐渐变厚，髓质部变小；孵化 13 d，卵 巢皮质部开始出现早期的原始卵泡；孵化 14 d，卵巢皮质部出现大量原始卵泡， 数量逐渐增多；孵化第 17 和出雏 1d 时，卵巢的形态趋于成熟，观察到初级卵 泡和次级卵泡，卵泡形态清晰，数量较多，卵泡间基质丰富，髓质中充满血管。5.对于目前热点研究中的转基因技术，家禽中比较集中于鸡，鹌鹑作为实验 动物的优点，是本实验选取其作为实验素材的原因。填补此空白并想在鹌鹑上 进行相关转基因技术和胚胎干细胞技术，就必须对早期胚胎在体内发育的基本 理论进行了解，系统的描述早期 PGCs 的起源、迁移和增殖规律，以及性腺分化 和发育的规律。本实验确定了鉴定早期鹌鹑 PGCs 的优化方法，得到了很好的免 疫荧光染色效果。 本课题对鹌鹑原始生殖细胞(primordial germ cells，PGCs)的发生、迁移及性 腺的分化和发育规律，在显微水平上进行了全面而系统的研究。试验的主要结 果如下： 1.采用免疫组化的方法追踪鹌鹑胚胎早期 PGCs 发生和迁移的过程， 染色结果观察显示，鹌鹑 PGCs 在未孵化期几乎都分布在胚盘暗区，主要在与明 区相交界的部位，有分离的细胞也有成对存在的。孵化 12h 的胚盘，PGCs 大多 数位于明区，紧靠明暗交界区域，并有三个聚在一起出现的。孵化 19h 的胚盘， PGCs 集中分布于胚体头前侧部的明区中，即生殖新月区。未分化期时的 PGCs 数为 23 个，到原条期已增至 100 多个，亦为 PGCs 的增殖高峰期。而在一体 节之后，PGCs 群落分布趋向于血管网的形成区域。孵化 27h，已有少量 PGCs 分 布于明区的血管中。到孵化 36h 时，有大量的的 PGCs 聚集在明区血管网中，左右两侧都有，PGCs 数目为检测各个时期最多。孵化 45h 时，从头部到脐肠系膜 PGCs 均有散在和聚团分布，并主要聚集在头部间充质的血管中。 2.