实 验 一 气相色谱法测定食用酒中乙醇含量一 实验目的 1.了解气相色谱仪的基本结构； 2.学习和掌握使用氢火焰离子化检测器的基本操作； 3.掌握以内标法进行色谱定量分析的方法及特点； 4.学习气相色谱法测定乙醇含量的分析方法。二、实验原理气相色谱法是一种高效、快速而灵敏的分离分 析技术。当液体样品由进样口注入后立即被汽化，并被 载气带入色谱柱，经过多次分配而得以分离的各 个组分逐一流出色谱柱进入检测器，随时间变化 而产生的电信号由记录仪得到气相色谱图。对气 相色谱图进行数学分析，即可对样品进行定性定 量分析。三、仪器与试剂1.仪器：气相色谱仪、氢火焰检测器（FID）、色谱柱、微量注射器、容量瓶（10cm3）、色谱工作站、吸量管（2、 5cm3）。2.试剂：无水乙醇(A.R)、无水n-C3H7OH(A.R)、丙酮、食用酒。四、实验步骤 1. 色谱操作条件 柱温：90；汽化室温度：150；检测器温度 ：130；N2（载气）流速：40cm3/min；H2流 速：35cm3/min；空气流速：400cm3/min；2.标准溶液的测定 用吸量管准确吸取0.50cm3无水乙醇和0.50cm3无 水n-C3H7OH于10cm3的容量瓶中，用丙酮定容 至刻度，摇匀。用微量注射器吸取0.5L标准溶 液，注入色谱仪内，记录各色谱峰的保留时间tR 和色谱峰面积，求出以无水n-C3H7OH为标准物 的相对校正因子。3.样品溶液的测定 用吸管吸取1.00cm3的食用酒样品和0.50cm3的 内标物（无水n-C3H7OH）于10cm3容量瓶中， 用丙酮定容至刻度，摇匀。用微量注射器吸取 0.5L样品溶液，注入色谱仪内，记录各色谱 峰的保留时间tR，对照比较标准溶液与样品溶 液的tR，以确定样品中的醇，记录 C2H5OH和n -C3H7OH色谱峰面积，求出样品中C2H5OH的 含量。实 验 二 气相色谱法测定生物柴油中脂肪酸甲酯一、实验目的 1. 了解气相色谱仪的基本构造与一般使用方法 2. 掌握气相色谱检测器的原理和操作； 3. 了解程序升温色谱法的操作特点； 4. 学会用气相色谱仪进行归一化法定量分析。二、实验原理 程序升温是指色谱柱的温度按照适宜的程序连续地随 时间呈线性或非线性升高。在程序升温中，采用较低 的初始温度，使低沸点的组分得到良好分离，然后随 着温度不断升高，沸点较高的组分逐一“推出”。由于高 沸点组分较快地流出，因而峰形尖锐，与低沸点组分 类似。 在一定的色谱操作条件下，每种物质有一定的保留时 间，而响应值与进样量成线性关系。当样品中所有组 分都能流出色谱柱，并能给出可以测定的信号时，可 以采用采用归一化法进行定量分析。 归一化法只适用于样品中所有组分都从色谱柱流出并 被检测器检出、且都在线性范围内、同时又能测定或 查出所有组分相对校正因子的样品。三、仪器与试剂1.仪器：6890型气相色谱仪；色谱柱：HP-innowax毛细管色谱柱（300.250.25）；氢火焰离子化检测器；微量注射器。2.试剂：生物柴油；正己烷。四、实验步骤 1. 色谱操作条件：汽化室温度280；检测器温 度280；柱温采用程序升温：初始温度170 ，保持0.5min，以5min的升温速率升至 200，然后以15min的升温速率升至240 ，保持时间5min；载气：N2，柱头压60kPa； 氢气：32mLmin；空气：320mLmin；进样 量：1L。2. 取一定量的生物柴油样品于1mL的容量瓶中 ，用正己烷定容后，在上述色谱条件下进行气 相色谱分析，记录下各色谱峰的保留时间和峰 面积。根据公式（1）计算各脂肪酸甲酯的百分含量。实 验 三 高效液相色谱法测定萘一、实验目的1. 认识高效液相色谱仪, 掌握高效液相色谱仪的 基本操作；2. 掌握高效液相色谱法进行定性和定量分析的 原理；3. 掌握外标法进行定量分析的方法。