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奶牛“同期发情-定时输精”技术孙丽萍1 ,宋亚攀2,翁士乔1,杨利国2*1. 宁波市三生药业有限公司 浙江宁波,315100 2. 华中农业大学动物科技学院,湖北武汉,430070孙丽萍硕士 宁波市三生药业有限公司1. “同期发情-定时输精”的研究 背景和意义根据笔者对湖北省宜昌市、黄冈市多个规模化奶 牛场的调查和研究,发现:奶牛发情鉴定在规模化奶牛养殖中是一个难题, 容易因发情鉴定不及时或者暗发情而漏配,增大 产犊间隔,降低繁殖效率。使用同期发情、同期排卵、定时输精技术可有效 的克服这一缺点,并且不需要发情鉴定,即可定 时进行输精,提高繁殖效率,便于配种员的操作 。2. 同期发情-定时输精技术使一群奶牛在同一时期内发情并排卵的技术,称 为同期发情(synchronization of estrus),也 叫发情同期化(estrus synchronization)。同期发情是表面现象,而同期排卵 (synchronization of ovulation)则是同期发情 的内在表现和本质,是我们所追求的结果。在胚胎移植过程中,使用冷冻精液配种和新鲜胚 胎移植时,一般要求发情差异时间不超过1d。因 此,必须严格控制同期发情的效果和准确性。2.2 同期发情技术的原理黄体期间,黄体分泌的孕激素对卵泡发育有极强 的抑制作用。只有黄体消退、血浆中孕激素水平 下降以后,新的卵泡才能发育成熟和排卵,奶牛 表现出正常的发情。因此,控制卵巢上黄体的消长是控制奶牛同期 发情的关键。第一、延长黄体期第二、缩短黄体期2.2.1 延长黄体期目前多采用孕激素(P4)处理912d,但处 理后不能使全部母牛的黄体消退。因此可以在孕激素处理开始时给予一定剂 量的雌激素,以加速黄体溶解,缩短黄体 期,提高孕激素处理结束后卵泡发育的同 期率。2.2.2 缩短黄体期消除母牛卵巢上黄体最有效的方法是利用前列腺素及其类似物(PGs)。母牛用PGs处理后,黄体消退,卵泡发育成熟,从而发情。各种家畜对PG的敏感程度不一样,牛的黄体必须在上次排卵后第5天开始才对PG敏感,故对于一个未孕的牛群来说,一次PG处理后牛的理论发情率为76%(16/21)。使用PG两次处理法,可以克服一次处理中有部分母牛不能同期发情的不足。通常在第一次处理后912d再做第二次处理,用于牛和羊的同期发情,可以获得较高的同期发情率和配种受胎率。2.3 同期发情的激素抑制卵泡发育的激素孕激素及其类似物:孕酮、甲孕酮、氟孕酮、氯地孕酮、 甲地孕酮及18-甲基炔诺酮等。这类药物的用药期可分为长 期(1421d)和短期(812d)两种,一般不超过一个正 常发情周期。溶解黄体的激素前列腺素及其类似物:前列腺素如PGF2和氯前列烯醇,仅 对处于黄体期的母牛有效。促进卵泡发育、排卵的激素PMSG、hCG、FSH、LH、GnRH和氯地酚等。3. 奶牛同期发情-定时输精技术 孕激素阴道栓-定时输精法 PG处理法 孕激素-PG法 PRID-PGF2-PMSG法 PRID-PGF2-GnRH法 CIDR-E2-PGF2法 GnRH-PG-GnRH法(Ovsynch法) Heatsynch法同期发情的原理在各种家畜都是通用的,但是不同畜种 间、不同生理阶段使用不同激素处理所要求的剂量不尽 相同,因此应具体加以分析。本文根据国内外学者研究 成果,对适于奶牛的8种同期发情-定时输精技术进行综述 。3.1 孕激素阴道栓-定时输精法使用PRID或CIDR放置阴道栓,912d后撤 栓。大多数母牛在撤栓后第24d内发情,可以 在撤栓后第56h定时输精。也可以在撤栓后第24d内加强发情观察, 对发情者进行适时输精,受胎率更高;利 用兽医B超,实时检测卵泡发育,当有大卵 泡发育时,肌注GnRH,2h后人工授精。