课题2多聚酶链式反应（PCR) 扩增DNA片段温故知新1o组成DNA分子的基本单位是什么 ?o这些基本单位是如何连接成DNA 分子的?oDNA分子结构有什么特点？脱脱 氧氧 核核 苷苷 酸酸脱氧核苷脱氧核苷磷酸磷酸脱氧脱氧 核糖核糖含氮含氮 碱基碱基嘌呤嘌呤嘧啶嘧啶腺嘌呤（腺嘌呤（A A）鸟嘌呤（鸟嘌呤（G G） 胞嘧啶（胞嘧啶（C C） 胸腺嘧啶（胸腺嘧啶（T T）12345碱基OHOOPOHOOHOOPOHO碱基OHOHOOPOHO碱基OOHOOPOHOOH碱基碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖磷酸基团磷酸基团碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖碱基碱基脱氧核糖脱氧核糖53脱氧核苷酸链结构简图脱氧核苷酸链结构简图磷酸二酯键磷酸二酯键5533 DNA分子的复制需要哪些条件？ DNA分子的复制过程是怎样的？温故知新2DNA母链：提供复制的模板 解旋酶：打开DNA双链 4种脱氧核苷酸：合成子链的原料 DNA聚合酶：催化合成DNA子链 ATP：为复制过程提供能量 引物：使DNA聚合酶从引物的3端开 始连接脱氧核苷酸DNADNA复制的条件复制的条件一、PCR原理：oPCR（多聚酶链式反应）技术n是一种体外迅速扩增DNA片段的技 术，它能以极少量的DNA为模板， 在几小时内复制出上百万份的DNA 拷贝。n利用了DNA的热变性原理，通过控 制温度来控制双链的解聚与结合。DNA母链：提供复制的模板 解旋酶： 打开DNA双链 4种脱氧核苷酸：合成子链的原料 DNA聚合酶： 催化合成DNA子链 ATP：为复制过程提供能量 引物：使DNA聚合酶从引物的3端开 始连接脱氧核苷酸PCRPCR反应的条件反应的条件80100耐热的DNA聚合酶缓冲溶液：维持反应的pH值不变二、二、PCRPCR反应的过程反应的过程 1 1、变性：、变性： 温度上升到90以上时,双链 DNA解聚成为单链。2 2、复性（退火）：、复性（退火）： 温度下降到50左右,引 物与模板DNA单链的互补序列配对结合。3 3、延伸：、延伸： 温度上升到72左右,溶液中 的4种脱氧核苷酸在Taq DNA聚合酶的 作用下,根据碱基互补配对的原则合成 新的DNA链。