老年医学老年医学( (消化消化) )专业毕业论文专业毕业论文 精品论文精品论文 大鼠胃粘膜损伤的随大鼠胃粘膜损伤的随龄变化龄变化关键词：胃粘膜损伤关键词：胃粘膜损伤 随龄变化随龄变化 胃蛋白酶含量胃蛋白酶含量 阿司匹林阿司匹林 奥美拉唑奥美拉唑 保护作用保护作用摘要：目的： 1、比较大鼠胃粘膜组织结构和胃蛋白酶含量的随龄变化。 2、应用阿司匹林及奥美拉唑制备老龄和非老龄大鼠的损伤和保护模型。比较损 伤和保护因素对不同月龄大鼠胃粘膜和血液 NO、TNF 含量影响，并探讨其作用 机制。 方法：选择月龄 3 个月，体重 200-300g 及月龄 22 个月，体重 600- 800g 清洁级健康 Wistar 大鼠各 18 只，分别随机分为 3 组：老龄、非老龄阿司 匹林损伤组，老龄、非老龄奥美拉唑保护组和老龄、非老龄对照组。 1、光 镜下观察老龄、非老龄对照组大鼠胃粘膜腺体及肌层厚度，固有腺体数量及炎 性细胞浸润程度。胃蛋白酶试剂盒生化检测胃粘膜组织胃蛋白酶活力。免疫组 化方法检测大鼠粘膜 PCNA 的表达。 2、老龄、非老龄阿司匹林损伤组大鼠分 别用 100mg/kg 剂量阿司匹林灌胃；老龄、非老龄保护组大鼠分别用 20mg/kg 剂 量奥美拉唑灌胃。老龄、非老龄对照组大鼠分别给予生理盐水灌胃。处死前眼 球内眦静脉取血并分离血浆和血清，检测血浆 NO 含量、NOS、iNOS 及 cNOS 活 力。放射免疫法测血清 TNF 含量。分别按 Guth 评分标准大体观察及 whittle 评 分标准光镜下观察，比较各组大鼠胃粘膜损伤情况。 结果： 1、老龄对照 组大鼠胃粘膜色泽苍白、表面光滑、皱襞规整、表面可见附着较多粘液。非老 龄对照组大鼠胃粘膜色泽橘红、表面光滑、皱襞规整、表面亦附着较多粘液。 老龄和非老龄对照组大鼠胃体和胃窦粘膜均未见肠上皮化生、不典型增生及肿 瘤的发生。老龄对照组大鼠胃窦粘膜固有层腺体数量减少、腺体间隙增大，固 有层腺体层数减少，甚至消失；非老龄对照组大鼠胃窦粘膜固有腺体饱满清晰、 层教较多。老龄对照组大鼠胃窦粘膜厚度高于非老龄大鼠的胃窦粘膜厚度，但 老龄对照组大鼠胃体粘膜厚度与非老龄对照组大鼠胃体粘膜厚度相比无统计学 意义。老龄对照组大鼠的胃窦、胃体的粘膜肌层较非老龄对照组大鼠的粘膜肌 层增厚，镜下可见粘膜肌层向粘膜固有层呈分支状插入腺体之间。老龄对照组 大鼠胃液 PH 值较非老龄对照组 PH 值略高，但两者比较无统计学意义(P0.05)。 老龄对照组大鼠胃粘膜组织的蛋白酶含量下降，与非老龄大鼠比较有统计学差 别(P0.05)。非老龄对照组大鼠胃粘膜中 PCNA 阳性细胞主要定位于胃腺颈部 增殖细胞带，表达规律，细胞核染色阳性，粘膜表面上皮细胞为阴性。阳性信 号较均一，呈颗粒样或片状棕黄色染色，有时胞浆也有轻度黄染或呈淡紫色。 老龄对照组大鼠 PCNA 表达阳性细胞也呈颗粒状或片状棕黄色染色，阳性表达的 胃颈腺增殖细胞带厚度降低且位置下移，偏向于粘膜肌层。老龄对照组大鼠较 非老龄对照组大鼠 NO、NOS、iNOS 及 TNF 含量升高，cNOS 含量下降，统计学差 别明显，这说明伴随增龄，由 cNOS 产生的内源保护性 NO 含量下降，而由 iNOS 产生 NO 含量升高，且后者升高的量大于前者下降的量，从而表现为总体 NO 含 量升高。NO 和 TNF 含量升高推测与老化后自由基产生过多或清除减少引起细胞 结构破坏而功能丧失，最终导致机体的衰老。 2、老龄和非老龄阿司匹林损 伤组大鼠胃粘膜均可见散在点(线、片)状出血点(带)，老龄损伤组大鼠损伤面 积大、范围广，损伤指数高于非老龄大鼠损伤指数(P0.05)。镜下观察两组损 伤大鼠粘膜粘膜腺体有不同程度的充血、水肿、上皮缺损、连续性破坏，伴有不同程度的炎性渗出及炎症细胞(中性粒、淋巴和单核细胞)浸润。