1隔山消化学成分研究【摘要】 目的对土家药隔山消化学成分进行分离与结构鉴定。方法采用乙醇浸泡、分步萃取的方法对隔山消化学成分进行提取。运用正相、反相硅胶柱层析、高效液相色谱的方法进行分离、纯化和检测，通过 13C-NMR 谱,1H-NMR 谱对其进行结构鉴定。结果从隔山消乙醇提取物中分离到 6 种化学成分:对甲基苯酚（ ） 、蔗糖（） 、胡萝卜苷（） 、kidjoranin 3-O-L-cymaropyranosyl-（14）-D-cymaropyranosyl-（14）-L- diginopyranosyl-（14）-D-cymaropyranoside（） 、12-O-benzoyllineolon 3-O- L-cymaropyranosyl-（14 ）-D- cymaropyranosyl-（14）- L-diginopyranosyl-（14）-D-cymaropyranoside（） 、2，4 二羟基苯乙酮（） 。结论化合物和为首次从隔山消中得到。 【关键词】 隔山消； 化学成分土家药隔山消又名白首乌，是萝藦科植物耳叶牛皮消Cynanchum auriculatu Royle Wight 的干燥块根。研究发现白首乌具有提高免疫力、抗肿瘤和抗衰老等作用1 。为了开发利用该药用资源，本文对隔山消的化学成分进行了研究，并从中分离到 6个成分，分别鉴定为：对甲基苯酚、蔗糖、胡萝卜苷、kidjoranin 23-O-L-cymaropyranosyl-（14）-D-cymaropyranosyl-（14）-L-diginopyranosyl-（14）-D-cymaropyranoside、12-O-benzoyllineolon 3-O-L-cymaropyranosyl-（14）-D-cymaropyranosyl- （14）-L-diginopyranosyl-（14）-D-cymaropyranoside 、2 ，4-二羟基苯乙酮。1 仪器与试剂Vafian Mercury VX-300500 型核磁共振仪，戴安 U3000 半制备高效液相色谱仪，常规分离用薄层层析硅胶及柱层析硅胶由青岛海洋化工厂生产，C18 反相硅胶由日本 YMC 公司生产，色谱纯为美国 TEDIA 公司生产。其余试剂均为国产分析纯。隔山消药材采自湖南湘西自治州，并经万定荣教授鉴定为萝藦科植物耳叶牛皮消Cynanchum auricutalum Royle & Wight.的块状根。2 方法与结果2.1 提取分离取隔山消药材 4 kg，粉碎成粗粉，用 90乙醇浸泡提取 3 次，24 h/次。提取液减压回收乙醇，依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取。氯仿部分经反复硅胶柱色谱，高效液相色谱，到化合物得。32.2 结构鉴定2.2.1 化合物 I 无色块状晶体。1H-NMR （500 MHz，CDCl3） ppm：7.92(2H，d，H-2，H-6)，6.91（2H ， d，H-3，H-5） ，2.58(3H， s，-CH3) ，6.17(brd，-OH)。 13C-NMR（125 MHz，CDCl3） ppm：26.6（-CH3 ） ，115.6（d） ，131.2(d) ，115.6（s） ，130.5（s ） ，根据以上数据将化合物 I 鉴定为对甲基苯酚。2.2.2 化合物 II 无色块状晶体。1H-NMR （500 MHz，C5D5N） ppm：6.22(1H，H-1，d ，3.5Hz) ，4.18（1H ， H-2，dd，9.5 Hz，3 Hz） ，4.68（1H ，H-3，t ） ，4.24（1H ， H-4，t ） ，4.78（1H，H-5，dd，7.5 Hz，2.3 Hz） ，4.53（1H ， H-6） ，4.51（2H ，H-1）,5.03(1H，H-3)，4.53（1H ， H-4） ，5.07 （1H ，H-5） ，4.36 （1H ，H-6 ） 。 13C-NMR（125 MHz，C5D5N） ppm：93.5（C-1 ） ，73.5（C-2） ，75.0（C-3） ，71.8（C-4） ，75.1（C-5 ） ，62.4（C-6 ） ，63.0（C-1） ，105.9 （C-2） ，79.8（C-3） ，84.4（C-4） ，75.5（C-5） ，64.8（C-6） 。根据文献2将化合物 II 鉴定为蔗糖。2.2.3 化合物 III 白色粉末。Molish 反应和 Liebermann-4Burchard 反应阳性，与胡萝卜苷对照品进行 TLC 检测（氯仿-甲醇=41） ，Rf 值和硫酸显色完全相同。13C-NMR（125 MHz，C5D5N） ppm：37.5（C-1） ，30.3（C-2 ） ，78.5（C-3） ，39.4（C-4） ，135.9（ C-5） ，122.0 （C-6 ） ，32.2（C-7） ，32.1（C-8） ，50.3（C-9） ，37.5（C-10） ， 21.4（C-11） ，26.4（C-12 ） ，42.5（ C-13） ，56.9（C-14） ，24.6（C-15） ，40.0（C-16 ） ，56.3（ C-17） ，12.1（C-18） ，19.3（C-19） ，36.5（C-20 ） ，19.5（ C-21） ，28.6（C-22） ，34.3（C-23） ，46.1（C-24 ） ，29.5（ C-25） ，19.1（C-26） ，20.1（C-27） ，23.4（C-28 ） ，21.4（ C-29） ，12.2（C-30） ，102.6（C-1） ，75.4（C-2） ，78.6（C-3） ，71.1（C-4） ，78.1（C-5） ，62.8（C-6） 。