中国药典与美英药典微生物限 度检查法的比较 苏德模1.收载的检查项目CPBPUSP 需气菌+ 真菌+ 大肠埃希菌+ 沙门菌+ 铜绿色假单胞菌+ 金黄色葡萄球菌+ 梭菌+ 大肠菌群+肠杆菌科及其他某些革兰阴性杆菌+肠道菌、肠杆菌 科支原体 + 分枝杆菌 + 病毒的其他因子 + 活螨+ 2.检验量 CP 取10g或10ml供试品BP、USP 10g或10ml供试品数份 CPBPUSP一般制剂0.9%的氯化 钠溶液pH7.0 无菌氯化钠- 蛋白胨缓冲液乳糖肉汤 pH7.0氯化钠-蛋 白胨缓冲液 其他合适培养基pH7.2磷酸盐缓冲 液, 大豆酪蛋白消 化培养基, 乳糖液 体培养基非水溶性 的制剂（ 膏剂、油 剂）司盘80、单硬 脂酸甘油酯、 吐温-80 十四烷酸异丙 酯5克吐温-20或吐 温-80 十四烷酸异丙酯吐温-20 其他助溶剂其他 不溶于水的膜 剂 肠溶胶囊制备供试液最终pH调 至7.0气雾剂制备法 样品加稀释剂至培 养基时间不超过 1hr3.供试液制备 4.制剂抑菌作用的确定（阳性对照试验）* 0.4%l卵磷脂，4.0%吐温 CPBPUSP控制菌阳性 菌加量10102个102个105106个需气菌及真 菌计数50100 回收率大小于 70%判断是否 有抑菌作用25200个金葡、白念、枯 草、大肠菌在有无制剂存 在下生长的稀释级差别大 小判断是否有抑菌作用根据控制菌阳 性菌生长的结 果判断抑菌作用处 理方法中和法+*稀释法+薄膜过滤法+离心沉淀法+ 5.需气菌和真菌计数CPBPUSP方法 平皿法 +（浇碟、涂 抹）+试管法 + +薄膜过滤法 + 培养基营养琼脂大豆酪蛋白 消化琼脂大豆酪蛋白 消化琼脂玫瑰红钠琼脂含抗生素的沙 氏葡萄糖琼脂沙氏葡萄糖 琼脂5.需气菌和真菌计数(续)稀释级的选 择3个连续稀释级1个2个培养温度3035232830352025 30352025 培养时间（ 天）需气菌2(57)523真菌3(57)557计数结果 需气菌 真菌一般30300 30100 不生长按10个/1g 或ml报告300 10030300 不生长按10个 /1g或ml报告结果报告 1g或ml1g或ml1g或ml6.大肠埃希菌CPBPUSP方法MI法I法IMViC法检验量（g或 ml）1110稀释剂09%氯化钠溶 液pH7.0氯化钠- 蛋白胨缓冲液乳糖液体培养基预增菌 大豆酪胨肉汤 35371848h增菌BL增菌培养基 35371824 hM-I 35375、24h Mac 肉汤 43451824h乳糖液体培养基 35372448h分离Mac.琼脂平板 35371872hMac、EMB琼脂平 板 35372448h 生化试验MI及IMViC+7.大肠菌群CPBPUSP检验量（g或 ml）11 稀释剂pH7.0无菌氯化钠-蛋 白胨缓冲液乳糖肉汤 预增菌 353725h 增菌0.1g,0.01g0.001g BL 培养基 35371824h0.1g,0.01g,0.001g 乳 糖肉汤培养基 35372448h分离EMB或Mac.C琼脂平板 3537 1824hVRB.琼脂平板 3537 1824h生化试验+- 8. 铜绿假单胞菌CPBPUSP检验量1 （g或ml）1 （g或ml）10 （g或ml）稀释剂09%氯化钠溶液 pH7.2磷酸盐缓 冲液pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液大豆酪蛋白 消化培养基增菌胆盐乳糖增菌培 养基 35371824h大豆酪蛋白消化培养基 35371848h大豆酪蛋白消 化培养基 35372448 h 分离溴化十六烷基三 甲铵琼脂平板 35371824hCetrimide琼脂，培养1872h 大豆酪蛋白消化培养基4143 1848h。