间质干细胞在移植排斥中的应用 及其相关机制的初步探讨研究背景移植目前治疗终末期疾病的有效手段研究背景尿毒症120,000 例肾移植6000 例急性排斥20% 50%研究背景肾移植后急性排斥：他克莫司研究背景5年存活率51% 74% 神经毒性肾毒性研究背景白血病40,000 例造血干细 胞移植GVHD30% 65%GVHD（graft-versus-host disease）：移植物抗宿主病研究背景15%研究背景激素 免疫 抑制剂aGVHDcGVHD激素 抵抗性？GVHD研究背景MSC（mesenchymal stem cell）：间质干细胞低免疫原性 自我更新容易获取免疫调节功能快速体外扩增 多向分化潜能MSC研究背景Clinical Trail238项前期研究 研究目的探讨MSCs治疗的安全性 有效性MSCs联合低剂量他克莫司对 肾移植后患者的影响第一部分患者入选标准 性别年龄诊断供者组织匹配 实验组1男35CG女4/6 2男39CG男4/6 3男51CG男4/6 4男26CG女4/6 5男24CG男4/6 6男27CG男4/6 对照组1女47CG男4/6 2男31CG男4/6 3男30CG男4/6 4男24CG女4/6 5女34CG女4/6 6男23CG男4/6CG: 慢性肾小球肾炎chronic glomerulonephritis实验组对照组他克莫司0.04-0.05mg/kgMSCs 5106移植肾动脉MMF 17-20mg/kg强的松 0.26-0.3mg/kg他克莫司0.07-0.08mg/kg1月后外周静脉MSCs 2106/kg移植时移植后方法 传染病的检测 培养过程中细菌、真菌的检测 支原体污染的检测 内毒素的检测MSCs制备 MSCs质量控制 表面标志细胞形态分化潜能 肾移植成功 对照组出现1例急性排斥结果 结果 血清肌酐移植前、移植后外周血淋巴细胞T, B 和NK细胞比例 实验组对照组 03M 6M 03M 6M T%76.9810.1372.0018.1967.5017.3381.425.4283.017.5666.9021.84CD4+T%52.1616.6847.4219.0560.3812.6747.9421.1742.7318.4263.2619.84CD8+T%34.335.7636.987.8934.5316.3944.1016.8546.5615.4731.9723.12Treg%3.162.304.472.27*3.082.033.373.311.450.97*3.203.60B%9.525.0916.6513.06*8.538.497.894.884.803.21*3.831.28CD27+B%25.698.5432.8511.4723.395.4949.5821.9638.1917.6526.968.94NK%7.246.245.835.337.304.793.572.504.773.325.091.52结果 * p0.05实验组对照组移植前移植后3月移植后6月移植前移植后3月移植后6月 IFN-13.225.6020.1512.978.142.6916.6310.6213.196.489.423.61 TNF-2.981.795.532.174.311.952.271.212.421.923.382.34结果 移植前后炎性因子的变化结果 移植前后抑炎因子的变化移植前移植后3个月移植后6个月实验组对照组移植前移植后3月移植后6月移植前移植后3月移植后6月 IL-41.401.232.031.712.321.121.261.221.361.283.171.27 IL-103.041.374.302.075.201.173.332.832.921.464.311.88移植前移植后3月移植后6月实验组17.5812.2530.0318.6137.9727.65 对照组21.695.3127.4513.5817.351.47实验组对照组实验组对照组 03M 6M 03M 6M B%9.525.0916.6513.06*8.538.497.894.884.803.21*3.831.28结果 CD19+B细胞CD19+B细胞MSCs+CD19+B结果 MSCs对CD19+B细胞凋亡的影响结果 MSCs对CD19+B细胞增殖的影响MSCs在慢性移植物抗宿主病中的应用 第二部分前期研究患者入组 p 2009年6月至2011年9月在南方医科大学南方医院及中山大 学附属孙逸仙纪念医院p 异基因造血干细胞移植超过6个月p 国立卫生研究院（NIH）的共识标准p -级的广泛性cGVHDp 通过常规的二联或三联免疫抑制方案治疗2个月后病情无好 转或持续进展MSCsMSCsMSCs免疫表型免疫表型临床症状及实验室检查 23名激素抵抗性慢性GVHD患者0 month2 month1 month3 month4 monthMSCs治疗前器官评分及治疗后反应MSCs治疗后器官反应CR：完全缓解 PR：部分缓解 NR：无缓解结 果p 1名患者死于真菌性肺炎p 4名患者在MSCs输注6个月内复发p 19名患者表现出完全缓解（CR）或部分缓解（PR）MSCs治疗前后cGVHD患者外周血T淋巴细胞亚群的变化*P0.05 *P0.01MSCs治疗前后cGVHD患者外周血B淋巴细胞亚群的变化*P0.05 *P0.01p 肾移植患者应用MSCs联合低剂量的免疫抑制剂是安全的，无 毒副作用，未增加急性排斥的风险。p MSCs可能是通过抑制CD19+B细胞的凋亡和促进CD19+B细胞的增殖增加患者体内B细胞比例的。p MSCs能够有效改善慢性移植物抗宿主病症状。p 在MSCs治疗有效的慢性移植物抗宿主病患者外周血淋巴细胞中，B细胞亚群的改变最明显。全文总结讨论 p MSCs安全性p MSCs有效性p MSCs调节机制讨论 pMSCs有效性THANK YOU