布洛芬在小鼠体内的分布课前准备取小鼠2只,称重，编号。n2号用20布洛芬灌胃0.1ml/10g。n3号用20布洛芬灌胃0.1ml/10g。n计时实验目的v掌握测定药物分布的方法和临床意义。v了解药物在体内的分布动力学规律。相关知识药物分布v药物分布的概念： 药物从血液向组织、细胞间液和细胞内液转运 的过程。 v药物分布影响因素： 血浆蛋白结合率 器官血流量 组织细胞结合 体液pH和药物解离度 体内屏障 血脑屏障、胎盘屏障和血眼屏障v小鼠灌胃给予同等剂量的布洛芬溶液后 ，在不同时间点测量血液、脑、肾、肝中 布洛芬的浓度，绘出不同时点的布洛芬的 组织分布图。v测量血液、肝中布洛芬浓度采用比色法 。实验原理实验步骤1v标准管的制备：0.00125%布洛芬溶液v取小鼠3只（已禁食12h），称重，编号。n1号用生理盐水灌胃0.1ml/10g，立即断头取血摇匀。n2号用20布洛芬灌胃0.1ml/10g，30min断头取血摇匀 。n3号用20布洛芬灌胃0.1ml/10g，60min断头取血摇匀 。 v取离心管3支编号，分别于1管（对照）、2管（给药 30min）和3管（给药60min）内加肝素0.1ml,断头取血 ，立即摇匀。分别从3支管中取抗凝血各0.5ml加入已预 加无水乙醇4.5ml试管中，摇匀。 v称取各小鼠300mg肝组织，分别置于研磨器中，加无水 乙醇（0.4ml/100mg）研碎后再加入无水乙醇（ 0.5ml/100mg） 摇匀，制成匀浆后全部倾入试管中。实验步骤2实验步骤3编号采样时间离心管内容物 1-1立即取血0.5ml+无水乙醇4.5ml 1-2立即取肝300mg+无水乙醇（ 0.9ml/100mg）2-130min后血0.5ml+无水乙醇4.5ml 2-230min后肝300mg+无水乙醇（ 0.9ml/100mg）3-160min后血0.5ml+无水乙醇4.5ml 3-260min后肝300mg+无水乙醇（ 0.9ml/100mg）实验步骤4v将对照鼠和各给药鼠的血及组织匀浆离心 5min（3500转/分），分别取上清液3.0ml 放入比色杯中(稀释）v如果液体太浓，可用蒸馏水按比例稀释， 得到的光密度值乘以稀释倍数即实际光密 度值。实验步骤5v用分光光度计在222nm波长下以对照鼠样品管作空 白管，测定各用药样品管的光密度值，代入到公式 换算出血药浓度(g/ml)和组织药物浓度(g/g) 。 血药浓度(g/ml) = 样品管浓度稀释倍数（10） 组织内浓度(g/g) = 样品管浓度稀释倍数（10）实验后处理v利用计算机绘制给药后血液和肝脏组织中的药物分布图。 注意事项v取血：每次的取血量要准确血样加至无水乙醇试管应该立即摇匀 v匀浆：匀浆器上的数字应对应组织匀浆后应立即离心匀浆器应清洗干净 v离心：离心前一定要用水配平，离心管不要弄混离心后将转速和时间归零 v吸管要干净 v药品不要污染桌面，台面 v灌胃后立即清洗灌胃针头思考题v试说明布洛芬在各组织内的分布规律及临床意义