实验 八 核糖核酸的组分鉴定一、实验目的掌握核糖核酸组分鉴定的原理。学会鉴定核糖核酸组分的方法。核糖核酸的组成成分主要包括核糖、磷酸和碱基。5533RNA含量为干菌体的2.67%10.0%， 二、实验原理2.在碱性环境下，嘌呤碱能与银离子反应形成沉淀，但此处碱性环境不能用一般的强碱，否则强碱会与银离子反应产生沉淀而干扰结果判定。3. 核糖核酸与浓盐酸共热时，会发生降解，形成的核糖继而转变成糠醛，后者可与3，5-二羟基甲苯（地衣酚）反应，在Fe3+或Cu2+催化下，生成绿色复合物。4. 磷酸组分可与定磷试剂在酸性环境中反应，生成蓝色物质。因此，可以根据以上性质，设计实验对各组分进行鉴定。 （1）1.5M硫酸；（2）0.1mol/L硝酸银溶液；（3）1mol/L浓氨水；（4）三氯化铁-浓盐酸溶液：（5）地衣酚-乙醇溶液：（6）定磷试剂：17%的硫酸，10%的抗坏血酸和2.5%的钼酸铵。三、 试剂1. 取100mg实验七中提取的酵母RNA，加入1.5M H2SO4 溶液5mL，在沸水浴中加热10-20分钟，使核酸充分 水解后，用于对各组分的鉴定。 2. 磷酸组分鉴定：取水解液1mL，加入干净的试管中 ，再加入等体积的新配制的定磷试剂1mL，混匀后 ，在45左右的水浴中加热15-30min，观察颜色变 化。四、 实验步骤3. 嘌呤碱的鉴定：取水解液1mL，加入干净的试管中，加入过量的浓氨水，再加入1mL的0.1M的硝酸银溶液，观察沉淀的生成。4. 核糖的鉴定：取水解液1mL，加入干净的试管中，再加入2mL三氯化铁-浓盐酸溶液和0.2mL苔黑酚-乙醇溶液，放置在沸水浴中加热10-30min，观察颜色变化。