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精品PPT课件 浏览免费 下载后可以编辑修改。 http:/www.docin.com/jn-lxh http:/www.doc88.com/lianer2012 http:/www.baidu.com/ http:/www.google.com/ http:/ www.sogou.com /基因操作的主要技术原理 v核酸的凝胶电泳vv扩增原理扩增原理vv分子杂交分子杂交vv测序测序核酸的凝胶电泳 它是一种分析鉴定重组DNA分子及 蛋白质与核酸相互作用的重要实验手 段,同时也是分子生物学研究方法的技 术基础。 v基本原理 带有负电荷的DNA或RNA核苷酸链,依靠 无反应活性的稳定的介质(琼脂糖凝胶和聚丙 烯酰胺凝胶)和缓冲液,在电场中以一定的迁 移率从负极移向正极。根据核酸分子大小不 同、构型或形状的差异,以及所带电荷的不同 ,可以通过电泳将其混合物中的不同成分彼此 分开。 v电泳的迁移率取决于核酸分子本身的大小和 构型。分子量较小的DNA分子,比分子量较大 的DNA分子迁移率要快;同等分子量的不同构 型的核酸分子,构型紧密的比松散型的开环 DNA分子或线性DNA分子迁移率要快 v凝胶电泳的分辨力:与凝胶的类型和密度相关琼脂糖凝胶的分辨力在0.250Kb之间;聚丙烯酰胺的分辨力在11000bp之间琼脂糖凝胶电泳琼脂糖是一种从红色海藻中提取出的 线性多糖聚合物。分为常熔点的琼脂糖和低熔点(LMP)琼 脂糖。 vLMP琼脂糖熔点:6265 熔解后,在37 可保持液态数小时;在25 可保持液态约10minv回收DNA分子在65 下将LMP琼脂糖凝胶熔化;加入过量的酚抽提DNA;离心获得含DNA分子的上清液;v直接酶切v琼脂糖凝胶电泳的参数:缓冲液:1 TAE(TBE TPE)凝胶的含量:根据检测的DNA大小加DNA样品:腺嘌呤(A)的N3410倍在六氢吡啶的作用下,从脱氧核糖上移去2 个磷酸分子,使DNA链在甲基化的鸟嘌呤G位 点断裂。CS载体系统:末端标记载体核酸内切酶Th111 特点:1. 产生5单碱基的突出末端,便于标记;2. Th111 位点十分稀少;3. 5突出末端可以是G或A,也可以是T 或C, 选择性强;4. 在载体中具有两个Th111 位点,可对克隆 在载体上的片断任何一段作选择性标记。化学修饰法的优点:1. 不需要体外酶切;2. 只要有末端标记,无论单双链都可用来测序 。250个bp限制因素:测序胶的分辨率DNA测序分析的自动化用四甲基若丹明(tetramethylrhodamine) 作荧光剂,预先标记M13引物DNA5-末端,按标 准的双脱氧链终止法同引物进行反应,用聚丙 烯酰胺电泳分析。在电泳过程中,用激光激发 电泳的片断产生荧光,被荧光感受器接受,最终 转换成电信号,被计算机读出,或打印出来DNA杂交测序(sequence by hybridization) SBH原理:如果一段短的DNA探针能够与较长的靶 DNA片断杂交,并形成完全的双链体分子,那 么我们便可以根据此来推断在靶DNA序列 长存在着相应的互补序列。步骤:1.将待测的靶DNA分子与一组已知核苷酸 序列的寡核苷酸探针进行杂交2. 对能与待测DNA杂交的探针之间的碱基 重叠关系作比较分析,据此推算靶DNA的核苷 酸序列。两种操作方式:1. 将不同的寡核苷酸与固定在滤膜上的靶 DNA序列样品进行杂交2. 应用寡核苷酸矩阵芯片的DNA杂交测序法杂交的检测:磷光成像仪和图象分析软件错配的碱基会导致杂交信号强度下降。6mer 500bp7mer 2000bp8mer 8000bpSBH的应用:1.检测靶DNA的单碱基突变2. 用于不同片断之间的序列比较分析(同源性序列检测)3. 用表达序列标签(EST)的矩阵芯片,检测不同 类型细胞中或不同生长发育状态下的细胞中 特定基因的表达状况。4. 检测传统的测序技术所得DNA片断的核苷 酸序列数据。