第三节 动物的克隆动物细胞的培养和克隆形成（1）离体的动物细胞能否正常的生活、 表现出正常的生命活动？ 只要条件适合就能表现出正常的生命活 动，如细胞的分裂、生长等 （2）是不是所有的动物细胞都能在 离体的情况下表现出生命活动？不是，越是幼嫩的细胞越容易培养并表 现出正常的生命活动，因此在细胞培养 时一般选择幼嫩的细胞（3）细胞离体培养时，表现出什么样的 生命活动？生长、分裂（繁殖）至接触抑制（4）离体的动物组织能否像离体的动物细胞 一样表现出体外培养的特征？ 动物组织在离体的情况下，也能培养并 表现出正常的生命活动；但与细胞培养 也有不同的地方：在得到离体的组织后 ，需要机械处理或胰蛋白酶处理得到分 散的细胞再进行细胞培养，同时动物组 织培养过程中可以伴随组织分化。（5）动物组织培养具体是如何实现的？ 动物组织培养的发展历史什么是原代培养？什么是传代培养动物组织培养时，培养细胞能不能 无限制地存活下去阅读教材1.过程：（一）动物细胞培养动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细 胞 悬 浮 液细胞系、细胞株细胞增殖去掉组织 间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体原代培养传代培养如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？细胞悬 浮液转入特 殊培养 液中培 养分瓶培养原代培养传代培养细胞系（可传代的细胞）连续细胞系：有限细胞系：二倍体细胞发生转化的细胞 系（遗传物质发 生了改变，具不 死性）细胞株： 从原代培养物或细细胞系中 获获得用单细单细 胞分离培养或 通过筛选过筛选 的方法，由单细单细 胞增殖形成的细细胞群，称 细细胞株。遗传遗传 物质质未变变 （5）如何获得纯系的细胞系？采用细胞克隆 什么是克隆培养法。 细胞克隆的最基本要求是什么？ 什么细胞容易进行克隆培养阅读教材如何提高细胞克隆形成率？克隆培养法的主要用途是什么？1.过程：诱导方式物理法：化学法：生物法： 灭活仙台病毒聚乙二醇电刺激等（二）动物细胞融合1.过程：灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞主要用于制备 单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法 （同左）灭活的病毒物理（离心、振 荡、电刺激） 化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱 导细胞融合去除细胞壁后诱 导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、 植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较1.其由何种细胞产生？2.主要分布在哪里？3.如何得到抗体？(三）单克隆抗体动物细胞融合的重要应用抗体1、抗原 动物体内刺激浆细胞抗原 动物体内刺激浆细胞抗体 抗原不纯抗体不纯筛选单一浆细胞不能增殖，产生大量抗体2、特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏设计方案：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖单克隆抗体的优点：化学性质单一特异性灵敏度高杂种细胞2.制备过程：（1）给小鼠抗原注射的目的是什么？诱导小鼠体内的特异性免疫应答，分化 出浆细胞。（2）两次筛选的目的相同吗？不同，第一次筛选是为了筛选杂交瘤细 胞，第二次筛选是做抗体检验，筛选产 生特异性抗体的细胞。（3）最后培养有几种方案？两种，体内培养和体外培养。多莉克隆猴四、动物的克隆繁殖1、动物细胞全能性的表现程度：全能干细胞多能干细胞 单能干细胞2、动物难以克隆繁殖的根本原因：细胞分化使得细胞发生了基因的差异性表达，有 的基因开放，有的基因关闭。体细胞基因组中的 基因活动很不完全，不能像受精卵那样发挥细胞 的全能性。卵细胞母绵羊母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育过程融合后的卵细胞克隆动物的研究意义1.用于生物学和医学研究的实验动物 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病 4保护濒危动物6.世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图 所示。请仔细看图后回答问题：黑面绵羊去 核卵细胞白面绵羊卵 腺细胞核重组细胞早期胚胎另一头母绵羊子宫克隆绵羊多莉ab电脉冲处理妊娠、出生写出 、所指的细胞工程 各称： 。实施细胞工程时，所需的 受体细胞大多采用动物卵细胞 的原因是： 。多莉面部的毛色是 ， 判断依据： 。继植物组织培养之后，克隆 绵羊培育成功，证明动物细胞 也具有 。 请举例说明克隆绵羊培育成 功的实际意义： 。