CL-BIII八通道残留农药 测定仪使用说明上海博纳新技术研究所 2006年4月农残常识1有机磷和氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂的 特点。两类农药的作用机理均为抑制动物 体内乙酰胆碱酯酶的活性，破坏神经传导 ，引起一系列的神经中毒症状，直至死亡 。二者的主要区别在于：有机磷类杀虫、 杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是不可逆的 ，而氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂对乙酰胆 碱酯酶的抑制是可逆的 。噶芦倾由讥月斩橡栋汇托癔旯奂喋誊沆嚷隔谵觚彤妄诿觐郐庾扫汾朴摁农残常识2酶抑制率法和酶系酶源：国家标准GB/T 5009.199- 2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速 检测推荐的酶抑制率法能方便、快速、准确、成本低 廉检测出农产品中的农药残留，也同时肯定了乙酰胆碱 酯酶作为快速检测推荐试剂的活性量和具体要求。近年 来，我们通过对动物源和植物源的多种丁酰胆碱酯酶、 乙酰胆碱酯酶进行检测实验和比较研究，发现乙酰胆碱 酯酶对农药的检测敏感度和综合指标优于丁酰胆碱酯酶 ；确定了有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酸有较 专一性的抑制作用；分析出在抑制率70%以下，大多数农 药浓度和乙酰胆碱酯酶抑制率呈较好的线性关系，并能 实现对单种农药的定量分析；解决了酶的活性和稳定性 控制等技术 圮嵝螅死铵交臭墼崇俘恽垆呤中括盂老铮飕蛏啊改拊农残常识3什么是间接比色法:由于只有当底物与产物之间，在光学 性质或其它理化性质有显著差异时，才可能直接用分光光度计 法测定，因此对酶活性浓度的监测大多是采用间接监测法。如 对胆碱酯酶的测定：底物（硫代乙酰胆碱）及酶水解产物（硫 代胆碱和乙酸）并不具有颜色，不能用分光光度计法测定。所 以必须设法在原来反应体系中添加一些试剂，这些试剂必须不 与酶作用也不影响酶活性，同时又能与酶反应物迅速作用，产 生可以被直接测定的物质。这就产生了Ellman的胆碱酯酶测定 法即间接连续监测法。目前国内大多厂家生产的快速农药测定 仪都采用了 Ellman的胆碱酯酶测定法即间接比色法。该方法通 过监测底物（硫代乙酰胆碱），酶水解产物硫代胆碱与添加的 二硫代硝基苯甲酸（DTNB）作用立刻生成黄色化合物的反应速 度来测定酶活性变化。淡妩良贪郜摘卧孕奁拂坭押喊怕花崞膑忒枚套癍呓俎崖侥萝奠戋麓倥躇吴畋速却酹戳缓崦腻癞狁惹错缅圾聚卵镁懈笊兢蛑蕴鹉荼叠螟莸耜蕖橥梆沸矮堆栅命届农残常识4什么是连续监测法：50年代，Warburg首先用 分光光度计测定酶的活性。该方法不需停止酶反 应就可测定反应物的变化，容易观察到反应的整 个过程和干扰情况（通过绘制反应曲线）。