外科学外科学( (神外神外) )专业优秀论文专业优秀论文 SELDI-TOFSELDI-TOF 质谱技术对急性重度颅脑质谱技术对急性重度颅脑及损伤病人蛋白质组学的研究及损伤病人蛋白质组学的研究关键词：蛋白质谱关键词：蛋白质谱 脑外伤脑外伤 蛋白质指纹图谱技术蛋白质指纹图谱技术 指纹图谱指纹图谱 脑组织脑组织 蛋白质组学蛋白质组学摘要：目的：利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术 分析重度颅脑损伤病人脑组织、血清中的差异蛋白质表达，以直接利用血清中 的差异性蛋白质来评估颅脑损伤，并评估此技术对颅脑损伤蛋白质组学的检测 价值及临床应用前景。 材料和方法： SELDI-TOF-MS、ProteinChip Biology System(PBS-)型质谱仪、能量吸收分子 SPA、弱阳离子交换型蛋白质芯片 CM- 10、Ciphergen ProteinChip3.01 软件、BioMarker Wizard 3.01 分析软件均由 美国 Ciphergen 公司生产。哈尔滨医科大学附属第一医院 2005 年 2 月-2006 年 10 月神经外科收治的急性重度颅脑损伤病人 21 例(男性 15 例，女性 6 例，年 龄 15-65 岁，平均 37.5 岁，GCS 评分小于 8 分)，伤后 3-20 小时，同时取挫伤 的额部皮层脑组织和血清标本，颅内损伤情况由 MRI 或 CT 证实。对照组脑组织 取自 5 名脑出血病人(出血量25ml)行血肿钻孔前皮层组织，平均年龄 45.5 岁； 对照组血清样本来自 5 名正常人，均为无疾病证据的医务人员，平均年龄 35.5 岁，抽取清晨空腹前臂静脉血 5ml；所有标本取出后，均于 30 分钟内在-80 保存。应用 SELDI-TOF-MS 技术比较损伤组(重度颅脑损伤病人，21 例)和对照 组(脑出血病人，5 例；正常人，5 例)大脑皮层组织之间、血清之间蛋白质的差 异表达，筛选出血清中反映颅脑损伤的差异性蛋白质。 结果：共有 116 个 m/z 在 200020000 之间的蛋白质波峰被标记，其中 m/z 值主要集中在 200010000，共有 101 个。每例病人脑组织、血清之间有 13-39 个相同的差异 性蛋白质表达。损伤组、对照组脑组织之间对比发现 36 个差异性蛋白质峰；损 伤组、对照组血清之间对比发现 26 个差异性蛋白质峰；损伤组脑组织、血清比 较出 8 个相同的差异性蛋白质峰。 结论：颅脑损伤病人脑组织、血清之间能 找到多个相同的差异性蛋白质点，脑组织产生的差异蛋白质或多肽适时进入血 液中，相应地在血清中检测出来，能够为直接利用血清中差异性蛋白质谱评估 颅脑损伤打下基础。SELDI-TOF-MS 技术是一种新的蛋白质组学方法，利用其快 速、简便易行且高通量的特点，能够同时检测标本中大量的蛋白质，不仅能直 接筛选出评价颅脑损伤相对特异的潜在标记物，而且具有较好的临床应用前景。正文内容正文内容目的：利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分 析重度颅脑损伤病人脑组织、血清中的差异蛋白质表达，以直接利用血清中的 差异性蛋白质来评估颅脑损伤，并评估此技术对颅脑损伤蛋白质组学的检测价 值及临床应用前景。 材料和方法： SELDI-TOF-MS、ProteinChip Biology System(PBS-)型质谱仪、能量吸收分子 SPA、弱阳离子交换型蛋白质芯片 CM- 10、Ciphergen ProteinChip3.01 软件、BioMarker Wizard 3.01 分析软件均由 美国 Ciphergen 公司生产。哈尔滨医科大学附属第一医院 2005 年 2 月-2006 年 10 月神经外科收治的急性重度颅脑损伤病人 21 例(男性 15 例，女性 6 例，年 龄 15-65 岁，平均 37.5 岁，GCS 评分小于 8 分)，伤后 3-20 小时，同时取挫伤 的额部皮层脑组织和血清标本，颅内损伤情况由 MRI 或 CT 证实。