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动物实验基本操作技术一、实验动物的麻醉方法u全身麻醉法:吸入法,注射法u局部麻醉法:浸润麻醉,表面麻醉(一)全身麻醉法1、吸入法麻醉药: u乙醚 u氯仿 u三氟乙烷2、注射法麻醉药:u 巴比妥类药物u 氯胺酮u 乌拉坦u 水合氯醛(一)全身麻醉法(二) 局部麻醉法u 1% 盐酸普鲁卡因 局部浸润麻醉u 0.022盐酸可卡因 表面麻醉麻醉药物应用原则:l依据动物体重计算麻醉药物的剂量;l依据动物生命体征变化控制给药速度;l掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。针对不同的动物,选择不同的麻醉药物 、实施不同的麻醉方法。麻醉具体操作:家兔全身麻醉 麻醉剂:3%戊巴比妥钠,1ml/kg(30mg/Kg )前1/2快速推入,使动物能顺利、快速地渡 过兴奋期;后1/2速度宜慢,且边注射边注 意观察动物的生命体征变化,当确定已达到 麻醉效果时,即停止给药,不必急于将剩余 的麻醉药物全部推入。给药方法:耳缘静脉注射麻醉成功标志角膜反射迟钝 或消失肢体肌肉松弛疼痛反射消失呼吸变深变慢 二、动物实验常用手术器械1、手术刀l 由刀片和刀柄组成,可分为大、 中、小号不同类型。 l 大号切开皮肤; l 中号切割脏器组织; l 小号切割特殊部位。 l 安装:先用持针器(或直型 止血钳)夹住刀片,左手握 住刀柄,按刀片上的空隙对 准刀柄上的槽隙,顺势推入 即可。手术刀握持方法执笔式:即以持笔的手 法握住刀柄,适用于小范 围内的组织切开,随意性 强,可作垂直或水平切割 。持弓式:右手中指、无名指 按压在手术刀柄的外侧缘 ,拇指放在刀柄内侧缘, 食指按压在刀片后13处 。适用于切开皮肤。2、组织镊l 组织镊和眼科镊。 l 组织镊钳夹组织,分离组 织和筋膜。 l 眼科镊分离血管。l 使用手法:以食指、中指放 于器械的外侧缘,拇指放于 内侧缘,集3指的力量实施操 作动作,而且适用于左右手 的同时操作。3、组织剪4、止血钳l 止血和分离组织。l 使用方法:以拇指、中指(或 无名指)分别套人止血钳的套 扣内,控制止血钳展开的力度 ,以食指放在止血钳的关节部 位,控制止血钳的方向和钳夹 组织部位的准确性。l 切忌左右手分别抓住止血钳的 套扣部位,用两手的合力进行 止血或分离组织。5、持针器持针器的基本构件与止血钳大致相同, 使用方法基本一致。 6、缝合针l 有圆针和角针两种,圆针用于缝合组织结构; l 角针边缘锋利,除具有穿刺功能外,还具有切割的作用;缝合针需配合持针器同时使用。7、探针包括金属探针和玻璃分针;用于对精细部位的分 离和游离等操作。有时,在实施血管插管技术时 ,切开血管壁后往往借助于探针先将切口挑起, 然后插入导管。 三、动物实验常用插管技术u 气管插管术u 颈动脉插管术u 颈静脉插管术u 导尿管插管术插管技术的基本步骤1. 动物称重、麻醉、固定。 2. 插管部位皮肤去毛、备皮。 3. 皮肤切开。 4. 皮下组织结构的分离。 5. 目标器官或组织结构的游离。 6. 导管的插入或固定。家兔颈部神经和血管的解剖位置迷走神经 交感神经减 压 神 经气管插管术1、麻醉固定、颈部 皮肤去毛、备皮2、在颈前区正 中作一约5-7cm 的切口3、钝性分离皮下组织、肌肉,游离出气管, 穿线备用。4、在甲状软骨下 方第3-4个环状软骨 上作一倒“T”形切 口,插入“Y”形气 管插管,并用线固 定好。颈动脉插管技术1、由颈正中剪开一约5-7cm的口 2、钝性分离皮下筋膜3、分离一侧颈总动脉,穿双线备用。4、结扎远心端,在距结扎线约2-3cm处用 动脉夹夹闭颈总动脉近心端。5、在靠近结扎线处用眼科剪剪一“v”形切口 ,切口大小约为动脉口径的1/31/2。6、将压力换能器与动脉插管连接好并充满肝 素,向近心端插入动脉插管,用线结扎牢固 。三通的使用:u进入BL410/420系统。u选择“实验项目” 选择“循环实验” “兔 动脉血压调节”实验模块;7、打开换能器开关,观察并记录动脉血压。或选择“输入信号”选择“通道”“压力 ”点击“开始”实验按钮,即可在屏幕上观 察到正常的血压曲线。动脉插管注意事项l动脉插管和血压换能器内注满肝素生理 盐水以排气抗凝。l压力换能器与动物心脏等高。l动脉插管与颈总动脉呈一条直线,方向 一致 。 l掌握好三通管的方向。 l结扎固定牢固。颈静脉插管术尿道插管术 最常用的尿液收集办法,可用于反映较长时 间内尿量变化的实验。常用于雄兔。 将动物固定于手术台上(可轻度麻醉)。取 一根粗细合适的导尿管,在其头端约12cm 涂上液体石蜡减小摩擦。将导尿管从尿道口 徐徐插入,当导尿管插入膀胱后,即可见尿 液从管中流出,用线或胶布固定。操作练习全身麻醉家兔 气管插管颈总A插管
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