3.2 PG处理法PG一次处理法肌肉注射25mg的PGF2,大多数母牛在 处理后第25d内发情,然后进行发情鉴定 ,适时输精。PG二次处理-定时输精法由于一次处理后,仅有70%左右的母牛 有反应,因此可以在第一次处理后间隔11d 再用同样的剂量处理一次,8082h后定时 输精,可获得54%的情期受胎率。3.3 孕激素-PG法先用孕激素通过阴道栓处理7d,处理结束时注射 PG,母牛一般可在处理结束后23d内发情并排卵 。其理论依据是:经过孕激素处理7d后,处理排卵 后5d内的母牛其黄体已经至少发育了5d,这时对 PG已经敏感,此时再用PG处理后可以获得较高的 发情率和受胎率。高庆华等(2006)利用孕激素海绵栓-PMSG-PG 法处理受体牛同期发情率达到75%,48h同期率达 到62.15 % ,受胎率达到44.14 %。3.4 PRID-PGF2-PMSG法Mialot等2003研究发现,配种后35d妊娠诊断的受胎率53.8%, 配种24d和35d之间的胚胎死亡率为13.2%(n=333)。 3.5 CIDR-E2-PGF2法Femandes等(2001)和Kima等(2005) 。3.6 PRID-PGF2-GnRH法Mialot等2003,配种后30d妊娠诊断的受胎率44.7%(n=315)。3.7 GnRH-PG-GnRH(Ovsynch)法Pursley等(1995)发明了Ovsynch法,发表在Theriogenology上 。 国内外众多学者研究表明,利用Ovsynch法受胎率可达50%以上; 并且可用于卵巢囊肿的奶牛。“生源”(GnRH) 一种不需要发情鉴定就能定时配种的新产品!3.8 Heatsynch法Heatsynch法是对Ovsynch法的改进和微调。 Bartolome等(2005)和 Kasimanickam(2005)。4. 讨论 4.1 TAI在奶牛生产上的意义4.1.1 有利于推广人工授精技术常规的人工授精需要对每头奶牛进行发情鉴定,这 对于群体较大的规模化奶牛场来说费时费力,不利 于推广。而利用同期发情技术结合定时输精技术(Timed Artificial Insemination, TAI)就可以省去发情 鉴定这一中间步骤,减少因暗发情造成的漏配,提 高奶牛繁殖效率。4.1.2 便于奶牛生产管理,提高效率现代奶牛养殖业是规模化的养殖,利用同期发情技 术,可以实现同期配种、妊娠、分娩、泌乳高峰。 集中安排生产活动,提高生产效率,降低生产成本 ,便于牛奶销售。对于低繁殖率的畜群,比如我国南方地区的黄牛和 水牛,其繁殖率一般低于50%,这些畜群中的部分个 体因饲养水平较低、使役过度等原因往往在分娩后 很长一段时间内不能恢复正常的发情周期,因而对 其进行诱导同期发情、配种、受孕,可以提高繁殖 率。随着奶牛产奶量的不断提高,奶牛的繁殖率却一直 在下降,使用同期发情技术,可提高奶牛繁殖率。4.1.3 同期发情是胚胎移植技术的基础采用新鲜胚胎移植时,一个供体可以获得 十多枚胚胎,这就需要一定数量与供体母 牛同期发情的受体母牛。此外,有时候胚胎的生产和移植不在同一 个地点进行,也需要异地受体与供体发情 同期化,从而保证胚胎移植的成功进行。4.2 同期发情-定时输精是一项 经济有效的繁殖技术国外,已经普遍的推广应用,取得较好的效果 ,国内还处于起步和推广阶段。李启业等(2007)用宁波激素制品厂的促排三 号对奶牛进行诱导发情,得87.5%(n=16)的 受胎率。曹晓云等(2007)利用宁波激素制品有限公司 的促排三号和氯前列烯醇,采用Ovsynch程序 ,对黄牛进行同期发情和定时输精,得到 88.57%(31/35)的受胎率。姚国良(2008)利用宁波市三生药业有限公司的“生源” (GnRH)和“诱情素”(PG-Cl),采用Ovsynch程序,对 奶牛进行试验,情期受胎率为76.9%(n=143),显著高于 正常发情配种牛只的受胎率50.7% (n=106)。