肠道原虫检查方法赣南医学第一附属医院检验科 2016.9常见的肠道原虫 主要种类阿米巴溶组织内阿米巴原虫 迪斯帕内阿米巴 结肠内阿米巴 哈氏内阿米巴 布氏嗜碘阿米巴 微小内蜒阿米巴 波列基内（波氏）阿米巴鞭毛虫蓝氏贾第鞭毛虫 脆弱双核阿米巴 人毛滴虫孢子虫隐孢子虫 人芽囊原虫 纤毛虫结肠小袋纤毛虫常见的肠道原虫主要种类一、检查方法常用的有生理盐水直接涂片、碘液染色和 铁苏木素染色、三色酸染色法、固定染色、抗 酸染色法及培养法等。（一）实验器材显微镜（1040）、 显微镜测微尺、 玻片、盖玻片、竹签 、 记号笔等。 （二）实验试剂1、0.85%盐水NaCl 0.85g 蒸馏水加至100ml2、卢戈氏碘液碘化钾6.0g, 碘4.0g 蒸馏水至100ml（先用30ml左右蒸馏水溶解碘化钾，再加入 碘混匀溶解后加蒸馏水至100ml，充分混匀后储存 于棕色瓶中） （三）操作步 u直接涂片法（用于滋养体检测）l标本采集自然排出、无尿液掺混的新鲜粪便（注意保温);l取预温洁净载物玻片一张，加滴37预温的生理盐水1滴2滴;l在保温条件下，用竹签挑取粪便标本可疑部分（如有粘液、血液应尽可能采取粘液、血液部分），在盐水中涂抹成直径为1cm粪便薄膜，厚度以透过粪便薄膜能看清字为宜;l盖上盖玻片，置显微镜下观察有无活动的滋养体.u碘液玻片法（用于包囊检测）l涂片时用碘液代替生理盐水，制法及注意事项同直接涂片法;l盖上盖玻片，显微镜下观察包囊。注意事项l涂片的厚度以看清报纸上的字迹为度，太薄易漏查，太厚难以观 察;l因为虫体大小在鉴定上是重要的依据，因此显微镜必须装备有目 镜测微器。二、病原形态鉴别原虫是由单一细胞构成，属于单细胞真核动物，它 所有的生命活动都是在细胞内完成的。（一）基本结构主要有表膜、细胞质和细胞核1、表膜：包在虫体表面，可保持虫体的完整性， 并参与虫体摄食、排泄、感觉、运动等生理活动，具有 很强的抗原性。2、细胞质： 多数原虫分内质与外质两部分（1）内质：呈细颗粒状，占细胞质的大部分，内含细 胞核、食物泡、伸缩泡等。 （2）外质：分布在虫体表层，透明或有微细颗粒，运 动细胞器是由外质形成。伪足：是肉足亚门原虫所特有的临时性运动器，为外质的暂时性突 出部分，常见为叶状，偶可见树根状或网状。 鞭毛：是鞭毛虫纲原虫的运动细胞器官，为外质底下的毛基体发出 的细胞质丝状延伸部分，鞭毛数目因虫种而异。 纤毛：是纤毛虫纲原虫的运动细胞器，结构与鞭毛基本相似，也是 从基体发出，但数量多，短而尖细。 波动膜：是毛滴虫的运动细胞器。3、细胞核细胞核在内质中，与原虫的生长、繁殖有关，是原虫分类鉴 别的重要依据。分两种类型：l泡状核：圆、椭圆或相类似型状。核染色质颗粒量少，分布不 均，在碱性染料下着色很浅，呈现为泡状核。阿米巴、鞭毛虫 及纤毛虫的小核均属此型。l实质核：形状多样，常见有椭圆形、肾形或马蹄形，核染色质 颗粒量多。纤毛虫的大核属此型。阿米巴滋养体示意图内质外质内外质不明显，仅在伪 足伸出时，才可可见外 质阿米巴包囊示意图纤毛虫滋养体示意图肾形，核染 色质颗粒多鞭毛虫滋养体示意图（二）鉴别要点1、大小： 最小直径仅2m，大可达200m2、运动运动形式 伪足、鞭毛、纤毛 运动速度 活泼或缓慢 运动方向 定向或不定向3、细胞核 核数量、形状、位置 核膜厚、薄 核仁大小、形状、位置4、细胞质 滋养体界细胞质线是否明显，颗粒细密或粗大；浆内有无吞噬的红 细胞。 