外科学外科学( (泌尿外科泌尿外科) )专业毕业论文专业毕业论文 精品论文精品论文 中药复方制剂对膀中药复方制剂对膀胱癌细胞株胱癌细胞株 T24T24 增殖影响增殖影响关键词：中药单体复方关键词：中药单体复方 正交试验正交试验 膀胱肿瘤膀胱肿瘤 抑制率抑制率摘要：目的： 研究通过正交试验设计，进行人参皂甙 Rg3，姜黄素，槲皮素 三种中药复方对体外培养人膀胱肿瘤 T24 细胞株作用的优化研究，为进一步的 研究与临床应用奠定基础，为解释中药组方的配伍原则，为科学的组方提供理 论依据。 方法： 用细胞毒试验分别测定人参皂甙 Rg3，姜黄素，槲皮素 三种单体中药 24 小时对人膀胱癌 T24 细胞株的抑制率，通过 IC50 计算分析软 件得出三种中药单体 24 小时内作用于膀胱癌细胞株 T24 的半数抑制率(IC50)。 根据三种单体中药的 IC50 值制定正交试验因素水平。根据正交试验因素选取 L9(34)正交试验表，用细胞毒试验测定表中每组中药复方配伍制剂 24 小时对人 膀胱癌 T24 细胞株的抑制率，用 Annexin V- FITC/ PI 检测凋亡，将两种试验 所得数据顺序入列，水平对号入座，利用正交试验助手分析软件计算分析试验 结果(数据)，采用直观分析法，得出最佳剂量的配伍。将所得最佳配伍剂量与 各个中药单体和羟基喜树碱进行对比，试验分组为空白对照组，中药复方制剂 组，人参皂甙 Rg3 组，槲皮素组，姜黄素组，阳性对照组(羟基喜树碱)，得到 双变量流式细胞仪的散点图，观察中药复方制剂的药物效果。用荧光显微镜观 察中药复方制剂 24h 作用人膀胱癌 T24 细胞株后，细胞膜和细胞核的状态。 结果： 通过细胞毒试验和 IC50 计算分析软件得到三种中药的 IC50 值，人参 皂甙 Rg3160mol/L，姜黄素 24mol/L，槲皮素 152mol/L。根据所得的 IC50 值制定出正交试验因素水平，人参皂甙 Rg340mol/L，80mol/L，160mol/L，姜黄素 6mol/L，12mol/L，24mol/L，槲皮素 38mol/L，76mol/L，152mol/L。选取 L9(34)表格为本次试验的正交表格， 通过细胞毒试验和流式细胞检测凋亡率试验，得到数据代入正交表格，通过正 交助手试验分析软件，采用直观分析法得到，A3，B3，Cl 均较其他水平好，由 极差排列出主次顺序为 Agt;Cgt;B，故得出最佳剂量的配伍为人参 皂甙 Rg3160mol/L，槲皮素 38mol/L，姜黄素 24mol/L。将所得最佳配伍 剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行对比。流式细胞仪激发光波长用 488nm，用一波长为 515 nm 的通带滤器检测 FITC 荧光，另一波长大于 560nm 的 滤器检测 PI，双变量流式细胞仪的散点图上，中药复方制剂的药效要好于其他 分组，其作用后的人膀胱癌肿瘤细胞以凋亡和死亡为主，而活细胞基本没有。 于荧光显微镜观察，可以清晰的观察到细胞凋亡和细胞坏死的存在。 结论： 依据国内外的研究成果及以上我们的前期工作基础，本课题应用正交试验技术 设计三种中药单体优化配伍复方用于膀胱癌的研究，通过体外实验观察它们对 膀胱癌细胞的凋亡诱导效应和生长抑制状况，挖掘其膀胱灌注优势复方。并且 证实中药复方制剂 24h 对人膀胱肿瘤细胞株 T24 细胞，有很好的诱导凋亡的能 力。但是，试验是利用直观分析法分析正交试验结果后，由于所得的最佳搭配 只是相对于被选因素和水平而言的，不是绝对的“最佳” ，因而也有一定的片面 性。正文内容正文内容目的： 研究通过正交试验设计，进行人参皂甙 Rg3，姜黄素，槲皮素三 种中药复方对体外培养人膀胱肿瘤 T24 细胞株作用的优化研究，为进一步的研 究与临床应用奠定基础，为解释中药组方的配伍原则，为科学的组方提供理论 依据。 