弧菌科常规检验课件制作 陆曙梅弧菌科种类 弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 发光菌属等课件制作 陆曙梅弧菌科共同特征 革兰阴性菌 需氧兼性厌氧 营养要求不高 氧化酶 发酵葡萄糖产酸不产气课件制作 陆曙梅弧菌科三个菌属的鉴别试验弧菌属气单胞菌 属邻单胞菌 属 甘露醇+/-+-鸟氨酸+/-+精氨酸+/-+/-+O/129敏感SRSTCBS生长+-嗜盐性+/-课件制作 陆曙梅霍乱弧菌 是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体 包括古典生物型和ElTor生物型 O139是新的流行菌株课件制作 陆曙梅形态染色 革兰阴性 弧形或逗点状 单鞭毛，运动呈“穿梭样”或“流星样” 无芽孢，无荚膜 在新鲜粪便中成“鱼群样”排列课件制作 陆曙梅霍乱弧菌革兰染色鞭毛染色课件制作 陆曙梅培养特性 兼性厌氧 营养要求不高 耐碱不耐酸，常用pH8.49.2碱性培养 基 在液体培养基中形成菌膜 菌落圆形、较大、扁平课件制作 陆曙梅霍乱弧菌常用培养基 碱性蛋白胨水 碱性琼脂平板 硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平 板（TCBS） 庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾）课件制作 陆曙梅生化反应试验名称结果试验名称结果氧化酶+吲哚+硝酸盐还原+葡萄糖+赖氨酸+蔗糖+鸟氨酸+甘露醇+精氨酸双水解-0、1NaCl+V-Pd7、10 NaCl-明胶液化+课件制作 陆曙梅霍乱弧菌生物型 O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生 物型 两种生物型具有相同的抗原结构 两种生物型多数生物学性状相似课件制作 陆曙梅霍乱弧菌两种生物型的鉴别鉴别试验古典生物型ElTor生物型V-P-+羊红细胞溶解-+50U多粘菌素SR鸡红细 胞凝集-+组噬菌体裂解+-组噬菌体裂解-+课件制作 陆曙梅霍乱弧菌分群、型 O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础 根据O抗原不同分为139个血清群 O1群包括古典生物型和ElTor生物型 其他群称为非O1群（非凝集弧菌） O1群血清型（见下表）血清型A抗原B抗原C抗原小川型（AB）+-稻叶型（AC）+-+彦岛型（ABC）+课件制作 陆曙梅抵抗力与变异 ElTor型抵抗力较古典型强， 在水中存活时间长 对酸性物质敏感 对庆大霉素耐受 多次传代可失去典型形态而成为杆状课件制作 陆曙梅临床意义 致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮 细胞分泌功能亢进，分泌大量肠液。 所致疾病： 经肠道传染，引起烈性肠道传染病 霍乱，为甲类传染病。 典型病人粪便呈“米泔水”样 病后可获得牢固免疫，以SIgA为主。 我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。课件制作 陆曙梅作用机制示意图课件制作 陆曙梅课件制作 陆曙梅微生物检验标本采集 发病早期采集标本 以“米泔水”样便为主，及时送检 卡布培养基保存 严密包装，专人送检课件制作 陆曙梅检验程序标本增菌培养 碱性蛋白胨水分离培养（TCBS、碱性平板）生化鉴定分型血清学鉴定确诊报告初步报告快速诊断直接涂片 动力、制动试验课件制作 陆曙梅检验方法显微镜检查 涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注 意形态、排列 动力观察：压滴法或暗视野镜检，注意 运动方式 制动试验：O1诊断血清与菌体结合，动 力消失课件制作 陆曙梅分离培养 标本接种碱性蛋白胨水增菌68小时， 转种TCBS或庆大霉素琼脂， TCBS：出现黄色菌落 庆大霉素琼脂：出现中心灰褐色的菌落课件制作 陆曙梅鉴定 生化反应：粘丝试验、霍乱红反应 确定血清群：O1群诊断血清与可疑菌落作玻片 凝集，以确定是否为O1群 确定血清型：与分型诊断血清作玻片凝集，以 确定血清型别 确定生物型：第组噬菌体裂解试验多粘菌素B敏感试验鸡红细胞凝集试验溶血试验课件制作 陆曙梅副溶血性弧菌生物学性状 革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽孢 ，无荚膜 营养要求 不高，嗜盐性，最适盐浓度3.5 NaCl，无盐培养基不生长 TCBS：形成不发酵蔗糖的绿色菌落 神奈川现象：致病性副溶血性弧菌能溶解 人或兔红细胞，不溶解马红细胞课件制作 陆曙梅副溶血性弧菌临床意义 