包囊 囊壁厚、薄，折光度，细胞质有无纤丝状排列、糖元块和 拟染色体。（三）常见肠道原虫的形态特征1、溶组织内阿米巴阿米巴痢疾和阿米巴结肠炎的病原体，寄生在结肠内; 可侵犯肝、肺、脑等器官，引起肠外感染; 生活史发育阶段为：包囊期和滋养体期。（1）滋养体溶组织内阿米巴滋养体具有侵袭性，随时可吞噬RBC；虫体 大小在1060m之间，胞浆分为内外两层，外浆透明而均匀 、折光强，内浆呈细颗粒状，当外浆伸出形成伪足作定向运 动时，内浆颗粒即涌入伪足内，使虫体前进。虫体形态多变 ，运动活跃，在新鲜脓血便和阿米巴肝脓肿穿刺液中，滋养 体可以每秒5微米的速度活泼运动。（2）包囊：直径1020m，囊壁光滑，透明、折光性强、不着色 ，厚约0.5m，包囊内含14个核，成熟包囊内常见1个或 多个两端钝圆的长棒状拟染色体。1个核包囊3个核包囊2个核包囊2、结肠内阿米巴结肠内阿米巴是非致病性阿米巴，也可引起腹泻，主 要寄生在人体盲肠和结肠，常与溶组织阿米巴共存，是肠 道最常见的共栖原虫。 滋养体：直径15 50m，运动迟缓，无定向，内外质界限不 明显，仅在伪足形成时才能看见外质，内质呈颗粒状，内 含1个细胞核和许多食物泡，食物泡中含有细菌，不含红 细胞。核仁较大，常偏位。 包囊：球形，较溶组织阿米巴大，直径10 30m，1 8 个细胞核，偶见成熟包囊超过8个核，细胞质颗粒状，未 成熟包囊常有较大的深棕色的糖原泡，位于核周围。拟染 色体常不清晰，似碎片或草束状，两端尖细。结肠阿米巴（未染色）碘染色结肠内阿米巴包囊测微尺测量包囊大小3、微小内蜓阿米巴微小内蜓阿米巴是最常见的小型阿米巴，滋养体寄生 在大肠，在大肠中成囊，成熟包囊污染食物和水源，偶可 引起腹泻。 （1）滋养体：直径6 15m，一般小于10m，内外浆不明显，伪足 透明，短而钝，运动缓慢，不定向，核膜与核仁间有核丝 连接，核仁大而不规则，位于中心或偏位， （2）包囊：卵圆形，5 14m，囊壁有折光，1 4个细胞核， 集中在包囊一端，核仁大，常偏于一侧。偶见小而弯曲的 拟染色体。碘液染色铁苏木素染色4、布氏嗜碘阿米巴布氏嗜碘阿米巴是以包囊中独居特征的糖原泡而命名 ，人猪均可感染，是猪最常见的阿米巴。滋养体寄生在大 肠，主要通过粪便排出的包囊传播。 （1）滋养体形态不一，直径8 20m，细胞核较大，核仁约占直 径的1/2，位于核中央，伪足宽大，不吞噬红细胞。细胞 质内有1 2个糖原泡，为鉴定的重要特征。 （2）包囊直径5 20m，囊壁折光性强，成熟包囊仅1个核， 核仁位于核的一端，包囊中无拟染色体，但有1个大而 明显的糖原泡，碘染色后，糖原泡呈红棕色团块。 布氏嗜碘阿米巴包囊寄生人体肠道的阿米巴滋养体鉴别特征虫 种 大 小(m) 伪足与运动 细胞核 内含物 溶组织内 大: 2060 内外质分明,伪足指 一个,不明显,染色 大滋养体: 红细胞阿米巴 小: 1230 形或舌形,形成快, 后可见,细胞核小 小滋养体: 细菌* 12 15 运动活泼，定向。 位于中央。 很少有空泡 。 