实验十二 细菌的生理生化反应v实验目的v巩固微生物无菌接种技术；v证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统；v掌握进行微生物大分子水解试验的原理和方法。微生物的生理生化反应v微生物细胞在酶的催化下进行各种各样的生理生化反应v把微生物细胞在一定的条件下培养，通过观察生理现象和检查代谢产物，可以了解微生物的代谢过程和代谢的特点v由于不同的微生物可能具有不同的酶，代谢途径和代谢产物可能也有不同，生理生化反应是微生物分类鉴定的重要指标之一。 微生物的胞外酶（如淀粉酶、脂肪酶等） 将大分子物质的分解过程可以通过观察细 菌菌落周围的物质变化来证实。器材 1菌种：土壤分离菌株。 2. 培养基：固体淀粉培养基，明胶培养 基试管，石蕊牛奶试管 溶液或试剂：革兰氏染色用卢戈氏碘液 仪器或其他用具：无菌平板，无菌试管 ，接种环，接种针，试管架。淀粉水解实验淀粉培养基+淀粉培养基+接种+变色圈，水解圈培养24h加卢哥氏碘液 I-KIv结果： v 有水解圈淀粉水解实验阳性，用 + 表示；v 无水解圈淀粉水解实验阴性，用 - 表示；明胶液化实验明胶培养基接种培养24h明胶培养基结果观察结果观察 培养1，3，5。在20以下的室温观察生长情 况和明胶是否液化。如菌已生长，明胶表面无 凹陷且为稳定的凝块则为明胶水解阴性。 如明胶凝块部分或全部在20以下变为可流动 的液体，则为明胶水解阳性。如菌已生长，明 胶末液化，但明胶表面菌苔下出现凹陷小窝(须 与末接种的对照管比较，因培养过久的明胶因 水分失散也会凹陷)也是轻度水解，按阳性记录 。若细菌未生长则或是不在明胶培养基上生 长，或是基础培养基不适宜。牛奶分解 石蕊牛奶试验 接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌于 石蕊牛奶培养基中，置于35培养24 48h后观察培养基颜色变化情况。石蕊在 酸性条件下为粉红色，碱性为紫色，而 被还原时为白色。实验报告 将结果添入下表，“+”表示阳性，“-”表示阴性思考题 1你怎样解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶 ？ 2不利用碘液，你怎么证明淀粉水解的存 在? 3接种后的明胶试管可以在35培养，在 培养后你必须做什么才能证明水解的存在 ？ 4解释在石蕊牛奶中的石蕊为什么能起到 氧化还原指示剂的作用？