致病物质：溶血素（耐热直接溶血素和 耐热相关溶血素） 所致疾病： 食入副溶血性弧菌污染的盐腌食品，引 起食物中毒课件制作 陆曙梅气单胞菌属 形态染色：革兰阴性杆菌，或球杆状、丝状，极端 鞭毛，无芽孢 生长条件：兼性厌氧；营养要求不高生长温度较宽，045嗜冷菌37以下生长嗜温菌1042生长课件制作 陆曙梅气单胞菌属 生长现象TCBS上不生长血平板：灰白、光滑、凸起菌落肠道选择平板：形成不发酵乳糖菌落 生化反应 氧化酶、触酶发酵葡萄糖产酸产气6.5NaCl不生长O129不敏感 多数菌株产-内酰胺酶，对青霉素耐药课件制作 陆曙梅气单胞菌属临床意义 致病物质：溶血毒素、细胞毒素 所致疾病：肠道感染：是夏季腹泻常见病原菌肠外感染：败血症、伤口感染等 多数菌株产-内酰胺酶，对青霉素耐药课件制作 陆曙梅检验程序标本增菌分离培养 （血平板、Mac）全面生化反应可疑菌落肠毒素测定初步生化反应涂片 染色镜检血标本氧化酶 TCBS生长 O/129 耐盐试验课件制作 陆曙梅鉴定试验 与肠道杆菌、非发酵菌鉴别 与邻单胞菌属和弧菌属鉴别 气单胞菌属种间鉴别课件制作 陆曙梅肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别鉴定试验肠杆菌科非发酵菌弧菌科氧化酶葡萄糖氧化/ 发酵（O/F）FOF鞭毛周鞭毛单、丛、周 单、丛课件制作 陆曙梅鉴定依据 革兰阴性杆菌，丛鞭毛 肠道选择平板上无色透明菌落 氧化酶、葡萄糖发酵 O/129：R TCBS： 6.5NaCl：课件制作 陆曙梅邻单胞菌属主要性状 只有一个菌种：类志贺邻单胞菌 革兰阴性杆菌，单鞭毛或丛鞭毛，无芽孢，无 荚膜 兼性厌氧，营养要求不高 在SS平板形成不发酵乳糖菌落 氧化酶，葡萄糖发酵 O/129：S TCBS：不生长 6.5NaCl：不生长 赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸双水解均 多数菌株产-内酰胺酶，对青霉素耐药课件制作 陆曙梅邻单胞菌属临床意义 腹泻、食物中毒，多见于夏季 败血症、脑膜炎等，多见于免疫力低下 者，感染率低，但死亡率高。课件制作 陆曙梅邻单胞菌属检验程序标本增菌分离培养 （血平板、Mac）全面生化反应可疑菌落初步生化反应涂片 染色镜检血标本氧化酶 TCBS生长 O/129 耐盐试验课件制作 陆曙梅邻单胞菌属鉴定 与志贺菌属鉴别：氧化酶、动力、血清 学 与气单胞菌属鉴别：O/129，肌醇试验 与弧菌属鉴别：TCBS、6.5NaCl生长 试验课件制作 陆曙梅弯曲菌属 弯曲菌属是一类呈逗点状或S形的革兰阴 性杆菌，广泛分布于动物界，其中有些 可引起动物和人类腹泻、胃肠炎和肠道 外感染。课件制作 陆曙梅形态染色 革兰阴性菌，螺旋形、S形，一端或两端 有单鞭毛，无芽孢，无荚膜，运动活泼， 暗视野下呈投标样运动，课件制作 陆曙梅培养特性 微需氧 最适生长温度随菌种而定 营养要求高，常用改良弯曲菌培养基（ Campy-BAP） 两种类型菌落：扁平湿润边缘不整齐， 沿穿刺线扩散生长；圆形、突起、湿润 、黏液样外观课件制作 陆曙梅生化反应 氧化酶阳性 触酶阳性 不分解和不发酵糖 不分解尿素课件制作 陆曙梅临床意义 传播方式：经口感染 致病物质：产生肠毒素、细胞毒素、内 毒素等致病物质 空肠弯曲菌可引起急性肠炎、格林巴利 综合征 胎儿弯曲菌可引起败血症、脑膜炎等课件制作 陆曙梅弯曲菌属检验 标本采集：粪便，肛拭，剩余食物，立 即送检 镜检： 悬滴法动力检查观察投标样或螺旋动力 染色检查：革兰阴性细小弯曲菌 培养：微需氧、温度课件制作 陆曙梅鉴定 动力 形态 菌落 马尿酸钠水解试验（空肠弯曲菌阳性） 醋酸吲哚水解试验（空肠弯曲菌阳性） 不同温度的生长实验课件制作 陆曙梅幽门螺杆菌 螺杆菌是一群氧化酶和触酶阳性，微需 氧、37能生长，在25 和42 生长不 良的革兰阴性弯曲菌 目前研究的最多的是幽门螺杆菌（Hp）课件制作 陆曙梅形态染色 革兰阴性 螺旋状弯曲，在胃粘膜环境中，具有典 型的形态，在陈旧培养物中，可呈圆球 状 单端或双端有多根带鞘鞭毛 无芽孢课件制作 陆曙梅培养特性和生化反应 微需氧，营养要求高，需动物血液或血 清。 37能生长，在25 和42 生长不良 过氧化氢酶和氧化酶阳性。尿素酶丰富 ，是鉴定的主要依据之一。课件制作 陆曙梅临床意义 致病物质：黏附作用，尿素酶，蛋白酶 ，细胞毒素等 与人类慢性胃炎、消化道溃疡有密切关 系课件制作 陆曙梅微生物学检验 标本采集：胃、十二指肠粘膜标本 显微镜检查： 直接镜检 活检标本革兰染色 组织学切片染色检查 分离培养 快速脲酶试验:530钟内观察结果 PCR法课件制作 陆曙梅课件制作 陆曙梅弯曲菌属温度生长试验菌种432537空肠弯曲菌+-+大肠弯曲菌+-+胎儿弯曲菌-+简明弯曲菌-+课件制作 陆曙梅