薄膜过滤 大豆酪蛋白消化培养基1848h， Cetrimide琼脂平板Cetrimide琼 脂 353772h生化试 验5种1种（421）3种9.金黄色葡萄球菌CPBPUSP检验量1 （g或ml）1 （g或ml）10 （g或ml）稀释剂09%氯化钠溶液 pH7.0氯化钠-蛋白胨 缓冲液pH7.0氯化钠 -蛋白胨缓冲 液大豆酪蛋白消化培养 基增菌营养肉汤（或含亚 碲酸甲）培养基 35371824h大豆酪蛋白 消化培养基 3537184 8h h大豆酪蛋白消化培养 基 35372448h分离甘露醇氯化钠琼脂 平板、卵黄氯化钠 琼脂平板 35372448hBP琼脂平板 3537187 2hVJ(甘露醇氯化锂)琼 脂、MS(甘露醇氯化 钠)琼脂、BP琼脂平 板 35372448h凝固酶试 验+凝固酶、 DNA酶+10.沙门菌CPBPUSP检验量1 （g或ml）10 （g或ml）10 （g或ml）稀释剂09%氯化钠溶液 、pH7.0氯化钠蛋 白胨缓冲液pH7.0氯化钠蛋白 胨缓冲液乳糖液体培养基增菌营养肉汤培养基 35371824h大豆酪胨肉汤 35371824h乳糖液体培养基 3537培养二次增 菌TTB培养基 35371824h四硫酸盐肉汤培养基 41431824hSC、TTB液体培养基 35371224h分离EMB、Mac.C、 DHL、SS琼脂平 板 35371824hDC、XLD、BG.琼 脂平板 35371872hBG、XLD、BS琼 脂平板 35372448h生化试 验+11梭菌CPBPUSP检验量（g或 ml）11010 稀释剂09%无菌氯化钠溶 液pH7.0无菌氯化钠 -蛋白胨缓冲液乳糖肉汤 加热处理1份8010min 另1份不加热1份8010min 另1份不加热增菌100ml 0.1%葡萄糖 庖肉培养基 35377296h100ml梭菌增菌培养 基 3537厌氧48h分离含庆大霉素哥伦比 亚琼脂平板 35374872h含和不含庆大霉素哥 伦比亚琼脂平板 353748h过氧化氢酶试 验+ 12.结果判断及复试CP BP USP控制菌一次检出为准一次检出为 准不符合标准 规定，取大 于25g的样品 复试需气菌和 真菌第一次试验结果 超过规定的标准 ，重新抽样复试 两次，三次结果 平均值报告测定结果在 规定的限度 标准5倍以内 均为合格同上微生物限度标准1.收载方式CPBPUSP各论项下+制剂通则+ 专论+2. 制剂通则中规定微生物限度的剂型CP BP USP注射液1、植入剂1、 酊剂、栓剂、软乳糊剂2 、眼用剂2、糖浆、气粉 喷雾2膜、口服液混悬乳 剂、散剂2、滴耳2、滴鼻 、洗冲灌肠剂2、搽涂摸 剂、凝胶剂、贴剂 无微生物限度：片、胶囊 、丸、颗粒 中药除膏药、橡胶膏剂、巴布 膏剂外药典均有规定胶囊剂、口胶剂、颗粒剂 、 搽剂、泡腾剂1、灌洗剂1、 滴鼻剂2、口服液、口服散 剂、注射液1、直肠制剂、 棒剂1、片剂、药用棉条、 局部用散剂2、局部用半固 体制剂2、透皮贴剂、阴道 制剂、眼科制剂1、耳科制 剂243个品种（38个原料、5个 制剂）注射剂、眼膏 剂263个品种（ 原料96个、制 剂167个）1.要求无菌； 2.无菌和微生物限度标准均有要求。 谢 谢!