结合文献3鉴定为胡萝卜苷（daucosterol） 。见图 1。2.2.4 化合物 IV 白色粉末，在水中振摇起白色泡沫。13C-NMR（125MHz，CDCl3） ppm：38.9（C-1） ，29.1（C-2） ，78.0（C-3） ，38.9（C-4） ，140.7（C-5） ， 117.9（C-6） ，34.5（C-7） ，75.1（C-8） ，43.9（C-9 ） ，37.4（C-10） ，24.4（C-11） ，74.6（C-12 ） ，58.2（C-13 ） ，88.3（C-14） ，34.5（C-15 ） ，33.4（C-16 ） ，91.7（ C-17） ，9.6（C-18） ，18.7（C-19 ） ，209.4（C-20） ，27.6（C-21） ，165.9（C-1） ，117.8（C-2） ，145.6（C-3） ，134.5（C-4） ，128.4（C-5） ，129.0（C-6） ，130.6（C-7） ，129.0（C-8） ，128.4（C-9） ，-D-cym:95.9（C-51） ，34.5（C-2） ，76.9（C-3） ，82.0（C-4 ） ，69.1（C-5） ，18.7（C-6） ，57.2（-OMe） ， -L-dig:101.0（C-1） ，31.3（C-2 ） ，74.4（C-3 ） ，74.2（C-4） ，67.0（C-5） ，17.7（C-6 ） ，56.0（-OMe ） ，-D-cym:98.7（C-1） ，35.4（C-2） ，78.4（C-3） ，82.0（C-4） ，69.2（C-5） ，18.5（C-6） ，56.4（-OMe） ，-L-cym:99.5（C-1） ，31.8（C-2 ） ，75.0（C-3 ） ，74.6（C-4 ） ，65.8（C-5 ） ，18.3（C-6 ） ，58.0（-OMe） 。与文献4数据一致，故将化合物 IV 鉴定为 kidjoranin 3-O-L-cymaropyranosyl-（14）-D-cymaropyranosyl-（14）-L-diginopyranosyl-（14）-D-cymaropyranoside。2.2.5 化合物 V 白色粉末，在水中振摇起白色泡沫。13C-NMR（125 MHz，CDCl3） ppm：38.8（C-1） ，28.9（C-2） ，77.8（C-3） ，38.8（C-4） ，140.5（C-5） ， 117.8（C-6） ，32.1（C-7） ，74.8（C-8） ，43.6（C-9 ） ，37.2（C-10） ，24.2（C-11） ，73.9（C-12 ） ，58.4（C-13 ） ，88.0（C-14） ，34.3（C-15 ） ，33.3（C-16 ） ，91.4（ C-17） ，9.5（C-18） ，18.6（C-19 ） ，209.4（C-20） ，27.4（C-21） ，167.0（C-1） ，129.9（C-2） ，128.5（C-3） ，129.6（C-4） ，133.2（C-5） ，129.6（C-6） ，128.5（C-7） ，-D-cym:96.9（C-1） ，35.2（C-2） ，79.5（C-3） ，82.0（C-4） ，70.4（C-5） ，18.5（C-6 ） ，58.5（-OMe） 6，- L-dig:101.7（C-1） ，32.6（C-2） ，75.5（C-3） ，75.1（C-4 ） ，68.1（C-5 ） ，18.4（C-6） ，56.9（-OMe ） ，-D-cym:100.4（C-1 ） ，35.3（C-2） ，78.7（C-3） ，83.0（C-4） ，70.3（C-5） ，18.3（C-6） ，57.4（-OMe ） ，-L-cym:100.0（C-1） ，32.8（C-2） ，75.3（C-3） ，73.8（C-4 ） ，70.3（C-5 ） ，18.6（C-6 ） ，57.1（-OMe） 。与文献4数据一致，故将化合物 V 鉴定为 12-O-benzoyllineolon 3-O-L-cymaropyranosyl-（14 ）-D-cymaropyranosyl-（14）-L-diginopyranosyl-（14）-D-cymaropyranoside。2.2.6 化合物无色块状晶体。1H-NMR （500 MHz，CD3OD） ppm：12.61(1H,s,2-OH) ，7.70（1H ， d，J=9.0Hz，H-6） ，6.37（1H ， d，J=2Hz ，8.9Hz，H-5） ，6.24(1H，d ，2.4Hz ，H-3)，2.51（3H，s ，-CH3） 。13C-NMR（125 MHz，CD3OD） ppm：114.4（C-1） ，166.2 （C-2） ，103.5（C-3 ） ，166.4（C-4） ，109.1（C-5 ） ，134.4（C-6） ，204.2 （CO） ，26.2（CH3 ） 。根据文献数据5 ，故将化合物 鉴定为 2，4-二羟基苯乙酮。见图 1。3 讨论7根据结果，从隔山消中分离的所得的化合物含甾体皂苷类化合物，这与该属植物主要成分一致，可能为本药材中的主要有效成分。【参考文献】1印敏，冯熙，董云发，等.白首乌化学成分与药理活性研究进展J. 中国野生植物资源 ，2004，32（2