肠道杆菌 是一大群生物学性状相近的革兰 阴性杆菌。与医学关系密切的肠道杆菌 正常菌群埃希菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 肠杆菌属 沙雷菌属 枸橼酸菌属致病菌致病性大肠埃希菌 志贺菌属 沙门菌属 耶尔森菌属肠道杆菌共同特性 形态染色：均为革兰阴性杆菌，无芽孢 ，有菌毛，多数有鞭毛，少数有荚膜 培养特性：需氧、兼性厌氧；营养要求 不高；光滑型菌落； 生化反应：氧化酶；触酶；硝酸盐还原试验 发酵葡萄糖非致病菌多数分解乳糖，致病菌多数不 分解乳糖 抗原结构 O抗原：化学成分为脂多糖；耐热；种 属特异性；与相应抗体结合出现颗粒状 凝集；共同抗原可引起交叉反应 H抗原：化学成分为蛋白质；不耐热； 与相应抗体出现絮状凝集 表面抗原：化学成分为多糖；不耐热； 可阻断O凝集 遗传变异：S-R变异、H-O变异 临床意义：致病物质：菌毛、表面抗原、内毒素、 肠毒素传染途径：肠道传染、肠道外传染所致疾病：肠道致病菌引起肠道传染病（细菌性痢疾 、伤寒等）条件致病菌：是医院感染的主要病原常用培养基 选择性培养基：SS平板：含乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌 绿、硫代硫酸钠等Mac平板：含乳糖、中性红指示剂、胆盐等中国蓝平板：含乳糖、中国蓝和玫瑰红酸指 示剂、EMB平板：含乳糖、伊红和美蓝指示剂选择性平板的特点 均含有乳糖和酸碱指示剂：细菌分解乳糖产酸，使培养基pH降低， 指示剂呈酸性变色，指示剂不同，菌落 呈现不同的颜色。分解乳糖的细菌呈有 色菌落，不分解乳糖的细菌为无色菌落 含有不同的抑制剂：对革兰阳性菌和非致病菌有不同程度的 抑制作用，因此可以选择性的培养肠道 致病菌。选择平板细菌生长现象双糖铁培养基（KIA） 配方：含蛋白胨、牛肉膏、氯 化钠、硫代硫酸钠、硫酸亚铁 、琼脂、酚红、乳糖1 、葡 萄糖0.1 用途：主要用于观察肠杆菌科 细菌是否分解乳糖、葡萄糖产 酸产气、是否产生H2S。KIA结果观察： 发酵葡萄糖：底层呈酸性反应（黄色）， 斜面为碱性反应（红色），若发酵葡萄糖 产酸产气，底层同时有气泡 发酵葡萄糖和乳糖：底层和斜面均呈酸性 反应（黄色） 产生H2S：培养基变黑1.未接种细菌3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性 （ AA）2.分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性（AA）4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性 （KA）5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性 （KA）微生物学检验 标本采集肠道标本：新鲜粪便肠外标本：根据感染部位不同采集不同 标本检验程序粪 便肠道选择培养基可疑菌落生化反应血清学实验结果报告药敏试验肠道标本血平板、弱选择平板肠道杆菌的生化反应鉴定 与其他科细菌鉴别：鉴定试验肠杆菌科非发酵菌弧菌科氧化酶葡萄糖氧化/ 发酵（O/F）FOF鞭毛周鞭毛单、丛、 周单、丛初步分群苯丙氨酸（） 葡萄酸盐（）苯丙氨酸（） 葡萄酸盐（）苯丙氨酸（） 葡萄酸盐（） 埃希菌属变形杆菌属克雷伯菌属沙门菌属普罗威登斯菌属肠杆菌属志贺菌属摩根菌属沙雷菌属枸橼酸菌属哈夫尼亚菌属爱德华菌属耶尔森菌属肠道杆菌属间鉴定菌属KIAMIU 斜面底层气体 H2S动 力吲 哚脲 酶 埃希菌属A/KA/-+/-+-志贺菌属KA-+/-沙门菌属KA+D/+-变形杆菌属KA+/+-/+克雷伯菌属AA+-d+微量生化反应系统鉴定 将细菌的多项生化反应的2进制数结果数 ，转换成8进制编码而汇集成册，丛编码 的检索表中检索而确定细菌菌名 010011100011100010 011 100 011 100000 0 010 1 001 2 011 3 100 4 101 5 110 6 