内科学内科学( (心血管病心血管病) )专业优秀论文专业优秀论文 卡维地洛对慢性心力衰竭大鼠细卡维地洛对慢性心力衰竭大鼠细胞骨架和细胞连接影响的实验研究胞骨架和细胞连接影响的实验研究关键词：心力衰竭关键词：心力衰竭 卡维地络卡维地络 药理实验药理实验摘要：目的：利用异丙基肾上腺素诱导的慢性心力衰竭(CHF)大鼠模型，观察 -受体阻滞剂-卡维地络(Car)对左室重构，细胞骨架及细胞连接的影响，并 探讨其机制，为临床防治心力衰竭提供理论基础。具体为：(1)左心室重构和心 功能：观察 -受体阻滞剂对 CHF 大鼠左室结构和血流动力学指标的影响；(2) 细胞骨架方面：探讨 CHF 大鼠小 GTP 结合蛋白 Racl 和 RhoA 对细胞骨架的调控 作用以及 -受体阻滞剂对 CHF 大鼠细胞骨架的影响；(3)细胞连接方面：研究 -受体阻滞剂对 CHF 大鼠细胞连接和闰盘的影响。 方法：(1)建立心力衰竭 大鼠模型，将 ISO 诱导的 CHF 大鼠随机分成 ISO 组与 ISO+Carvedilol 组，同时 以正常大鼠为对照组。ISO+Carvedilol 组，给予 Carvedilol 30mg/kg/d(用生 理盐水溶解)，分两次每日灌胃；ISO 组给予相应生理盐水每日两次灌胃；对照 组不予处置。八周后行以下检查：(2)心动超声；(3)心脏血流动力学及左室重 量/体重；(4)心肌组织形态学分析：光镜及电镜下观察心肌组织的超微结构； (5)免疫组织化学方法测定大鼠心肌组织 tubulin、fibronectin、CX43 及 integrin1 的蛋白表达；(6)逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法测定心肌组织 Rac1、RhoA、Roek、MLP、FAK、titin、Talin、MHC、Vinculin、integrin1 、及 CX43 mRNA 的表达。 结果：(1)心功能指标：与对照组比较，ISO 组左 室短轴缩短率(FS)及左室射血分数(LVEF)明显降低，而 ISO+Carvedilol 组， LVEF 及 FS 值则介于对照组与 ISO 组之间，且与 ISO 组比较，LVEF 及 FS 明显升 高；(2)心室重构指标：与对照组比较，ISO 组左室收缩末期内径(LVESD)及 舒张末期内径(LVEDD)明显增大，而 ISO+Carvedilol 组，LVESD 及 LVEDD 值则 介于对照组与 ISO 组之间，且与 ISO 组比较，LVESD 及 LVEDD 明显降低；与 对照组相比，ISO 组和 ISO+Carvedilol 组左室重量，左室重量指数(左室重量/ 体重)明显增大，体重明显减轻；与 ISO 组比较，ISO+Carvedilol 组左室重量， 左室重量指数降低，两组间体重无明显差异。(3)电镜下观察心肌超微结构，与 对照组比较，ISO 组可见肌节结构紊乱，闰盘连接结构局灶性断裂，细胞核固 缩，核周线粒体嵴排列紊乱；ISO+carvedilol 组较 ISO 组明显改善。(4)小 GTP 结合蛋白：Rac1：ISO 组大鼠心肌 Rac1mRNA 表达高于对照组，Carvedilol 治 疗可以明显降低 Rac1mRNA 表达；RhoA：与对照组比较，ISO 组心肌组织 RhoA mRNA 表达上调，而 Carvedilol 治疗则能显著降低心肌组织 RhoA mRNA 表达； Rho 激酶：ISO 组大鼠心肌 Rho 激酶 mRNA 表达高于对照组，Carvedilol 治疗 可以明显降低 Rho 激酶 mRNA 表达。