二、实验原理在一定的色谱操作条件下，每种物质有一定 的保留时间，而响应值与进样量成线性关系 。外标法也叫标准曲线法。三、仪器与试剂1.仪器:Shimadzu LC-10ATvp高效液相色谱仪；紫外吸收检测器（254mm）；C18柱， 1. 25cm4.6mm；微量注射器；超声波 清 2. 洗器1台；溶剂过滤器1套。2. 试剂:甲醇：色谱纯；二次蒸馏水；萘：AR级。四、实验步骤1.色谱操作条件：色谱柱：C18柱；流动相：甲醇：水80：20流速：1mL/min检测波长：254nm柱温：40；进样量：20L。2. 标准溶液配制；3. 样品溶液的配制；4. 进样并记录色谱图 五、数据处理与分析实 验 四 内标法测定联苯一、实验目的1. 进一步熟悉高效液相色谱仪的基本构造与一般使用方法；2. 理解内标法的测定原理和优点；3. 初步学会设计色谱法进行样品测定的实验步骤，并以萘为内标物测定样品中联苯的含量。二、实验原理在一定的色谱操作条件下，每种物质有一定 的保留时间，而响应值与进样量成线性关系 。内标法也叫内标标准曲线法。三、仪器与试剂1.仪器:Shimadzu LC-10ATvp高效液相色谱仪；紫外吸收检测器（254mm）；C18柱， 1. 25cm4.6mm；微量注射器；超声波 清 2. 洗器1台；溶剂过滤器1套。2. 试剂:甲醇：色谱纯；二次蒸馏水；萘、联苯：AR级。四、实验步骤1.色谱操作条件：色谱柱：C18柱；流动相：甲醇：水90：10流速：1mL/min检测波长：254nm柱温：40；进样量：20L。2. 标准溶液配制；3. 样品溶液的配制；4. 进样并记录色谱图 五、数据处理与分析实 验 五 常见阴离子色谱分析一、实验目的1. 了解离子色谱仪的基本构造与一般使用方法；2. 能用于测定样品中常见阴离子的含量。二、实验原理离子色谱法是以为离子交换树脂为固定相 ，电解质溶液为流动相的液相色谱方法，常 以电导检测器作为通用的检测器。常见阴离子经过阴离子柱分离后，利用保 留时间进行定性分析，利用峰面积进行定量 分析。三、仪器与试剂1.仪器:ICS-90型离子色谱仪；电导检测器；阴离子分析系统，微量注射器。2. 试剂：Na2SO4、NaNO3、NaCl(均为分析纯)；9 mmol/L Na2CO3溶液。四、实验步骤1. 色谱操作条件的设置；2. 标准溶液配制；3. 样品溶液的配制；4. 进样并记录色谱图。五、数据处理与分析实 验 六 分子荧光光谱分析法测定维生素B2一、实验目的1.了解荧光光谱分析基本原理；2. 掌握荧光法的定量分析方法；3. 了解日立F-2500型荧光分光光度计的构造及其使用方法。二、实验原理维生素B2（核黄素）在一定波长的激发光照 射下会发射出绿色荧光，根据荧光强度在一 定浓度范围内与荧光物质浓度成正比，用标 准曲线法对样品进行定量分析。三、仪器与试剂1.仪器：日立F-2500型荧光分光光度计，液体样品架，50mL容量瓶8个，100mL烧杯2个，洗瓶一个，玻璃棒二根，蒸馏 水。2. 试剂：1%的醋酸溶液；维生素B2标准溶液：称出10.0mg维生素B2先溶于少量的1%的醋酸溶液，然后转移到1000mL容量瓶中，用1%的醋酸溶液定容至刻度，摇匀，至阴暗处保存。此液含维生素B210.0g/mL。四、实验步骤1. 按照日立F-2500型荧光分光光度计的使用方法开好仪器。2. 配制系列标准溶液：取5个50mL容量瓶，分 别加入1.00，2.00，3.00，4.00，5.00mL浓度为10.0g/mL的标准溶液，用水稀释至刻度，摇匀。3. 标准曲线的绘制把各标准样品置于试样架内，设置好仪器的工作条件，用蒸馏水做空白，分别扫描空白和标样的荧光光谱，根据峰高和浓度绘制标准曲线。4. 未知试样的测定准确称出一定量的未知试样于小烧杯中，用水溶解并定容至100mL容量瓶内，摇匀，用测定标准曲线相同的条件，测其荧光强度。