实验九 紫外分光光度法测定 核酸的含量一 实验原理 核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双 键系统，能吸收紫外光。RNA和DNA的紫 外吸收高峰在A260nm波长处。一般在A260nm 波长下，每ml含1gRNA溶液的光吸收值为 0.022。所以测定未知浓度RNA溶液A260nm波长的光吸收值即可计算出其中核酸的含量 。二 实验操作 1. 称取核酸样品0.05g加入2ml左右的DW溶解（可在水浴锅上加热促其溶解）然后用玻璃棒蘸取稀氨水调节pH到7使用pH试纸调节调好后将样品液定容到5ml（使用10ml量筒定容） 2. 取2支离心管，按下表加样振荡 均匀在冰箱中冷却30min然后 离心15min,V=8000离心管号12样品液2ml2mlDW2ml-沉淀剂-2ml 3. 上清液稀释100倍：用移液管从离心管中移取0.5ml上清液置 于量筒中用DW定容到50ml倒入小 烧杯搅拌均匀然后用紫外分光光度计测 OD260nm值A1,A24. 计算： RNA (A1-A2) / 0.022 / 50 100