现今医学分为传统医学、基于“生物-医学模式”近代发展起来的西医,20世纪西医又发展到“社会-心理-生物医学”或综合医学模式,后基因组时代系统生物学的兴起,形成了系统医学在全球的迅速发展,成为继传统医学、西医学之后中、西医学汇通的未来医学。当代中国医学类专业比较优秀的学校有北京大学、华中科技大学、郑州大学等学校。 中医即中国传统医药学,是形成于数千年前的中国,是建立在人们与疾病长期斗争的经验总结及阴阳五行、八纲脏腑辨证基础上,运用朴素辩证法及思辨推理方法,认识机体、自然、疾病三者关系,发展起来的一门以“功能人”包括功能脏器为概念的独特的医学哲学理论体系。在治疗上,除了药物外,还有针灸、推拿气功、耳针等特殊疗法,它是世界传统医学中最完善的一种医学理论体系。它为人类尤其为中国人民健康和民族繁衍做出了巨大贡献。 西医学是最近三四百 年来建立在解剖学、生物学及现代科学技术基础上、发展起来的一门以“解剖人、肉体人”为概念的、新兴的现代医学科学理论体系。主要采用科学实验方法,从宏观到微观,直至目前的分子基因层次水平,发展极为迅速,超过其它任何一门医学科学,成为世界医学史上的主流。 可见中西医学,一个是以“功能人”为概念的独特的哲学医学理论体系,一个是以“解剖人、肉体人”为概念的新兴的现代医学科学理论体系,二者都不是以完整人为研究对象的科学,从理论讲二者都不是科学的,势必影响各自发展。事实也证明这一切,中医长期停滞不前、疗效也不确实。西医尽管发展到目前的基因分子层次,但疾病发病率居高不下,对绝大部分疾病发病原因认识不清、发病机理弄不明白,治疗受到制约,在小小SARS、禽流感面前竟束手无策,在糖尿病、癌症、心脑血管疾病、尿毒症等相当多疾病面前更是不得不求助或借助 中医治疗。一个是疗效不确实,一个是有些甚至相当多疾病无法治疗,这就是中西医学结合的缘由。然而,由于二者是两套理论、两股道上跑的车,风马牛不相及,从理论上讲就没有结合的可能,只是形式上的融合罢了。故出现西医对治疗不了的疾病只好求助中医,而中医则往往采用西医诊断中医治疗,以及中西治疗法一块用的局面。 至于循证医学、比较医学、后现代医学、行为医学等所谓“医学”,都称不上一门独立的医学科学,关于这一点在灵魂医学有关章节中将有相关点评。 总之,目前以中西医学为主的世界各种医学科学都存在不完整性的瑕疵,即都是以不完整的人为研究对象的医学科学,故不能解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学史上一切疑难模糊问题,成为阻碍医学科学前进的羁绊。的确,要解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学上一切疑难模糊问题,显然已完全超出了中西医学所涉 及的范畴,我们必须跳出中西医学的理论框架,建立起一个新的医学理论体系 - 东方医学和西方医学(即西医)的融合形成现代系统医学。该体系所涉及的一切问题不管从广度上,还是从深度上,都应该远远超过现有的中西医学理论,并将现有中西医学理论纳入自己的理论框架范围之内。为了肩负起这一历史使命,原创人生、医学理论体系灵魂医学 soul medicine 应运而生,她不但从宏观上或战略上圆满解释并解决了存在于人类医学及人文社会科学史上的一切疑难模糊问题,而且还能够使人们得以启迪人生,不得不重新认识人类自身、不得不重新认识人类赖以生存的这个多维世界。医学化验 医学定义(medicine),是处理人健康定义中人的生理处于良好状态相关问题的一种科学,以治疗预防生理疾病和提高人体生理机体健康为目的。狭义的医学只是疾病的治疗和机体有效功能的极限恢复,广义的医学还包括中国养生学和由此衍生的西方的营养学。现在世界上医学主要有西方微观西医学和东方宏观中医学两大系统体系。医学的科学性在与应用基础医学的理论不断完善和实践的验证,例如生化、生理、微生物学、解剖、病理学、药理学、统计学、流行病学,中医学及中医技能等,来治疗疾病与促进健康。虽然东西方由于思维方式的不同导致研究人体健康与外界联系及病理机制的宏观微观顺序不同,但在不远的将来中西医实践的丰富经验的积累和理论的形成必将诞生新的医学- 人类医学。 