五、数据处理与分析根据试液的荧光强度，从标准曲线上查出试液中 维生素B2的浓度，按下列公式计算维生素B2的含 量。维生素B2的含量=C100/G（g/g） C试液中维生素B2的浓度（从标准曲线上查出，单位是g/mL） C未知试样的重量，单位是克（g） 100试样被稀释的体积。实 验 七 紫外吸收光谱法测定苯甲酸一、实验目的1. 了解紫外吸收光谱仪的基本构造与一般使用方法；2. 能用于测定样品中苯甲酸的含量。二、实验原理苯甲酸在225nm处有最大吸收峰，其吸光度与 浓度的关系服从朗伯比尔定律。三、仪器与试剂1.仪器： UV1600紫外分光光度计；10mL容量瓶7个；20 mL、5 mL吸量管各1支。2. 试剂: 0.1molL-1NaOH溶液;苯甲酸钠(AR); 蒸馏水。四、实验步骤1. 苯甲酸钠贮备液的配制：称量经过干燥的苯甲酸钠适量于1000mL容量瓶中，用水溶 解，并定容。2. 苯甲酸钠工作溶液的配制：取20.00mL贮备液稀释定容至1000mL。3. 苯甲酸钠系列标准溶液的配制：分别取苯甲酸钠工作溶液0-5.00 mL按下表配制。容量瓶编号12345678工作液（mL）01.002.003.004.005.004.004.00加入NaOH（mL）1.001.001.001.001.001.001.001.00定容（mL)10.010.010.010.010.010.010.010.0C（ppm）02.04.06.08.010.0X1X2五、数据处理与分析1. 标准曲线的绘制：以苯甲酸钠系列标准溶液的吸光度为纵坐标，相应的浓度为横坐标，绘制作A-C标准曲线。2. 样品溶液中苯甲酸钠含量计算：从A-C标准曲线上查出X值，从而求出样品中苯甲酸的含量。实 验 八 双波长法同时测定维生素C和E一、实验目的1. 进一步熟悉紫外吸收光谱仪的基本构造，掌握其一般使用方法；2. 能用双波长法同时测定双组分的含量。二、实验原理吸光度具有加合性，根据两组分吸收曲线的 性质，选择两个合适的测定波长，通过解联 立方程的可以同时测出样品中双组分的含量 。三、仪器与试剂1. 仪器: UV1600紫外分光光度计；50mL容量瓶10个；20 mL、5 mL吸量管各2支。2. 试剂: 维生素C;维生素E;无水乙醇。四、实验步骤1. 维生素C和维生素E标准溶液的配制；2. 维生素C和维生素E紫外吸收曲线的绘制，确定测定波长；3. 维生素C和维生素E标准曲线的绘制；4. 未知试样的测定。五、数据处理与分析1. 维生素C吸收曲线的绘制； 2. 维生素E吸收曲线的绘制； 3. 根据吸收曲线测定波长的选定； 4. 维生素C标准曲线的绘制： 5. 维生素E标准曲线的绘制： 6. 样品溶液中维生素C和E含量计算。实 验 九 原子吸收光谱法测定 井水、河水中镁一、实验目的 .学会原子吸收光谱法测定金属元素的原理与方法；.了解原子吸收分光光度计的基本构造，初步熟悉其操作方法；.掌握火焰法测镁的条件选择。二、实验原理将样品试液吸入空气乙炔火焰中，在火焰的高 温下，镁化合物离解为镁基态原子，基态原子蒸 气对镁空心阴极灯发射的特征谱线产生吸收。将 测得的试样溶液的吸光度扣除试剂空白的吸光度 ，利用标准曲线法，确定试液中的镁含量。三、仪器与试剂 、仪器：TAS-986型/GGX-型原子吸收分光光度计 、试剂：10g/ml Mg标准液四、实验步骤. 配制Mg标准系列取10g/ml Mg标准液0.50、1.00、0.50、2.00、2.50ml，分别置于5个50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度摇匀，得Mg标准系列。. 样品：井水直接取4.00ml稀释至100ml；河水过滤后取10ml，稀释至100ml。元 素光 源灯电 流波长通 带火焰燃烧器高 度 Mg