基因工程的基本 操作程序有同学知道这三种标志吗?非转基因产品认证绿色食品质量安全1简述基因工程基本操作的四个步骤;2简述目的基因的获得、运载体的构建、目的基 因的导入与检测等常用的方法及其基本原理.考点列举基因工程的基本操作程序1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定活动1 结合基因操作的四个基本过程,你能说出下列历史 事件，为什么对基因工程的诞生起到了决定性的作用？年份重大事件1944Avery等证证明DNA是遗传遗传 物质质。 1952Alfred Hershy和Marsha Chase证证明T2噬菌体的遗传遗传 物质质是DNA。1953James D. Watson和Francis H. C. Crick揭示了DNA分子的双螺旋结结构和半保 留复制机制（1962年Nobel生理或医学奖奖）。1957Crick又提出了遗传遗传 信息传递传递 的“中心法则则”（1968年Nobel生理或医学奖奖） 。 1970H.O. Smith等分离出第一种限制性核酸内切酶（1978年Nobel生理或医学奖奖）1972Paul Berg小组组完成了首次体外重组实验组实验 （1980年Nobel化学奖奖）。1973斯坦福大学的S. Cohen小组组将含有卡那霉素抗性基因的大肠肠杆菌R6-5质质粒与含 有四环环素抗性基因的另一种大肠肠杆菌质质粒pSC101连连接成重组质组质 粒，具有双重 抗药药性。 1975F. Sanger、A. Maxam和W. Gilbert发发明了DNA快速测测序技术术（1986 Nobel生理 或医学奖奖）。 1980科学家首次培育出世界第一个转转基因动动物转转基因小鼠。1983科学家首次培育出世界第一个转转基因植物转转基因烟草。1983PCR技术问术问 世（1988年发现发现 TaqDNA聚合酶）（1993年Nobel化学奖奖）。理论基础技术支持合成基因组织、器官、细胞基因组DNAcDNA文库基因文库目的基因的克隆基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取如何建立 ?活动2 体验基因文库的构建过程分析基因文库构建过程的图解，思考问题： 什么意思 ？怎么做 ？温和噬菌体： 感染宿主细菌 后不引起细菌 裂解而与宿主 细胞建立共生 关系并随细菌 繁殖传给细菌 后代。 解读cDNA文库的构建过程(1)提取某种生 物发育某一时 期的mRNA;(2)mRNA反转录 形成DNA片段;(3)DNA片段与 载体连接后,储 存在一个受体 菌的群体中。活动2 体验基因文库的构建过程分析基因文库构建过程的图解，思考问题： 就是基因 表达载体 ？（08年江苏高考）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗， 饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关 的图和表。 注意基因克隆载体与基因表达载体的区别载体(vector）：用于承载、克隆、转移目的基因(DNA片段)，能自我复制的DNA分子。（1）在基因克隆时：将目 的片段转移到宿主细胞中进 行复制克隆克隆载体；（2）在基因导入受体时： 将目的片段转移到受体细胞 中使目的片段稳定存在并表 达表达载体。目的基因 启动子和终止子 复制原点 标记基因 多种单一限制酶切点 合适大小DNA片段 复制原点 标记基因 多种单一限制酶切点 合适大小目的基因转移 转化或感染合成基因组织、器官、细胞基因组DNAcDNA文库基因文库目的基因的克隆基因工程的基本操作程序第二步：基因表达载体构建活动3 体验基因表达载体的构建过程下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），思考回答： 你知道双酶切法吗？（10年江苏高考）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点 ，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。 与只使用EcoR相比较，使用BamH和Hind两种限制酶同时处理质粒、 外源DNA的优点在于可以防止_。原核细 胞表达真核细 胞表达植物中 表达动物中 表达人体 表达发酵 工程转基因 植物动物器官 发生器转基因 动物基因 治疗目的基因转移 转化或感染合成基因组织、器官、细胞基因组DNAcDNA文库基因文库目的基因的克隆基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导 入受体细胞第四步：目的基因的检 测与鉴定你会优先选择转基因食品吗？简要说明你的理由。畅想基因产品的明天