不同于现代医学,不同于传统中医, 金水医学诞生了,金水医学是以驱除病理,恢复生理为主张的全新医学 ,走出了人类医学的误区,治疗疾病的特色鲜明,不论是任何疾病都能做到从危为安,由重到轻的恢复办法。金水医学认识到人体是生命体,生命体有自己的强大的生理自我愈合功能,帮助生命体恢复自主作用才是治疗疾病的根本。针对当今现代文明病,现代疑难病,现代慢性病,亚健康,一体多病,取得了巨大的成功,治疗法则为“胃肠洁,气血流,玄府开,营卫昌”人生命体运动符合自然节律,最终达到人体生理增强,消灭疾病的目的。 编辑本段医学的分类医学研究 医学可分为现代医学(即通常说的西医学)和传统医学(包括中医学、藏医学、蒙医学等)多种医学体系。不同地区和民族都有相应的一些医学体系,宗旨和目的不相同。印度传统医学系统也被认为很发达。 研究领域大方向包括基础医学、临床医学、检验医学、预防医学、保健医学、康复医学等。 基础医学包括:医学生物数学, 医学生物化学, 医学生物物理学 ,人体解剖学, 医学细胞生物学 ,人体生理学, 人体组织学 ,人体胚胎学, 医学遗传学, 人体免疫学, 医学寄生虫学, 医学微生物学 ,医学病毒学, 人体病理学 ,病理生理学, 药理学, 医学实验动物学, 医学心理学, 生物医学工程学 ,医学信息学, 急救学, 护病学, 新中心法则。 临床医学包括: 临床诊断学 实验诊断学.影像诊断学+ 放射诊断学+ 超声诊断学+ 核医诊断学* 临床治疗学 职能治疗学 化学治疗学 生物治疗学 血液治疗学 组织器官治疗学 饮食治疗学 物理治疗学 语言治疗学 心理治疗学 内科学 外科学 泌尿科学 妇产科学 儿科学 老年医学 眼科学 耳鼻喉科学 口腔医学 传染病学 皮肤医学 神经医学 精神病学 肿瘤医学 急诊医学 麻醉学 护理学 家庭医学 性医学 临终关怀学 康复医学 保健医学 听力学。 编辑本段医学的上个世纪末,本世纪初,1996 年,清华学界对中医气本质,经络实质,阴阳,五行,藏象,中医哲学观等都有了新的全面整体创造性的认识和解说。如,邓宇等发现的:气是流动着的信息能量物质的混合统一体;(45传染病q566 丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh)分形分维的经络解剖结构;数理阴阳;中医分形集:分形阴阳集阴阳集的分形分维数,五行分形集五行集的分维数;分形藏象五系统暨心系统、肝系统、脾系统、肺系统、肾系统;中医三个哲学观新提出的第三哲学观:相似观分形论等。 (df肺25s血液f369血小板t5172 红血球gdf55m 白血球fd2) 还包括近代针灸经络的发展史,近代中医气的进展简史,中西医结合史,中医中药史等. 古代(经典)中医史(4f肿瘤fbb癌症yuw3胃癌d65io肠癌.f2tr肺癌65ff)中国的中医学起源于三皇五帝时期,相传伏羲发明了(45传染病q566 丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh)针灸并尝试草药。在公元前3000 多年,中国的轩辕黄帝写下了人类第一部医学著作祝由科,后世人在这部医药著作的基础上不断增补删改,逐渐形成了后来的黄帝内经和黄帝外经,并由祝由科里将纯粹的医药分离了出来,形成了后来的中医学。而其中的黄帝内经则在世界上(df高血压958心脏病983u6 糖尿病87fr)第一个提出了“不治已病治未病”这一防病养生保健康的预防医学观点。 (df4肺炎88gdg 青霉素d25f肝炎df6)轩辕黄帝早在周代(公元前1046 年(df肺25s血液f369血小板t5172 红血球gdf55m 白血球fd2)公元前771年)就建立了世界上第一个医院和医疗制度,周代的医疗机构设有医师、上士、下士、府(管药库)、史(管记录)、徒若干人。下面又分食医(管饮食卫库)、疾医(内科)、疡医(外科)、兽医四种,这是世界上最早的医学分科。医师总管医药行政,并在年终
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