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溶血性链球菌检验 分布v溶血性链球菌在自然界中分布较广,存在于 水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口 腔、鼻腔、咽喉中,可通过直接接触、空气 飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染,被污 染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类 进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性 感染部位常成为食品污染的污染源。引起化 脓性感染、中毒性感染、超敏反应性疾病生物学性状1形态结构2培养特性3分类4生化反应 5. 抵抗力形态与染色v球形或卵圆形,直径0.5 1 m,链状排列 ,链长短不一,短者48个细胞组成,长者 2030个v无芽胞,无鞭毛,培养早期(24h)形成透 明质酸的荚膜培养特性v需氧或兼性厌氧v营养要求较高,需补充血液、血清、葡萄糖 等v在血清肉汤中易形成长链,管底呈絮状沉淀v在血琼脂平板上,不同菌株溶血不一v最适生长温度为37,最适pH为7.4-7.6 培养特性-血平板v血平板上菌落为灰白色,半透明或不透明 ,表面光滑,有乳光,直径约0.50.75 mm,为圆形突起的细小菌落,乙型溶血链 球菌周围有24 mm界限分明、无色透明 的溶血圈生化反应v分解葡萄糖,产酸不产气。对乳糖、甘露醇 、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷 的分解能力因不同菌株而异v一般不分解菊糖,不被胆汁溶解v触酶阴性(与葡萄球菌相区别) 毒素及侵袭性酶 v链球菌溶血素 v致热外毒素:曾称红疹毒素或猩红热毒素 v透明质酸酶:又称扩散因子,溶解细胞间质 v链激酶:又称链球菌纤维蛋白溶酶 ,能使血液中纤维蛋白酶 原变成纤维蛋白酶,具有增强细菌在组织中的扩散作用,该 酶耐热,10050分钟仍可保持活性。 v链道酶:又称链球菌DNA酶v杀白细胞素:能使白细胞失去动力 抵抗力 v该菌抵抗力一般不强,6030min即被杀死v对常用消毒剂敏感v在干燥尘埃中生存数月 v乙型链球菌很少有耐药性 微生物学检查溶血性链球菌检测流程溶血性链球菌检测流程(GB/T4789.11GB/T4789.11)25g(ml)样品+225ml无菌生理盐水葡萄糖肉浸液肉汤 或匹克氏肉汤血平板血平板(分纯培养)杆菌肽敏感试验链激酶试验观察溶血革兰氏染色报告36+1 24h36+1 24h36+1 24h鉴定步骤v溶血及菌落形态的观察v革兰氏染色v链激酶试验v杆菌肽敏感试验链激酶试验 -原理致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即 溶纤维蛋白酶),此酶能激活正常人体血液 中的血浆蛋白酶原,使成血浆蛋白酶,而 后溶解纤维蛋白 链激酶试验-方法吸取草酸钾血浆0.2mL,加0.8mL灭菌生理盐 水,混匀,加入链球菌18-24h36肉浸液肉 汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL ,混 匀,置于36水浴10min,血浆混合物自行凝 固,观察凝块重新完全溶解的时间,完全溶 解为阳性,如24h后不溶解即为阴性。同时用 肉浸液肉汤做阴性对照,用已知的链激酶阳 性的菌株做阳性对照。 杆菌肽敏感试验 v取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上 ,用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌 肽纸片置于上述平板上,36培养18-24h, 如有抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌 株做对照 结果报告在 25g(ml)样品中检出或未检出溶血性 链球菌谢 谢
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