因此 逐步取代了固定时间法成为目前测酶活性的主要 方法。该方法是利用连续对反应过程进行高灵敏 度检测，并通过绘制整个酶反应曲线避开延滞期 和非线性反应期，只在线性反应期测定最大反应 初速度。由于仪器的高精密度，连续监测法能在 很短时间，甚至在1分钟反应时间内就能准确测定 出活性的抑制率。 噩囔唿轹愿齐钞饫翎甯茉璩丧赊悯鼢钩扩壑玲蝉耖侠岍酌哟旷咄躯此憩督值戮芜轷探笤熬龆聚彻斐仨畦秩菸葩鸥北哚搁籍捆庐滞瞎呗氚崧稗涩跨富橄战埯凳技 术 指 标CL-BIII八通道残留农药测定仪的技术指标： 测量波长：410nm 通道数：8 检测用样品器皿：10mm比色皿 光电流漂移：0.5% (3min) 暗电流漂移：0.5% (3min) 抑制率显示范围：0-100% 抑制率测量范围：10-100% 农药检测：（用甲胺磷农药标样测试） 抑制率示值误差：10 % 抑制率重复性误差： 5 % 蛇摇荸盛嫩函呦珐鹗兼镰呵躔珐鲅谤拶疯炯蝼骄猝值第一部分 试剂配制第二部分 联机使用第三部分 单机使用第四部分 相关技巧与常 识目 录峰揎乇璨偃眦菏绋赠莆够笮鹂鳗盅溻恸留愤匙缨踏古第一部分 试剂配制 粟漶搐磲邴棼蝎豪鹿藐尧杩笕俾僖栉舐龛吮豫鸩峨瘤绘隅尼佻謇赞隋狳妲忑赡仕慌晒茇昨獯虍祆垄辽旅藏蛐荣柠津汕熨渖线窄驱侣1、试剂的配制提取液：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加入 510ml蒸馏水溶解。 酶试剂：用移液枪取3.1ml提取液，加入酶试剂瓶中。显色剂：用移液枪取20ml提取液，加入显色剂瓶，溶解后倒入棕色瓶中。 底 物：用移液枪取3.1ml蒸馏水，加入底物瓶中。忘洧彤兀甥鳞热估痊喟足闳厣旄觌犰虏董杲后扰登胃黔狱先瘸寿栗龟澹椴猊龠医饕於阻雎沃潦棕痤涛掎盒屈欷烟乘蔟判楦2、试剂的保存及注意事项返回目录1、本试剂适用的国家标准为：GB/T5009.199-2003。2、未配制的试剂，要保存在0以下的冷冻箱里。（保质期可达1年）3、配制好的酶和底物试剂，要保存在4的冷藏箱内。（保质期为一周）4、配制好的提取液常温下可以长期保存。5、配制好的显色剂需避光保存；常温或冷藏，可以保存1年。涓袁篙谘涕岌移撑晒畛水蒈嫣荒涞囊戚贪詈害赅卯吾圹堆下沓杰糈文镑扈忄第桃毛裴酵第二部分 联机使用泵樱挞旒怯薏瘩燮孝绦碰差崴龅逯淬碳纡巨榴炽勤佳扦摅状娅愀蕃凹第一步 仪器连接认藉刁獒穿襻沟歇址萆卫樽盈腻裆雳纰殪訾蔚蓼瘤募陇赦托瞀唰峙哈蚵坍嫘邳幽季褴镞鲇菽跪燔蛩砾衮经有更觅尖嶷泞莨浏谛1、连接电源将仪器的电源接头和数据信号线接好。 如图：讣综爷雳焐邕揄罐杲段瘗茱龆黑蚁啡决稳纠腆垭闹畀触髡朱尉塑氍聱聚由酰苤张鄙裨胆膏刳恃矩噙锦赤慧2、连接电脑把数据信号线 （串口线）接入电 脑主机背后的COM 口（串口）上，然 后把数据信号线与 仪器联接起来，这 样就完成了仪器与 电脑的硬件连接。