老龄损伤组 大鼠镜下 whittle 评分高于非老龄损伤组大鼠 whittle 评分(P0.05)。给予奥 美拉唑预保护后再给予阿司匹林灌胃，两保护组大鼠胃粘膜亦可见粘膜出血和 糜烂，但损伤程度较相应的老龄和非老龄损伤组轻，糜烂及出血范围减少，部 分大鼠粘膜仅见少量点状出血。镜下观察发现给予奥美拉唑保护后两组大鼠粘 膜充血水肿、上皮缺损破坏及炎性渗出、炎症细胞浸润程度均较单纯损伤组程 度轻。分别对老龄、非老龄对照组、损伤组及保护组大鼠进行组间分析发现： 老龄、非老龄损伤组大鼠的 TNF 含量、NO 含量、NOS 活力及 iNOS 活力升高， cNOS 活力下降，与对照组比较有统计学差别。老龄、非老龄保护组与相对应的 阿司匹林损伤组比较，NO 含量降低，但仍高于相应对照组的 NO 值(P0.05)； 老龄和非老龄保护组 NOS 活力低于损伤组，高于对照组，但统计学比较无明显 差别(P0.05)；老龄保护组 iNOS 活力较损伤组下降(P0.01)，较对照组升高 (P0.05)，非老龄保护组 iNOS 活力较损伤组降低较对照组升高(P0.01)；老 龄、非老龄保护组 cNOS 均较相应的损伤组升高(P0.05)较相应的对照组比较 无统计学差别(P0.05)；老龄、非老龄保护组 TNF 含量较损伤组降低(P0.05)， 但与对照组相比无统计学意义(P0.05)。胃粘膜损伤指数与 iNOS 活力、NO 含 量及 TNF 含量呈正相关，相关系数分别为 0.6871、0.7338、0.7824。胃粘膜损 伤指数与 cNOS 活力呈负相关，相关系数为-0.7458。胃粘膜损伤指数与 NOS 活 力无关。 结论： 1、老龄大鼠胃腺体萎缩、粘膜肌层增厚的发生率增加， 胃蛋白酶原分泌减少，胃颈腺干细胞的增殖能力下降。 2、老龄大鼠胃粘膜 对损伤的敏感性增加，修复能力下降。 3、阿司匹林通过降低 cNOS 活力，升 高 iNOS 活力，升高 NO 和 TNF 含量而损伤胃组织。奥美拉唑通过降低炎性介质 TNF 含量和改变 NO 含量发挥保护作用。正文内容正文内容目的： 1、比较大鼠胃粘膜组织结构和胃蛋白酶含量的随龄变化。 2、应用阿司匹林及奥美拉唑制备老龄和非老龄大鼠的损伤和保护模型。比较损 伤和保护因素对不同月龄大鼠胃粘膜和血液 NO、TNF 含量影响，并探讨其作用 机制。 方法：选择月龄 3 个月，体重 200-300g 及月龄 22 个月，体重 600- 800g 清洁级健康 Wistar 大鼠各 18 只，分别随机分为 3 组：老龄、非老龄阿司 匹林损伤组，老龄、非老龄奥美拉唑保护组和老龄、非老龄对照组。 1、光 镜下观察老龄、非老龄对照组大鼠胃粘膜腺体及肌层厚度，固有腺体数量及炎 性细胞浸润程度。胃蛋白酶试剂盒生化检测胃粘膜组织胃蛋白酶活力。免疫组 化方法检测大鼠粘膜 PCNA 的表达。 2、老龄、非老龄阿司匹林损伤组大鼠分 别用 100mg/kg 剂量阿司匹林灌胃；老龄、非老龄保护组大鼠分别用 20mg/kg 剂 量奥美拉唑灌胃。老龄、非老龄对照组大鼠分别给予生理盐水灌胃。处死前眼 球内眦静脉取血并分离血浆和血清，检测血浆 NO 含量、NOS、iNOS 及 cNOS 活 力。放射免疫法测血清 TNF 含量。分别按 Guth 评分标准大体观察及 whittle 评 分标准光镜下观察，比较各组大鼠胃粘膜损伤情况。 结果： 1、老龄对照 组大鼠胃粘膜色泽苍白、表面光滑、皱襞规整、表面可见附着较多粘液。非老 龄对照组大鼠胃粘膜色泽橘红、表面光滑、皱襞规整、表面亦附着较多粘液。 老龄和非老龄对照组大鼠胃体和胃窦粘膜均未见肠上皮化生、不典型增生及肿 瘤的发生。老龄对照组大鼠胃窦粘膜固有层腺体数量减少、腺体间隙增大，固 有层腺体层数减少，甚至消失；非老龄对照组大鼠胃窦粘膜固有腺体饱满清晰、 层教较多。老龄对照组大鼠胃窦粘膜厚度高于非老龄大鼠的胃窦粘膜厚度，但 老龄对照组大鼠胃体粘膜厚度与非老龄对照组大鼠胃体粘膜厚度相比无统计学 意义。