对照组脑组织 取自 5 名脑出血病人(出血量25ml)行血肿钻孔前皮层组织，平均年龄 45.5 岁； 对照组血清样本来自 5 名正常人，均为无疾病证据的医务人员，平均年龄 35.5 岁，抽取清晨空腹前臂静脉血 5ml；所有标本取出后，均于 30 分钟内在-80 保存。应用 SELDI-TOF-MS 技术比较损伤组(重度颅脑损伤病人，21 例)和对照 组(脑出血病人，5 例；正常人，5 例)大脑皮层组织之间、血清之间蛋白质的差 异表达，筛选出血清中反映颅脑损伤的差异性蛋白质。 结果：共有 116 个 m/z 在 200020000 之间的蛋白质波峰被标记，其中 m/z 值主要集中在 200010000，共有 101 个。每例病人脑组织、血清之间有 13-39 个相同的差异 性蛋白质表达。损伤组、对照组脑组织之间对比发现 36 个差异性蛋白质峰；损 伤组、对照组血清之间对比发现 26 个差异性蛋白质峰；损伤组脑组织、血清比 较出 8 个相同的差异性蛋白质峰。 结论：颅脑损伤病人脑组织、血清之间能 找到多个相同的差异性蛋白质点，脑组织产生的差异蛋白质或多肽适时进入血 液中，相应地在血清中检测出来，能够为直接利用血清中差异性蛋白质谱评估 颅脑损伤打下基础。SELDI-TOF-MS 技术是一种新的蛋白质组学方法，利用其快 速、简便易行且高通量的特点，能够同时检测标本中大量的蛋白质，不仅能直 接筛选出评价颅脑损伤相对特异的潜在标记物，而且具有较好的临床应用前景。目的：利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分析重 度颅脑损伤病人脑组织、血清中的差异蛋白质表达，以直接利用血清中的差异 性蛋白质来评估颅脑损伤，并评估此技术对颅脑损伤蛋白质组学的检测价值及 临床应用前景。 材料和方法： SELDI-TOF-MS、ProteinChip Biology System(PBS-)型质谱仪、能量吸收分子 SPA、弱阳离子交换型蛋白质芯片 CM- 10、Ciphergen ProteinChip3.01 软件、BioMarker Wizard 3.01 分析软件均由 美国 Ciphergen 公司生产。哈尔滨医科大学附属第一医院 2005 年 2 月-2006 年 10 月神经外科收治的急性重度颅脑损伤病人 21 例(男性 15 例，女性 6 例，年 龄 15-65 岁，平均 37.5 岁，GCS 评分小于 8 分)，伤后 3-20 小时，同时取挫伤 的额部皮层脑组织和血清标本，颅内损伤情况由 MRI 或 CT 证实。对照组脑组织 取自 5 名脑出血病人(出血量25ml)行血肿钻孔前皮层组织，平均年龄 45.5 岁； 对照组血清样本来自 5 名正常人，均为无疾病证据的医务人员，平均年龄 35.5 岁，抽取清晨空腹前臂静脉血 5ml；所有标本取出后，均于 30 分钟内在-80 保存。应用 SELDI-TOF-MS 技术比较损伤组(重度颅脑损伤病人，21 例)和对照 组(脑出血病人，5 例；正常人，5 例)大脑皮层组织之间、血清之间蛋白质的差异表达，筛选出血清中反映颅脑损伤的差异性蛋白质。 结果：共有 116 个 m/z 在 200020000 之间的蛋白质波峰被标记，其中 m/z 值主要集中在 200010000，共有 101 个。每例病人脑组织、血清之间有 13-39 个相同的差异 性蛋白质表达。损伤组、对照组脑组织之间对比发现 36 个差异性蛋白质峰；损 伤组、对照组血清之间对比发现 26 个差异性蛋白质峰；损伤组脑组织、血清比 较出 8 个相同的差异性蛋白质峰。 结论：颅脑损伤病人脑组织、血清之间能 找到多个相同的差异性蛋白质点，脑组织产生的差异蛋白质或多肽适时进入血 液中，相应地在血清中检测出来，能够为直接利用血清中差异性蛋白质谱评估 颅脑损伤打下基础。