方法： 用细胞毒试验分别测定人参皂甙 Rg3，姜黄素，槲皮素三 种单体中药 24 小时对人膀胱癌 T24 细胞株的抑制率，通过 IC50 计算分析软件 得出三种中药单体 24 小时内作用于膀胱癌细胞株 T24 的半数抑制率(IC50)。根 据三种单体中药的 IC50 值制定正交试验因素水平。根据正交试验因素选取 L9(34)正交试验表，用细胞毒试验测定表中每组中药复方配伍制剂 24 小时对人 膀胱癌 T24 细胞株的抑制率，用 Annexin V- FITC/ PI 检测凋亡，将两种试验 所得数据顺序入列，水平对号入座，利用正交试验助手分析软件计算分析试验 结果(数据)，采用直观分析法，得出最佳剂量的配伍。将所得最佳配伍剂量与 各个中药单体和羟基喜树碱进行对比，试验分组为空白对照组，中药复方制剂 组，人参皂甙 Rg3 组，槲皮素组，姜黄素组，阳性对照组(羟基喜树碱)，得到 双变量流式细胞仪的散点图，观察中药复方制剂的药物效果。用荧光显微镜观 察中药复方制剂 24h 作用人膀胱癌 T24 细胞株后，细胞膜和细胞核的状态。 结果： 通过细胞毒试验和 IC50 计算分析软件得到三种中药的 IC50 值，人参 皂甙 Rg3160mol/L，姜黄素 24mol/L，槲皮素 152mol/L。根据所得的 IC50 值制定出正交试验因素水平，人参皂甙 Rg340mol/L，80mol/L，160mol/L，姜黄素 6mol/L，12mol/L，24mol/L，槲皮素 38mol/L，76mol/L，152mol/L。选取 L9(34)表格为本次试验的正交表格， 通过细胞毒试验和流式细胞检测凋亡率试验，得到数据代入正交表格，通过正 交助手试验分析软件，采用直观分析法得到，A3，B3，Cl 均较其他水平好，由 极差排列出主次顺序为 Agt;Cgt;B，故得出最佳剂量的配伍为人参 皂甙 Rg3160mol/L，槲皮素 38mol/L，姜黄素 24mol/L。将所得最佳配伍 剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行对比。流式细胞仪激发光波长用 488nm，用一波长为 515 nm 的通带滤器检测 FITC 荧光，另一波长大于 560nm 的 滤器检测 PI，双变量流式细胞仪的散点图上，中药复方制剂的药效要好于其他 分组，其作用后的人膀胱癌肿瘤细胞以凋亡和死亡为主，而活细胞基本没有。 于荧光显微镜观察，可以清晰的观察到细胞凋亡和细胞坏死的存在。 结论： 依据国内外的研究成果及以上我们的前期工作基础，本课题应用正交试验技术 设计三种中药单体优化配伍复方用于膀胱癌的研究，通过体外实验观察它们对 膀胱癌细胞的凋亡诱导效应和生长抑制状况，挖掘其膀胱灌注优势复方。并且 证实中药复方制剂 24h 对人膀胱肿瘤细胞株 T24 细胞，有很好的诱导凋亡的能 力。但是，试验是利用直观分析法分析正交试验结果后，由于所得的最佳搭配 只是相对于被选因素和水平而言的，不是绝对的“最佳” ，因而也有一定的片面 性。 目的： 研究通过正交试验设计，进行人参皂甙 Rg3，姜黄素，槲皮素三种中 药复方对体外培养人膀胱肿瘤 T24 细胞株作用的优化研究，为进一步的研究与 临床应用奠定基础，为解释中药组方的配伍原则，为科学的组方提供理论依据。方法： 用细胞毒试验分别测定人参皂甙 Rg3，姜黄素，槲皮素三种单体 中药 24 小时对人膀胱癌 T24 细胞株的抑制率，通过 IC50 计算分析软件得出三种中药单体 24 小时内作用于膀胱癌细胞株 T24 的半数抑制率(IC50)。根据三种 单体中药的 IC50 值制定正交试验因素水平。根据正交试验因素选取 L9(34)正 交试验表，用细胞毒试验测定表中每组中药复方配伍制剂 24 小时对人膀胱癌 T24 细胞株的抑制率，用 Annexin V- FITC/ PI 检测凋亡，将两种试验所得数 据顺序入列，水平对号入座，利用正交试验助手分析软件计算分析试验结果(数 据)，采用直观分析法，得出最佳剂量的配伍。