凌明湖等(2009,会议论文集)利用宁波市三生药业有限 公司的生源2+1(GnRH-PGs-GnRH),采用Ovsynch程序, 对不发情奶牛实验,得到50%的受胎率,高于2008年常规 配种的受胎率(43.9%);对屡配不孕的奶牛实验,得到 60%的受胎率,高于2008年常规配种的受胎率(43.9%)。综上,利用GnRH-PGs-GnRH的Ovsynch程序,可以获得较高 的受胎率(50%以上);并且成本低廉,每头奶牛3040 元左右的处理成本,是一项经济有效、使用方便的繁殖技 术。探讨:Ovsynch法的输精时间理论上讲,人工授精的最佳时机应在排卵前816h, Ovsynch法可控制排卵发生在GnRH二次处理后的36h内。所 以多数学者认为,在GnRH二次处理后1220h内人工授精 最好。Pursley等(1995)比较了GnRH二次处理后第0、8、16、 24、32h内人工授精的受胎率,结果表明,GnRH二次处理 后第16h实施人工授精后的受胎率(44%)最高,第32h人 工授精的受胎率最低。这可能是第32h实施人工授精时已发生排卵,待精子获能 后,卵子的受精能力已降低。所以他们认为,定时人工授 精应在二次处理后第16h实施最好。4.3 定时输精技术与兽医B超的 完美结合同期发情-定时输精技术可以获得较高的受胎率, 但仍有一些牛只卵泡发育不好,或者没有排卵,如 果盲目的就定时输精,势必造成冻精的浪费和配种 间隔的增大。利用兽医B超可以实时的检测卵巢和卵泡的发育情 况,并且在屏幕上显示出来,供多人判断,这克服 了传统上靠配种员一个人“摸”卵巢的局限性。在定时输精前,利用B超检测卵巢上卵泡的发育情 况,据此决定配种时机,可以提高受胎率。国产便携式兽医B超物有所值国产便携式兽医B超售价大约2万元(WED-3000),根据笔 者两年来的使用来看,可以达到进口B超的效果。举例说明,以一个1000头规模的奶牛场计算,科学的牛群 结构应有成母牛和适配牛700头左右,每头牛每天精饲料 和粗饲料的成本大约是30元。假定用B超和直肠检查进行妊娠诊断之间的差距按照30d计 算,那么B超诊断一头牛配种未孕的价值就是600元/次; 假定每年有300头牛发生这样的情况,那么一个千头规模 化奶牛场,利用B超进行早期妊娠诊断的所创造的价值不 少于18万元/年,相比于12万元的B超投资还是很有价值 的。4.4 定时输精技术与性控精液的结合使用性控精液可以大大提高产母犊的比例。性控精液与常规精液相比,产母犊率从自然状态下的50%提 高到92%左右。(刚才张场长已经论述了,后面刘博士还要 讲。)性控精液在青年母牛上具有更大的利用价值。青年母牛无产科疾病、受胎率更高。利用同期发情和定时 输精技术对体重达到360kg的青年牛进行同期发情,然后用 性控精液进行配种,可以得到较高受胎率。超排与性控精液的完美结合人工诱导雌性双胎 牛!使用激素诱导孪生双胎,使用性控精液输精,可以人工诱 导雌性双胎牛,大大提高繁殖效率。感谢聆听,请您提出宝贵意见!作者介绍:孙丽萍,女,2007年硕士毕业于四川农业大学 (211重点大学),现从事饲料配方和动物繁殖研究。QQ;359377587;电话:139 8601 8013 ; E-mail:xumufarmgmail.com*通讯作者:杨利国(1962),教授,博导,国家现代奶业 体系岗位科学家,全国畜牧业标准化委员会委员。Tel:027- 87281813;E-mail:yangliguo2006yahoo.com.cn 如需本课件,请到畜牧农庄网免费下载网址:www.xumufarm.com/bbs会议论文集:GnRH类似物及其在动物繁殖上的应用 。
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