哈门氏内 512 内外质分明,伪足指 一个，较小,多位 细菌 阿米巴 * 1 8 状形成慢,运动缓慢 于中央。定向。 结肠内 2050 内外质不明显,伪足 一个,易见，染色 细菌、酵母菌和粪 阿米巴 * 20 25 足短、钝,不透明, 后可见细胞核大, 渣等；空泡较多。形成较慢;运动缓慢, 偏一侧 。 无方向性。 布氏嗜碘 820 内外质不明显;伪足 一个,不明显,染色 细菌、酵母菌和 阿米巴 * 12 15 宽大透明,形成缓慢 后可见细胞核小,位 粪渣等;有空 泡 无方向性。 于中央。 微小内蜒 612 内外质不明显;伪足 一个,不明显,染色 细菌，有空泡。 阿米巴 * 8 10 钝圆、透明,形成较 后可见细胞核小,位慢，运动缓慢,无方 于中央。向性。 寄生人体肠道的阿米巴包囊鉴别特征（碘染色 ） 虫种 大 小(m) 形 态 细胞核 糖原块 拟染色体溶组织内 1020 圆形，折光性强， 14个，清楚 不明显，呈弥 不着色，两 阿米巴 * 1215 囊壁薄、透明。 核仁居中。 散状，红棕色 端钝圆棒状 中央着色较深 哈门氏内 510 圆或椭圆形, 14个，染色后 弥散状，棕色 短棒状、碎 阿米巴 * 68 可见核仁，其占 粒状，折光 比例较溶组织阿 性强米巴大。 结肠内 1030 圆形，折光强， 18个, 核仁大 未成熟包囊明 折光性强 阿米巴* 1525 囊壁厚 多偏位。 显块状，红棕 呈白色。色。 微小内蜒 510 椭圆或长圆形， 14个,多数4个，早期偶有， 少见，偶 阿米巴 * 6 8 折光强，囊壁薄。 很小。 淡棕色，弥散 有呈小点 状。 或小棒状 布氏嗜碘 520 圆、卵圆、三角 1个，偶有2个， 大而明显，棕色 无 阿米巴* 1012 形等，囊壁厚 核仁大,偏一侧。 或红棕色。 5、蓝氏贾第鞭毛虫寄生人体小肠、胆囊主要在十二指肠，可引起腹痛、腹泻和吸收不良 等症状，粪便呈水样、量大、恶息、一般无脓血。分布于世界各地，在 旅游者中发病率较高，故又称旅游者腹泻。生活史有滋养体和包囊两个阶段，在粪便中均可查见。5、蓝氏贾第鞭毛虫（1）滋养体：形似半个倒梨形，前段钝圆，后端尖细，长：921m，宽515m ，厚24m。腹面扁平，背面隆起，胞浆呈颗粒状，腹面前半部至3/4 处凹陷形成左右2个大吸盘，一对椭圆形的核位于吸盘中央，虫体有两 条轴索和4对鞭毛。（2）包囊椭圆形，大小812710m；囊壁较厚，折光性强，细胞质收缩 形成双层壁，与细胞间有明显间隙，可见2-4个细胞核，多偏于一端。囊内 可见鞭毛残体、丝状物及轴柱等，碘染色后呈棕黄色。6、 结肠小袋纤毛虫结肠小袋纤毛虫是人体最大的寄生原虫，寄生宿主广泛，通常认 为猪是人体感染的主要传染源。主要寄生于宿主结肠，引起痢疾。（1）滋养体椭圆形，前端略尖，后端较钝，虫体甚大，大小5020030 100m，周身有纤毛，呈斜纵排列，能前后运动。胞浆内有2个细胞核 ，大核呈肾形，小核呈球形（一般不易见），新鲜粪便可见虫体前、 后端各有一个伸缩泡。（2）包囊圆或卵圆形，直径40 60m，囊壁厚而透明，呈双层内有核和 伸缩泡各1个。新鲜包囊可见囊内有活动的滋养体。寄生人体的滋养体 很少转变为包囊，包囊主要在猪肠内形成。结肠小袋纤毛虫滋养体、包囊伸缩泡大核食物泡包囊滋养体7.人芽囊原虫人芽囊原