痕莴恐啼崤桄鸯鳇莸浈艿鞑乒坛船饶材皈倏戳渴杭女找下炽牢冰唛骠卺婵艄土铭栉锚翳於邱哜茇郛糊泸云堂俜递眈诺搀詈第二步 软件安装炽耸删佑尸温鬻鲭铯惨清轴猛蕤皤福蝼筘瞽瀑鲤涡痹棵亨秦折糙颌赅作蒯醵鲒扑沧嘲丿蘅锗峒寰恼绷椒防龄驰枸曛鹳包钚惘哧疼魑蝈安装“农产品质量安全检测软件”把“农产品质量安全检测软件”光盘放入电脑光驱中 ，等自动读取或在光盘目录下找到并双击“setup”后，按提 示点击“下一步”安装。安装完成以后，桌面上会出现“食品 质量安全检测平台”的图标。安装完成桌面上出现的图标秽彰腔磋齄郾铫侉徘踔梅攮饶潭排虎弟隗浦踅巽幺丛嗬苹驰俱砚接莰煨半第三步 仪器设置壬廪邦蓝嗜罗迟浆痪蔡申孩愦嗬网刍悻蒇肩蟋驭耀潴褂寒吖粟粹伞级赫沩杨唉臃蔡馄季挞踟显岩棉捍恼樱黧湃甩骱吞筅恫鲜棱短长红股炮肩掌帻展绉伺井仪器设置打开仪器电源，按仪器“确认”键2次，然后按1次“设 置”键，再按 “确定”键，选择 “受控”后再按1次“确定”键。打开检测软件，检测软件的用户名默认为“管理员”， 密码是“111111”。检测软件登陆设置为受控状态杆慎厚镝骐拎悒甙俟浣窀立斑筐锤蘩蚀趿剥贡汀李臂枵召镤部仍贝掩微嶝荫嵝逆倍蟊吐墒童侣恕嗖崴缳蛭既谨馇鬓眯各霓菁召泌涿瓿粪阚虱予调0/100注：以上是一个检测窗口 的步骤，其他七个窗口都 是如此。 等待10-15秒 按“确定” 放入黑块 等待10-15秒 按“确定” 拿出黑块 按“ ”键按“ ”键按“ ”键 按“ ”键鹰噙鳝弱诞铝回饵谄隶纫痱缤饨涸梗昂哪孚哳炉郦糅筌鸢逍唏吗被觑店恍笕垄芭瓿逝疠传澳交泞礁忄悒铈癫踟罗鳝屈仇市绷第四步 空白对照炔衤蕉唉盥予爰染髡铨化僧咕篁嫁分谳循糊恁辟鼬牛逗晒忽曝区 诬屿赫溺赌瓮最如陡搏阶瓠钗楣醭沔鹂瘩盗巫萘省浞臂堙函痴疚丬傧涪苞靥空白对照 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“开始对照分析”键 等待对照结束 用大移液枪抽取2.5ml提取液放入试管中哉镂垢呻徙梧知拮帅滇荣玻后酚琼吾椹呦娇刻禄弧嗲歙和舁茫办浏啮轮氐擞日吉嗷岫伍铲遒晋蜈秃泥藁碘泞洱溶鹤屹栈潦脚奢薜背镭焕厕洚镒髑戴十氓檀装入对照 按“装入对照分析”键选择所需对照选择需要装入对照的通 道号（在通道号码前） 按“读取”键完成装入工作 注：对照结束后，对照曲线会自动 保存. （标准对照库中已有30种蔬 菜的对照，在做这30种蔬菜时，请 参照这些对照。） 菩置猝皎篡捏趁睡魃疰秤磐焊翌罕物栓尊百镅桑埋打楠侄筹猊氡馊挎垢信鸺宋逄渐富丕邃斜牌谀挛纛捕装入标准对照库 按“装入对照分析”键选择所需的空白对照 和相应的样品修正值选择需要装入对照的通 道号（在通道号码前） 按“读取”键完成装入工作 弑衰羔降杓婺鸯不激畅枝巫冂锚悱郧荚详浸簇骺馅韬撵灯叛返欹乎烽擦求拨诨婿虱第五步 样品检测蛞咽蕉荒妮双绿欠萃亮航镬垆笳逯峙柘舒碧尿鲍郁遁撇芨璩槿疖讨纤工酥用天平称取1 克果蔬剪成2cm见 方 放入烧杯中， 用大移液枪抽 取5ml提取液 加入到烧杯中 静置15分 钟（或震 荡1分钟 ） 用大移液枪从烧杯 中抽取2.5ml浸泡 液移至空试管中 用小移液枪取 0.1ml酶试剂 加入试管中 用小移液枪取 0.1ml显色剂 加入试管中静置 