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第二部分第二部分 : :酶的应用酶的应用2、溶液中的酶难回收,不能被再次利用, 提高了生产成本;直接使用酶缺点直接使用酶缺点: :1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等 条件敏感,易失活;3、反应后混在产物中,影响产品质量。 (难分离)易失活、难回收、难分离1、酶既能与反应物接触,又能与产物分离;固定化酶固定化酶 优点优点 :2、酶可以被反复利用。易分离、能反复利用将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介 质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。固定化酶固定化酶: :固定化的方法:固定化的方法:共价偶连法(酶的基团与载体共价结合, 从而被固定)吸附法(吸附在载体上)交联法(氨乙基纤维为载体用戊 二醛交联再与酶蛋白氨基相联)包埋法(将酶包埋在凝胶交联后的“格子”中)将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介 质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。固定化酶固定化酶: :固定化的方法固定化的方法: :吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法等实验6 淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测实验目的实验目的: : 1、制备固定化淀粉酶 2、进行淀粉水解的测定用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度的 淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精, 用淀粉指示剂溶液测试,流出物呈红色表明水解产 物糊精生成。淀粉淀粉-淀粉酶淀粉酶糊精糊精淀粉酶淀粉酶葡萄糖葡萄糖糖化淀粉酶糖化淀粉酶麦芽糖麦芽糖遇碘显蓝色遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘显红色遇碘不显色遇碘不显色实验原理:实验原理:使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶, 作用的最适温度为5075; 最适PH为5.57.5设备及用品设备及用品: :材料材料: : 1.a-淀粉酶的固定化:在烧杯中将 5mg-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中.由 于酶不纯,可能有些不溶物.再加入 5g石英砂,不时搅拌,30min后装入1 支下端接有气门心并用夹子封住的 注射器中(石英砂体积约4ml).用10 倍体积的蒸馏水洗涤此注射器以除 去未吸附的游离淀粉酶,流速为 1ml/min.5ml塑料注射器50ml, 自行车用气门心及夹子, 注射器架试管,微量离心管3支,烧杯,滴管反应柱 固定化酶气门心 夹子5ml注射器-淀粉酶的固定化:设备及用品设备及用品: :材料材料: : 1.a-淀粉酶的固定化:将5mga-淀粉酶溶于4ml蒸 馏水中.再加入5g石英砂,搅拌,30min后装入注 射器中(石英砂体积约4ml).用10倍体积的蒸馏 水洗涤此注射器以除去未吸附的游离淀粉酶,流 速为1ml/min. 2.可溶性淀粉溶液:取50ml可溶性淀粉溶于100ml 热水中,搅拌均匀. 3. 5mmol/L KI-I2溶液:称取0.127g碘和0.83g碘 化钾。加蒸馏水100ml完全溶解后装入滴瓶中5ml塑料注射器50ml, 自行车用气门心及夹子, 注射器架试管,微量离心管3支,烧杯,滴管实验步骤实验步骤: :1.将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴 管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱 . 在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入12滴KI-I2溶液, 观察颜色.用水稀释1倍后再观察颜色.滴加淀粉实验步骤实验步骤: :1.将灌注了固定化酶的 注射器放在注射器架上, 用滴管滴加淀粉溶液,使 淀粉溶液以0.3ml/min的 流速过柱.在流出5ml后 接收0.5ml流出液,加入 12滴KI-I2溶液,观察颜 色.用水稀释1倍后再观 察颜色.反应柱 固定化酶气门心 夹子5ml注射器淀粉2.实验后,用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在4冰箱中, 几天后再重复上述实验,看是否有相同的结果.课后练习:课后练习:P40P40 1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中 没有淀粉酶?2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?在试管中加入1ml可溶性淀粉,再加几滴淀 粉酶柱流出液,保温几分钟后用碘液检验。 如显蓝色,则流出液中没有淀粉酶了。可以在高温下使淀粉水解快,而且酶不会因 高温上而失活,所以可在一些需要高温加热 同时又要水解淀粉的反应中使用。1、研究认为,用固定化酶技术处理污 染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得 到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制 剂,可以用来降解残留在土壤中的有机 磷农药,与用微生物降解相比,其作用 不需要适宜的( ) A、温度 B、PH C、水分 D、营养D2、目前,日用化工厂大量生产的酶 制剂,其中的酶大都来自A、化学合成 B、动物体内 C、植物体内 D、微生物体内 D3.酶的固定方法不包括( )。 A. 将酶吸附在固体表面上 B将酶相互连接起来 C将酶包埋在细微网格里 D将酶制成固体酶制剂,如加酶洗衣粉 中的酶D1 1、酶制剂的概念和种类、酶制剂的概念和种类(一)酶制剂(一)酶制剂含有酶的制品含有酶的制品定义:定义:多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶 和脂肪酶和脂肪酶种类:种类:A A、液体酶制剂、液体酶制剂治疗某些胃病的胃蛋白酶液治疗某些胃病的胃蛋白酶液B B、固体酶制剂、固体酶制剂2 2、酶的生产、酶的生产 提提 取取 法法定义:定义:采用一定的技术直接从动植物或微生采用一定的技术直接从动植物或微生 物的组织、细胞中将酶提取出来物的组织、细胞中将酶提取出来优点优点 :简单易行,在动植物或微生物资源丰简单易行,在动植物或微生物资源丰 富的地区具有应用价值富的地区具有应用价值实例:在屠宰厂,可以从家畜胰脏中提取出实例:在屠宰厂,可以从家畜胰脏中提取出 胰酶;在水果加工厂,可以从菠萝皮中提取胰酶;在水果加工厂,可以从菠萝皮中提取 出菠萝蛋白酶出菠萝蛋白酶缺点:缺点: 要有充足的原材料,广泛应用受到限制要有充足的原材料,广泛应用受到限制发酵法发酵法常用方法常用方法定义:定义:通过微生物发酵获得所需要的酶。通过微生物发酵获得所需要的酶。如果是胞外酶,可以从发酵液中直如果是胞外酶,可以从发酵液中直 接提取;如果是细胞内酶,则可将接提取;如果是细胞内酶,则可将 细胞弄碎再经过提取纯化而得到。细胞弄碎再经过提取纯化而得到。易培养、繁殖速度快、便于大规易培养、繁殖速度快、便于大规 模生产。模生产。优点:优点:提取方式提取方式 :在食品、化工、轻纺、医药等领域大规 模使用酶制剂,说明酶制剂使用有很多 优点,你能思考后举出一些吗?催化效率高、低能耗、低污染等。酶制剂的使用有缺点吗?3 3、酶制剂的优点、酶制剂的优点
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