(5)细胞骨架支持蛋白：ISO 组大鼠 tubulin 蛋白含量较对照组显著升高，与 ISO 组比较，ISO+Carvedilol 组 tubulin 含量明显降低；在 ISO 组，大鼠心肌 vinculin 和 Talin mRNA 表达 较对照组显著升高，与 ISO 组比较，ISO+Carvedilol 组 vinculin 和 Talin mRNA 含量明显降低；(6)细胞骨架收缩蛋白：ISO 组大鼠心肌 MLP 及 titin mRNA 的表达明显低于对照组，Carvedilol 治疗可以明显提高 MLP 及 titin mRNA 的表达；心力衰竭大鼠心肌 -MHC mRNA 表达减少，-MHC mRNA 表达 增加，Carvedilol 能够增加 -MHC mRNA 的表达而减少 -MHC mRNA 的表达；(7)细胞连接及相关指标：ISO 组大鼠心肌 CX43 mRNA 及蛋白表达低于对照组， Carvedilol 治疗可以明显升高 CX43 mRNA 及蛋白表达；ISO 组大鼠心肌 integrin 1 mRNA 及蛋白表达低于对照组，Carvedilol 治疗可以明显升高 integrin1 mRNA 及蛋白表达；ISO 组大鼠心肌 FAK mRNA 表达高于对照组， Carvedilol 治疗可以明显降低 FAK mRNA 的表达；(8)ISO 组大鼠 Fibronectin 蛋白含量较对照组显著升高，与 ISO 组比较，ISO+Carvedilol 组 Fibronectin 含量明显降低。 结论：(1) Carvedilol 通过抑制小 GTP 结合蛋白 RhoA、Rac1 及 Rho 激酶，调整细胞骨架的构成，改善左室重构及心脏功能：(2) Carvedilol 通过改变细胞骨架支持蛋白和收缩蛋白的构成，从而改善慢性心力 衰竭大鼠左室重构和心脏功能；(3)Carvedilol 通过改变细胞连接和细胞外基 质成分，从而改善慢性心力衰竭大鼠心脏功能。正文内容正文内容目的：利用异丙基肾上腺素诱导的慢性心力衰竭(CHF)大鼠模型，观察 - 受体阻滞剂-卡维地络(Car)对左室重构，细胞骨架及细胞连接的影响，并探 讨其机制，为临床防治心力衰竭提供理论基础。具体为：(1)左心室重构和心功 能：观察 -受体阻滞剂对 CHF 大鼠左室结构和血流动力学指标的影响；(2)细 胞骨架方面：探讨 CHF 大鼠小 GTP 结合蛋白 Racl 和 RhoA 对细胞骨架的调控作 用以及 -受体阻滞剂对 CHF 大鼠细胞骨架的影响；(3)细胞连接方面：研究 -受体阻滞剂对 CHF 大鼠细胞连接和闰盘的影响。 方法：(1)建立心力衰竭 大鼠模型，将 ISO 诱导的 CHF 大鼠随机分成 ISO 组与 ISO+Carvedilol 组，同时 以正常大鼠为对照组。ISO+Carvedilol 组，给予 Carvedilol 30mg/kg/d(用生 理盐水溶解)，分两次每日灌胃；ISO 组给予相应生理盐水每日两次灌胃；对照 组不予处置。八周后行以下检查：(2)心动超声；(3)心脏血流动力学及左室重 量/体重；(4)心肌组织形态学分析：光镜及电镜下观察心肌组织的超微结构； (5)免疫组织化学方法测定大鼠心肌组织 tubulin、fibronectin、CX43 及 integrin1 的蛋白表达；(6)逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法测定心肌组织 Rac1、RhoA、Roek、MLP、FAK、titin、Talin、MHC、Vinculin、integrin1 、及 CX43 mRNA 的表达。 结果：(1)心功能指标：与对照组比较，ISO 组左 室短轴缩短率(FS)及左室射血分数(LVEF)明显降低，而 ISO+Carvedilol 组， LVEF 及 FS 值则介于对照组与 ISO 组之间，且与 ISO 组比较，LVEF 及 FS 明显升 高；(2)心室重构指标：与对照组比较，ISO 组左室收缩末期内径(LVESD)及 舒张末期内径(LVEDD)明显增大，而 ISO+Carvedilol 组，LVESD 及 LVEDD 值则 介于对照组与 ISO 组之间，且与 ISO 组比较，LVESD 及 LVEDD 明显降低；与 对照组相比，ISO 组和 ISO+Carvedilol 组左室重量，左室重量指数(左室重量/ 体重)明显增大，体重明显减轻；与 ISO 组比较，ISO+Carvedilol 组左室重量， 左室重量指数降低，两组间体重无明显差异。