将所得最佳配伍剂量与各个中药 单体和羟基喜树碱进行对比，试验分组为空白对照组，中药复方制剂组，人参 皂甙 Rg3 组，槲皮素组，姜黄素组，阳性对照组(羟基喜树碱)，得到双变量流 式细胞仪的散点图，观察中药复方制剂的药物效果。用荧光显微镜观察中药复 方制剂 24h 作用人膀胱癌 T24 细胞株后，细胞膜和细胞核的状态。 结果： 通过细胞毒试验和 IC50 计算分析软件得到三种中药的 IC50 值，人参皂甙 Rg3160mol/L，姜黄素 24mol/L，槲皮素 152mol/L。根据所得的 IC50 值 制定出正交试验因素水平，人参皂甙 Rg340mol/L，80mol/L，160mol/L，姜黄素 6mol/L，12mol/L，24mol/L，槲皮素 38mol/L，76mol/L，152mol/L。选取 L9(34)表格为本次试验的正交表格， 通过细胞毒试验和流式细胞检测凋亡率试验，得到数据代入正交表格，通过正 交助手试验分析软件，采用直观分析法得到，A3，B3，Cl 均较其他水平好，由 极差排列出主次顺序为 Agt;Cgt;B，故得出最佳剂量的配伍为人参 皂甙 Rg3160mol/L，槲皮素 38mol/L，姜黄素 24mol/L。将所得最佳配伍 剂量与各个中药单体和羟基喜树碱进行对比。流式细胞仪激发光波长用 488nm，用一波长为 515 nm 的通带滤器检测 FITC 荧光，另一波长大于 560nm 的 滤器检测 PI，双变量流式细胞仪的散点图上，中药复方制剂的药效要好于其他 分组，其作用后的人膀胱癌肿瘤细胞以凋亡和死亡为主，而活细胞基本没有。 于荧光显微镜观察，可以清晰的观察到细胞凋亡和细胞坏死的存在。 结论： 依据国内外的研究成果及以上我们的前期工作基础，本课题应用正交试验技术 设计三种中药单体优化配伍复方用于膀胱癌的研究，通过体外实验观察它们对 膀胱癌细胞的凋亡诱导效应和生长抑制状况，挖掘其膀胱灌注优势复方。并且 证实中药复方制剂 24h 对人膀胱肿瘤细胞株 T24 细胞，有很好的诱导凋亡的能 力。但是，试验是利用直观分析法分析正交试验结果后，由于所得的最佳搭配 只是相对于被选因素和水平而言的，不是绝对的“最佳” ，因而也有一定的片面 性。 目的： 研究通过正交试验设计，进行人参皂甙 Rg3，姜黄素，槲皮素三种中 药复方对体外培养人膀胱肿瘤 T24 细胞株作用的优化研究，为进一步的研究与 临床应用奠定基础，为解释中药组方的配伍原则，为科学的组方提供理论依据。方法： 用细胞毒试验分别测定人参皂甙 Rg3，姜黄素，槲皮素三种单体 中药 24 小时对人膀胱癌 T24 细胞株的抑制率，通过 IC50 计算分析软件得出三 种中药单体 24 小时内作用于膀胱癌细胞株 T24 的半数抑制率(IC50)。根据三种 单体中药的 IC50 值制定正交试验因素水平。根据正交试验因素选取 L9(34)正 交试验表，用细胞毒试验测定表中每组中药复方配伍制剂 24 小时对人膀胱癌 T24 细胞株的抑制率，用 Annexin V- FITC/ PI 检测凋亡，将两种试验所得数 据顺序入列，水平对号入座，利用正交试验助手分析软件计算分析试验结果(数 据)，采用直观分析法，得出最佳剂量的配伍。将所得最佳配伍剂量与各个中药 单体和羟基喜树碱进行对比，试验分组为空白对照组，中药复方制剂组，人参皂甙 Rg3 组，槲皮素组，姜黄素组，阳性对照组(羟基喜树碱)，得到双变量流 式细胞仪的散点图，观察中药复方制剂的药物效果。用荧光显微镜观察中药复 方制剂 24h 作用人膀胱癌 T24 细胞株后，细胞膜和细胞核的状态。 结果： 通过细胞毒试验和 IC50 计算分析软件得到三种中药的 IC50 值，人参皂甙 Rg3160mol/L，姜黄素 24mol/L，槲皮素 152mol/L。