SELDI-TOF-MS 技术是一种新的蛋白质组学方法，利用其快 速、简便易行且高通量的特点，能够同时检测标本中大量的蛋白质，不仅能直 接筛选出评价颅脑损伤相对特异的潜在标记物，而且具有较好的临床应用前景。目的：利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分析重 度颅脑损伤病人脑组织、血清中的差异蛋白质表达，以直接利用血清中的差异 性蛋白质来评估颅脑损伤，并评估此技术对颅脑损伤蛋白质组学的检测价值及 临床应用前景。 材料和方法： SELDI-TOF-MS、ProteinChip Biology System(PBS-)型质谱仪、能量吸收分子 SPA、弱阳离子交换型蛋白质芯片 CM- 10、Ciphergen ProteinChip3.01 软件、BioMarker Wizard 3.01 分析软件均由 美国 Ciphergen 公司生产。哈尔滨医科大学附属第一医院 2005 年 2 月-2006 年 10 月神经外科收治的急性重度颅脑损伤病人 21 例(男性 15 例，女性 6 例，年 龄 15-65 岁，平均 37.5 岁，GCS 评分小于 8 分)，伤后 3-20 小时，同时取挫伤 的额部皮层脑组织和血清标本，颅内损伤情况由 MRI 或 CT 证实。对照组脑组织 取自 5 名脑出血病人(出血量25ml)行血肿钻孔前皮层组织，平均年龄 45.5 岁； 对照组血清样本来自 5 名正常人，均为无疾病证据的医务人员，平均年龄 35.5 岁，抽取清晨空腹前臂静脉血 5ml；所有标本取出后，均于 30 分钟内在-80 保存。应用 SELDI-TOF-MS 技术比较损伤组(重度颅脑损伤病人，21 例)和对照 组(脑出血病人，5 例；正常人，5 例)大脑皮层组织之间、血清之间蛋白质的差 异表达，筛选出血清中反映颅脑损伤的差异性蛋白质。 结果：共有 116 个 m/z 在 200020000 之间的蛋白质波峰被标记，其中 m/z 值主要集中在 200010000，共有 101 个。每例病人脑组织、血清之间有 13-39 个相同的差异 性蛋白质表达。损伤组、对照组脑组织之间对比发现 36 个差异性蛋白质峰；损 伤组、对照组血清之间对比发现 26 个差异性蛋白质峰；损伤组脑组织、血清比 较出 8 个相同的差异性蛋白质峰。 结论：颅脑损伤病人脑组织、血清之间能 找到多个相同的差异性蛋白质点，脑组织产生的差异蛋白质或多肽适时进入血 液中，相应地在血清中检测出来，能够为直接利用血清中差异性蛋白质谱评估 颅脑损伤打下基础。SELDI-TOF-MS 技术是一种新的蛋白质组学方法，利用其快 速、简便易行且高通量的特点，能够同时检测标本中大量的蛋白质，不仅能直 接筛选出评价颅脑损伤相对特异的潜在标记物，而且具有较好的临床应用前景。目的：利用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分析重 度颅脑损伤病人脑组织、血清中的差异蛋白质表达，以直接利用血清中的差异 性蛋白质来评估颅脑损伤，并评估此技术对颅脑损伤蛋白质组学的检测价值及 临床应用前景。 材料和方法： SELDI-TOF-MS、ProteinChip Biology System(PBS-)型质谱仪、能量吸收分子 SPA、弱阳离子交换型蛋白质芯片 CM-10、Ciphergen ProteinChip3.01 软件、BioMarker Wizard 3.01 分析软件均由 美国 Ciphergen 公司生产。哈尔滨医科大学附属第一医院 2005 年 2 月-2006 年 10 月神经外科收治的急性重度颅脑损伤病人 21 例(男性 15 例，女性 6 例，年 龄 15-65 岁，平均 37.5 岁，GCS 评分小于 8 分)，伤后 3-20 小时，同时取挫伤 的额部皮层脑组织和血清标本，颅内损伤情况由 MRI 或 CT 证实。对