老龄对照组大鼠的胃窦、胃体的粘膜肌层较非老龄对照组大鼠的粘膜肌 层增厚，镜下可见粘膜肌层向粘膜固有层呈分支状插入腺体之间。老龄对照组 大鼠胃液 PH 值较非老龄对照组 PH 值略高，但两者比较无统计学意义(P0.05)。 老龄对照组大鼠胃粘膜组织的蛋白酶含量下降，与非老龄大鼠比较有统计学差 别(P0.05)。非老龄对照组大鼠胃粘膜中 PCNA 阳性细胞主要定位于胃腺颈部 增殖细胞带，表达规律，细胞核染色阳性，粘膜表面上皮细胞为阴性。阳性信 号较均一，呈颗粒样或片状棕黄色染色，有时胞浆也有轻度黄染或呈淡紫色。 老龄对照组大鼠 PCNA 表达阳性细胞也呈颗粒状或片状棕黄色染色，阳性表达的 胃颈腺增殖细胞带厚度降低且位置下移，偏向于粘膜肌层。老龄对照组大鼠较 非老龄对照组大鼠 NO、NOS、iNOS 及 TNF 含量升高，cNOS 含量下降，统计学差 别明显，这说明伴随增龄，由 cNOS 产生的内源保护性 NO 含量下降，而由 iNOS 产生 NO 含量升高，且后者升高的量大于前者下降的量，从而表现为总体 NO 含 量升高。NO 和 TNF 含量升高推测与老化后自由基产生过多或清除减少引起细胞 结构破坏而功能丧失，最终导致机体的衰老。 2、老龄和非老龄阿司匹林损 伤组大鼠胃粘膜均可见散在点(线、片)状出血点(带)，老龄损伤组大鼠损伤面 积大、范围广，损伤指数高于非老龄大鼠损伤指数(P0.05)。镜下观察两组损 伤大鼠粘膜粘膜腺体有不同程度的充血、水肿、上皮缺损、连续性破坏，伴有 不同程度的炎性渗出及炎症细胞(中性粒、淋巴和单核细胞)浸润。老龄损伤组 大鼠镜下 whittle 评分高于非老龄损伤组大鼠 whittle 评分(P0.05)。给予奥 美拉唑预保护后再给予阿司匹林灌胃，两保护组大鼠胃粘膜亦可见粘膜出血和 糜烂，但损伤程度较相应的老龄和非老龄损伤组轻，糜烂及出血范围减少，部分大鼠粘膜仅见少量点状出血。镜下观察发现给予奥美拉唑保护后两组大鼠粘 膜充血水肿、上皮缺损破坏及炎性渗出、炎症细胞浸润程度均较单纯损伤组程 度轻。分别对老龄、非老龄对照组、损伤组及保护组大鼠进行组间分析发现： 老龄、非老龄损伤组大鼠的 TNF 含量、NO 含量、NOS 活力及 iNOS 活力升高， cNOS 活力下降，与对照组比较有统计学差别。老龄、非老龄保护组与相对应的 阿司匹林损伤组比较，NO 含量降低，但仍高于相应对照组的 NO 值(P0.05)； 老龄和非老龄保护组 NOS 活力低于损伤组，高于对照组，但统计学比较无明显 差别(P0.05)；老龄保护组 iNOS 活力较损伤组下降(P0.01)，较对照组升高 (P0.05)，非老龄保护组 iNOS 活力较损伤组降低较对照组升高(P0.01)；老 龄、非老龄保护组 cNOS 均较相应的损伤组升高(P0.05)较相应的对照组比较 无统计学差别(P0.05)；老龄、非老龄保护组 TNF 含量较损伤组降低(P0.05)， 但与对照组相比无统计学意义(P0.05)。胃粘膜损伤指数与 iNOS 活力、NO 含 量及 TNF 含量呈正相关，相关系数分别为 0.6871、0.7338、0.7824。胃粘膜损 伤指数与 cNOS 活力呈负相关，相关系数为-0.7458。胃粘膜损伤指数与 NOS 活 力无关。 结论： 1、老龄大鼠胃腺体萎缩、粘膜肌层增厚的发生率增加， 胃蛋白酶原分泌减少，胃颈腺干细胞的增殖能力下降。 2、老龄大鼠胃粘膜 对损伤的敏感性增加，修复能力下降。 3、阿司匹林通过降低 cNOS 活力，升 高 iNOS 活力，升高 NO 和 TNF 含量而损伤胃组织。奥美拉唑通过降低炎性介质 TNF 含量和改变 NO 含量发挥保护作用。 目的： 1、比较大鼠胃粘膜组织结构和胃蛋白酶含量的随龄变化。 2、应 用阿司匹林及奥美拉唑制备老龄和非老