111 713434肠道杆菌埃希菌属埃希菌属 种类大肠埃希菌蟑螂埃希菌弗格森埃希菌赫尔曼埃希菌伤口埃希菌形态染色 革兰阴性短杆菌，多数有周鞭毛，有荚 膜或微荚膜，有菌毛，均无芽孢培养特性 兼性厌氧 营养要求不高 圆形光滑菌落 菌落特征SS平板红色菌落Mac平板红色菌落EMB平板紫黑色有金属光泽菌落生化反应 氧化酶试验（） 分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖等，（个别 菌株迟分解乳糖或不分解乳糖） KIA：AA MIU： IMViC：抗原结构 抗原种类：O、H、K抗原 意义：表示大肠埃希菌血清型 血清型表示式：O:K:H 举例：O111:K58:H2抵抗力 胆盐、煌绿对该菌有抑制作用 对氯霉素、链霉素、庆大霉素敏感，但 易产生耐药性临床意义 致病物质：K抗原、菌毛、内毒素、肠毒 素（LT、ST） 所致疾病：肠外感染：多为机会感染，表现为泌尿 系感染（多见），胆囊炎、腹膜炎等肠内感染：由致病大肠埃希菌引起，表 现为腹泻。微生物学检验 标本采集：肠外感染：根据病变部位不同采集不同 标本，如血液、尿液、分泌物等肠内感染：采集新鲜粪便检验程序肠内感染粪 便肠道弱选择培养基分解乳糖菌落ETEC生化反应毒素测定EPEC EIEC EHEC与O、K多价诊断血清做玻片凝集试验生化反应和血清学分型检验程序肠外感染脓、尿、脑脊液等革兰染色镜检接种血平板 分离培养可疑菌落生化反应 氧化酶、KIA MIU报告结果血液增菌菌落涂片染色检验方法肠外感染 标本直接涂片镜检 分离培养：标本接种血平板和Mac 或 EMB平版， 经1824小时培养，挑取可疑菌落作进一步鉴定 。血标本先增菌，再分离培养。 鉴定：菌落涂片生化反应氧化酶：（与非发酵菌鉴别）KIA：A A/ MIR：IMViC 尿菌落计数：10万ml尿液有诊断意义检验方法肠内感染 分离培养：粪便标本接种Mac 或 EMB平 版，经1824小时培养，挑取可疑菌落作 进一步鉴定。 生化反应：KIA、MIU、IMViC符合大肠 埃希菌 致病大肠埃希菌鉴定ETEC的鉴定 生化反应符合大肠埃希菌 毒素检测 方法LTST 生物 学方 法家兔或小白鼠肠袢试验家兔或小白鼠肠袢试验皮肤毛细血管通透性试验乳鼠灌胃试验 免疫 学法ELISAELISA固相放免 分子 生物 学法基因探针基因探针EPEC的鉴定 生化反应符合大肠埃希菌 血清学分型先用多价诊断血清做玻片凝集试验，如凝 集再用单价诊断血清确定血清型EIEC的鉴定 生化反应特点（与志贺菌相似）发酵葡萄糖产酸不产气不发酵或迟分解乳糖多数菌株动力阴性 与志贺菌的鉴别： 毒力测定：豚鼠眼结膜试验 血清学分型：O152、O124EHEC的鉴定 生化反应符合大肠杆菌 血清学分型：有50多个型，代表为O157:H7 O157:H7不发酵山梨醇，有助于选择性分离 培养鉴定依据 在肠道选择平板上为发酵乳糖的有色菌 落 在KIA上多为 IMViC为 尿酶试验 致病性大肠杆菌需作血清学鉴定或毒力 测定特性不耐热肠毒素耐热肠毒素 分子量较大，73000较小，15005000耐热性不耐热耐热免疫原 性有无B亚单位 受体肠黏膜GM1神经 节苷酯肠黏膜GM1神经节苷 酯 致病机 理活化细胞腺苷酸环化 酶，细胞内cAMP含 量升高，分泌功能亢 进，引起腹泻活化细胞鸟苷酸环化酶， 细胞内cGMP含量升高， 分泌功能亢进，引起腹泻LT与ST的比较致病大肠埃希菌种类菌株侵袭部位疾病与症状致病机制ETEC小肠旅行者腹泻、婴幼 儿腹泻、水样便、 腹痛等LT、STEPEC小肠婴幼儿腹泻、水样 便发热、呕吐病菌黏附、破坏 细胞EIEC结肠志贺样腹泻，脓血 便黏附、内毒素破坏 细胞EHEC结肠出血性结肠炎等志贺样毒素（ VERO毒素）EAggec小肠婴儿腹泻、水样便 、脱水黏附、毒素大肠埃希菌生化反应结果KIAMIUIMViC氧 化 酶斜 面底 层气 体H2 S动 力吲 哚尿 酶IMViCAA/-/-KAKAKA/-与志贺菌的鉴别生化反应鉴别试验EIEC志贺菌粘质酸盐产酸醋酸盐利用赖氨酸脱羧