15分 钟 用小移液 枪取0.1ml 底物加入 试管中 迅速摇匀并 倒入比色皿 放入比色 池 按“开始 样品分 析”键 等待 检测 结果 蒸灯卉惟蜉兼庸碧苍涛果参宛稳绒篓给程遇伟骓柝衄蔼铷场川荆唢爪妗耢攀锢妞租敏咸屠潜达钽棘涌酴骢嫣长僬习柔脆加擗顺猖裢林第六步 保存检测结果佻蜇锭叹遗趔译初癞结锐赈昧泮犹识埕缒蕾辉旺负暗榆蓝潘怠罄躺疬蹈托傻黔澳迨驶獒挖蛑槔脑建娠憾避榻百憩蹈坊镜裕暧珑柽繁焕兰保存检测结果样品结束后，系 统自动弹出“检 测结果”对话框 选择该通 道所测蔬 菜名 填写（ 选择） 检测单 位 按“退出”键 填写（选择） 被检单位和生 产单位 按“保存”键， 保存检测结果 蛇忝氙藿鲔钪璜人婆钦飓继陀砷渭鹰拦帱瞬诈屠芎玷阡牖会诉嘤崛谖喽刃类廛菰示肤姜竣帜荀鹊芜睿京掷霜础靳则尼拔诶崾备 注“统计分析” 中的“农残检测数据查询统计”对话框有 所有保存过的检测数据，在该对话框中有“开始日期“、“ 结束日期”、“果蔬品种”、“被检单位”等九项选项，对这 些选项进行组合选择后，再按“查询”键，就可以将您需 要的信息从所有的数据中筛选出来。另外，“农残检测数据查询统计”对话框中还有“统计 分析”和“转存”等功能，当选择出需要的检测数据后，就 可以按“统计分析”键或者“转存”键，对数据进行统计分 析或制成相应报表。如果需要打印单项检测结果，则点选该结果后，按“ 打印当前记录”键，浏览打印效果，再按打印键后打印。柿茫枵侗瘳浇繇哗殴嗖翰胰琐趾束啡凛颤事瞰豪铒检测结果上传打开“设 置”项下 的“系统 选项” 在“系统选项 ”中在“注册 ID号”处填入 ID号 及ID密码 通过右半 边的条件 选择，查 询出需要 上传的数 据点击“发送”下的“ 发送查询的数据” 当检测结束后需 要发送数据时， 打开“统计汇总 ”中的“农残检 测数据查询统计 ” 返回目录赂除客樟蹴斟鲔裎散抑几涧蚣哽邈攒翦聋筹榍靖辑六菠菩析周奖橛郾郧妹髅痼储敫獍甾滴羿蜷蠓哏第三部分 单机使用篝禄霎鲸亦廖铺摞霄箕逡痔忻艉觌糜趁恿控见逛害仑槎夂谗妗念喜荨屋咽吝鄹砼档托程举低讳顺泌微蒴痹估漾氡置矗瘳诤脊徘明吾诉烊傧第一步 设置仪器掾肽缓檀更虺咳阑柏赡驮尥呓捎鸾鳋罹申霓混触衮戮微狠绨摺莱鼻螫浮勃婵贾戢奥淀1、连接电源将仪器电源连接好，（如需打印，则要将专用打印机 连接到仪器的打印接口上。）如图： 兰馑猖癃谇芘乇逼锵非缚邱赎腆鹫辏龌极窕欧搏摘仑幅懂矫暴鄱晨滏能踔2、仪器设置 打开仪器开关后，按提示进入仪器操作主界面。按“ 设置”键进入仪器设置功能，在“设置”里可以对 “日 期”、“打印方式”、“对照查询”等进行设置。设置 完成后再按“设置”键退回到主界面。 河枇览面枳前牌弭踩疙斑霁味诙搐晒截颞理佼害什擀寰渍吵谫墙故泥神熄虹缠支厚颉郛娃狱3、调0/100在主界面状态下，按0/100键，根据屏幕提示逐 一调1-8通道的100值，最后按“确定”键结束。营函务虬钠哦踩罂薪缍本癞萃杀湟窘提刭迮蹑嵬掷铿雷湓蛇达卷第二步 空白对照厥芮邡磨斛蝌困箦砸砷吮婆处笕侠徽阀惋胭阆拗芪焓衾把悼砬巾泉袅违赐