乙酰胆碱和维库溴铵对Nm -R亲和力测定 （ pA2、 pD2的测定）【实验目的】 1学习蟾蜍腹直肌标本的制备方法 和受体激动剂量-效曲线的测定方法 。2掌握药物的 pD2及pA2的定义。3.掌握乙酰酰胆碱和竞竞争性肌松药药（ 维库维库 溴铵铵）对对骨骼肌Nm-R的pD2和 pA2值值的测测定和计算方法及其意义【实验原理】 1. pD2为激动剂激动受体产生50%最大效应所需的摩尔浓度的负对数值2. pA2为 竞争性拮抗剂摩尔浓度的负对数值，在此浓度下，激动剂要产生原有效应其浓度必 须增大1倍。乙酰胆碱能激动腹直肌上的Nm受体，使腹直肌收缩；维库溴铵是竞争性Nm受体拮抗剂，与乙酰胆碱竞争Nm受体，阻遏乙酰胆碱对腹直肌的收缩作用。本实验预先加入一定量的Nm受体竞争性拮抗剂维库溴铵，乙酰胆碱要达到原有效应 必须增加剂量。由此出现维库溴铵 使 乙酰胆碱 的量效曲线平行右移，根据曲线右移情况，可求得乙酰胆碱对Nm受体的pA2值。【动物动物】 蛙或蟾蜍蛙或蟾蜍【方法方法】1. 1. 制备长约1.5 cm宽约3-4mm的上腹直肌。 2. 标本安装、固定同前腹直肌实验，水浴管营养液体积10ml，充入空气（1-3个/秒）。打开BL-410系统，选择药理实验模块， 肌张力测定（或pA2和pD2测定），给予大 约2g前负荷，平衡10min。 3. 描记正常张力曲线后，依次给药，观察张力的变化 以累加量效曲线法获得Ach激动Nm受体的量效曲线。加入顺序和量如下： Ach10-5mol/L 0.1ml， Ach10-5mol/L 0.2ml ， Ach10-4mol/L 0.07ml， Ach10-4mol/L 0.2 ml， Ach 10-3mol/L 0.07ml， Ach 10-3mol/L 0.2ml， ， Ach终浓度分别是10-7, 310-7, 10-6，310-6 ，10-5, 310-5，10-4, 310-4 mol/L。累加次序Ach浓度（mol/L）Ach的毫升数（ml）终浓度（mol/L）110-50.110-7210-50.2310-7310-40.0710-6410-40.2310-6510-30.0710-5610-30.2310-5710-20.0710-4810-20.2310-4 用任氏液冲洗3次，待基线基本恢 复正常后，加入0.267%维库溴铵溶液（10-7mol/L）0.1ml，5-10min后 重复(1)步骤，记录维库溴铵对Ach量效曲线的影响。 4. 以Ach效应为纵坐标，浓度对数为 横坐标作图，初步估计Ach对Nm-R 的pD2值。5. 直线回归法求Ach pD2值：E/D = Emax/KD E/KDE为对应Ach浓度D产生的效应。令E/D为Y, E 为X，上式为直线方程。其中截距（a）为 Emax/KD，斜率（b）为-1/KD。以BL-420分析系 统或3600P计算器求出pD2，a、b和r值。6. 计算维库溴铵的pA2值：按下述公式计算维库维库 溴铵对铵对 Nm-R的pA2值值 。维库溴铵的pA2值 = 维库溴铵摩尔浓度负对数值 + Log(无维库溴铵时AchpD2/有维库溴铵时AchpD2)-1【结果】 多媒体描记张力变化的曲线，注明所 用药物。【讨论】分析讨论用药后所引起的腹直肌的不 同反应及产生的原因。