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动物生理学实验实验十 脊髓反射的基本特征和 反射弧的分析 【实验目的】n 通过对脊蛙的屈肌反射的分析,探讨反射弧的完 整性与反射活动的关系; n 学习掌握反射时的测定方法,了解刺激强度和反 射时的关系; n 以蛙的屈肌反射为指标,观察脊髓反射中枢活动 的某些基本特征,并分析它们产生可能的神经机 制。【实验原理】n在中枢神经系统的参与下,机体对刺激所产生的适应反应过程称为反 射。较复杂的反射需要由中枢神经系统较高级的部位整合才能完成, 较简单的反射只需通过中枢神经系统较低级的部位就能完成。将动物 的高位中枢切除,仅保留脊髓的动物称为脊动物。此时动物产生的各 种反射活动为单纯的脊髓反射。由于脊髓已失去了高级中枢的正常调 控,所以反射活动比较简单,便于观察和分析反射过程的某些特征。 反射活动的结构基础是反射弧。典型的反射弧由感受器、传入神经、 神经中枢、传出神经和效应器五个部分组成。引起反射的首要条件是 反射弧必须保持完整性。反射弧任何一个环节的解剖结构或生理完整 性一旦受到破坏,反射活动就无法实现。n完成一个反射所需要的时间称为反射时。反射时除与刺激强度有关外 ,反射时的长短与反射弧在中枢交换神经元的多少及有无中枢抑制存 在有关。由于中间神经元连结的方式不同,反射活动的范围和持续时 间,反射形成难易程度都不一样。【实验材料】n 动物:蟾蜍或蛙。n 器械:蛙类手术器械、铁支柱、玻璃平皿、烧杯 (500 ml或搪瓷杯)、小滤纸(约1 cm1 cm)、纱 布、秒表、双输出刺激器(一台)、通用电极( 两个)。 n 药品和试剂:硫酸溶液(0.1%、0.5%、1%)。【实验步骤】u标本制备:取一只蟾蜍,用粗剪刀由两侧口裂剪去上方头 颅,制成脊蟾蜍。将动物俯卧位固定在蛙板上,于右侧大 腿背部纵行剪开皮肤,在股二头肌和半膜肌之间的沟内找 到坐骨神经干,在神经干下穿一条细线备用。将脊蟾蜍悬 挂在铁支柱上。【实验项目】u脊髓反射的基本特征: u骚扒反射:将浸有1%硫酸溶液的小滤纸片贴在蟾蜍的 下腹部,可见四肢向此处骚扒。之后将蟾蜍浸入盛有 清水的大烧杯中,洗掉硫酸滤纸片。 u反射时的测定: 在平皿内盛适量的0.1%硫酸溶液,将 蟾蜍一侧后肢的一个脚趾浸入硫酸溶液中,同时按动 秒表开始记录时间,当屈肌反射一出现立刻停止记时 ,并立即将该足趾浸入大烧杯水中浸洗数次,然后用 纱布擦干。此时秒表所示时间为从刺激开始到反射出 现所经历的时间,称为反射时。重复3次,注意每次浸 入趾尖的深度一致,相邻2次实验间隔至少23 s。3次 所测时间的平均值即为此反射的反射时。u按上述方法依次测定0.5%、1%硫酸刺激引起的屈肌反射反 射时,比较不同浓度硫酸所引起反射时的差异。 u反射阈刺激的测定:用单个电脉冲刺激一侧后足背皮肤, 由大到小调节刺激强度,测定引起屈肌反射的阈刺激。 u反射的扩散和持续时间(后放): 将一个电极放在蟾蜍的 足面皮肤上,先给予弱的连续阈上刺激观察发生的反应, 然后依次增加刺激强度,观察每次增加刺激强度所引起的 反应范围是否扩大,同时观察反应持续时间有何变化?并 以秒表计算自刺激停止起,到反射动作结束之间共持续多 少时间。比不同强度刺激所引起的结果有何不同。 u时间总和的测定: 用单个略低于阈强度的阈下刺激,重复 刺激足背皮肤,由大到小调节刺激的时间间隔(即逐渐增 加刺激频率),直至出现屈肌反射。 u空间总和的测定: 用两个略低于阈强度的阈下刺激,同时 刺激后足背相邻两处皮肤(距离不超过0.5 cm),观察是 否会出现屈肌反射。u反射弧的分析 u分别将左右后肢趾尖浸入盛有1%硫酸的平皿内(深入的 范围一致),双后肢是否都有反应? 实验完后,将动物浸于 盛有清水的烧杯内洗掉滤纸片和硫酸,用纱布擦干皮 肤。 u在左后肢趾关节上作一个环形皮肤切口,将切口以下 的皮肤全部剥除(趾尖皮肤一定要剥除干净),再用1%硫 酸溶液浸泡该趾尖,观察该侧后肢的反应。实验完后, 将动物浸于盛有清水的烧杯内洗掉滤纸片和硫酸,用 纱布擦干皮肤。 u将浸有1%硫酸溶液的小滤纸片贴在蛙的左后肢的皮肤 上。观察后肢有何反应?待出现反应后,将动物浸于盛 有清水的烧杯内洗掉滤纸片和硫酸,用纱布擦干皮肤 。u提起穿在右侧坐骨神经下的细线,剪断坐骨神经,用连续 阈上刺激,刺激右后肢趾,观察有无反应?u分别以连续刺激,刺激右侧坐骨神经的中枢端和外周端,观察该后肢的反应。u以探针捣毁蟾蜍的脊髓后再重复上步骤,观察有何反应。【注意事项】u制备脊蛙时,颅脑离断的部位要适当,太高因保留部分 脑组织而可能出现自主活动,太低又可能影响反射的产 生。u用硫酸溶液或浸有硫酸的纸片处理蛙的皮肤后,应迅速 用自来水清洗,以清除皮肤上残存的硫酸,并用纱布擦 干,以保护皮肤并防止冲淡硫酸溶液。u浸入硫酸溶液的部位应限于一个趾尖,每次浸泡范围也 应一致,切勿浸入太多。【实验结果】u描述各项实验结果,探讨形成的机制。 u说出有反射活动时的反射弧的组成。
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