(3)电镜下观察心肌超微结构，与 对照组比较，ISO 组可见肌节结构紊乱，闰盘连接结构局灶性断裂，细胞核固 缩，核周线粒体嵴排列紊乱；ISO+carvedilol 组较 ISO 组明显改善。(4)小 GTP 结合蛋白：Rac1：ISO 组大鼠心肌 Rac1mRNA 表达高于对照组，Carvedilol 治 疗可以明显降低 Rac1mRNA 表达；RhoA：与对照组比较，ISO 组心肌组织 RhoA mRNA 表达上调，而 Carvedilol 治疗则能显著降低心肌组织 RhoA mRNA 表达； Rho 激酶：ISO 组大鼠心肌 Rho 激酶 mRNA 表达高于对照组，Carvedilol 治疗 可以明显降低 Rho 激酶 mRNA 表达。(5)细胞骨架支持蛋白：ISO 组大鼠 tubulin 蛋白含量较对照组显著升高，与 ISO 组比较，ISO+Carvedilol 组 tubulin 含量明显降低；在 ISO 组，大鼠心肌 vinculin 和 Talin mRNA 表达 较对照组显著升高，与 ISO 组比较，ISO+Carvedilol 组 vinculin 和 Talin mRNA 含量明显降低；(6)细胞骨架收缩蛋白：ISO 组大鼠心肌 MLP 及 titin mRNA 的表达明显低于对照组，Carvedilol 治疗可以明显提高 MLP 及 titin mRNA 的表达；心力衰竭大鼠心肌 -MHC mRNA 表达减少，-MHC mRNA 表达 增加，Carvedilol 能够增加 -MHC mRNA 的表达而减少 -MHC mRNA 的表达； (7)细胞连接及相关指标：ISO 组大鼠心肌 CX43 mRNA 及蛋白表达低于对照组， Carvedilol 治疗可以明显升高 CX43 mRNA 及蛋白表达；ISO 组大鼠心肌 integrin 1 mRNA 及蛋白表达低于对照组，Carvedilol 治疗可以明显升高 integrin1 mRNA 及蛋白表达；ISO 组大鼠心肌 FAK mRNA 表达高于对照组，Carvedilol 治疗可以明显降低 FAK mRNA 的表达；(8)ISO 组大鼠 Fibronectin 蛋白含量较对照组显著升高，与 ISO 组比较，ISO+Carvedilol 组 Fibronectin 含量明显降低。 结论：(1) Carvedilol 通过抑制小 GTP 结合蛋白 RhoA、Rac1 及 Rho 激酶，调整细胞骨架的构成，改善左室重构及心脏功能：(2) Carvedilol 通过改变细胞骨架支持蛋白和收缩蛋白的构成，从而改善慢性心力 衰竭大鼠左室重构和心脏功能；(3)Carvedilol 通过改变细胞连接和细胞外基 质成分，从而改善慢性心力衰竭大鼠心脏功能。 目的：利用异丙基肾上腺素诱导的慢性心力衰竭(CHF)大鼠模型，观察 -受体 阻滞剂-卡维地络(Car)对左室重构，细胞骨架及细胞连接的影响，并探讨其 机制，为临床防治心力衰竭提供理论基础。具体为：(1)左心室重构和心功能： 观察 -受体阻滞剂对 CHF 大鼠左室结构和血流动力学指标的影响；(2)细胞骨 架方面：探讨 CHF 大鼠小 GTP 结合蛋白 Racl 和 RhoA 对细胞骨架的调控作用以 及 -受体阻滞剂对 CHF 大鼠细胞骨架的影响；(3)细胞连接方面：研究 -受 体阻滞剂对 CHF 大鼠细胞连接和闰盘的影响。 方法：(1)建立心力衰竭大鼠 模型，将 ISO 诱导的 CHF 大鼠随机分成 ISO 组与 ISO+Carvedilol 组，同时以正 常大鼠为对照组。ISO+