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NanoDrop 2000 超微量分光光度计内容简介一. NanoDrop 2000超微量分光光度计(1)仪器描述及规格(2)检测原理及优点二.软件(1)使用前准备工作及软件操作界面介绍三.应用NanoDrop 2000分光 光度计可以检测0.5-2ul 的 样本,而且检测是非常高 的准确性和重复性。样本 保留系统应用了表面张力 来把样本保留在两根检测 光纤中间,这使得仪器可 以检测较高浓度的样本而 不用稀释。应用这个技术 ,NanoDrop 2000分光光 度计检测样本的最高浓度 是标准比色皿的200 倍。 样品臂检测基座一. NanoDrop 2000超微量分光光度计(1)仪器描述仪器类型: 分光光度计 最小样品量: 0.5ul 波长: 1mm(可以自动调整到0.05mm ) 光源: 氙闪烁灯 检测器类型: 2048象素线型硅CCD阵列 波长范围: 190840nm 波长准确性: 1 nm 光谱分辨率: 1.8nm 吸收光精确性: 0.002吸光值(1mm光程) 吸收光准确性: 2(257nm波长下,0.76个吸 光值) 吸光值范围: 0.02300(等同于10mm光程 时) 检测极限: 2ng/ul dsDNA 最大检测浓度: 15,000ng/ul(dsDNA) 检测时间: 5秒 仪器占地面积; 14cm20cm 重量: 2kg 样本基座材料: 303不锈钢以及石英光纤 工作电压; 12V 工作功率; 1218W(最大30W) 软件兼容性; Windows XP 和Vista(32bit仪器规格(2)检测原理利用表面张力保持样本形态的专利技 术进行检测。只需使用加样器将1ul的样 品直接加在检测表面上,而无需其他容 器或检测装置。使用两根光纤将样本拉 开,形成固定光程的检测通路,自动进 行检测。优点1.检测所需样微量,0.5-2ul,可以节省辛苦得到的 样品 2.检测范围宽,比传统的分光光度计的上限高200 倍,吸光度0.02-300,对于多数样品而言,无需 稀释 3.无需检测容器,日常消耗低,直接将样品加在检 测面上,检测完以后把检测表面擦干净即可,保 证样品间无交叉污染,也不干扰后续检测 4.全波长190-840nm,分辨率1nm,对于任何一个 样品的测量,仪器都自动给出全波长的扫描结果 190-840nm5.使用方便快速,1个样品只需5秒6.无需预热,直接测量二.软件(1)在使用仪器进行样品检测前,需要使用USB连接线 把仪器和电脑相连,把12V的电源线接到仪器背面的 插口上,并连接电源。任务栏工具栏功能选择使用NanoDrop 2000/2000c分光光度计可以方便的使用微量样品 进行紫外可见分光检测。NanoDrop 2000可以应用于如下检测 :12345678910111.核酸的浓度和质量 2.筛选有效的荧光标记杂 交探针 3.功能同普通的紫外-可见 分光光度计 4.检测细胞悬液的光散射 5.蛋白定量 6.蛋白定量(主要检测还有 还原剂或去污剂的总蛋白 含量) 7.检测非纯蛋白的浓度 8.蛋白的浓度和荧光染料 的浓度 9.蛋白A280检测 10.编辑新程序 11.蛋白定量(区别于5,测 试浓度较低)例:核酸Sample ID-输出样品名称 Type-DNA-50做dsDNA检测 ,RNA-40做RNA检测, ssDNA-33做单链DNA Conc-结果 A260显示10mm光程下的 260nm处的吸光值 A280显示10mm光程下的 280nm处的吸光值。 260/280260nm和280nm 处的吸光值的比值( DNA1.8RNA2.0)核酸浓度检测 1 在主菜单中选择核酸模式,如果显示波 长校准窗口,放 下基座臂点击OK。 2 选择检测的样品类型,默认的设定为 DNA-50。 3 选择浓度单位,默认的为ng/ul。 4 默认的校准波长为340nm,重新选择一 个校准波长或者 去选择Baseline来不选择校准波长。 5 选择Add to Report自动把检测结果添加 到当前报告中 去,默认设置是把每个样品都添加到报 告中。要把样 品数据保存到工作薄中,在检测前必须 选上Add to report。 6选择Overlay spectra可以在同一时间显 示多个光谱。 7使用合适的液体建立空白对照,空白对 照液体是溶解目标分子的液体。空白对 照液体的pH值和离子浓度应和检测样品 一样。注意: 1.每次检测的样品都必须是新加的。 2.使用干净的无尘纸擦干净上下基座 ,这样仪器就可以进行下一个样品 检测了。Oligo Calc 用来计算特定核酸序列的分子量,消光系数 ,浓度因子 要使用Oligo Calc: 1.使用如下方法来输入一个碱基序列: 使用碱基序列显示框下的按键。键盘(仅仅 能使用A,C,G,T,和U来输入碱基)复制 和粘贴一个序列到显示框(仅仅能使用A,C ,G,T,和U来输入碱基)清除碱基序列框 中的序列,点击序列框右侧的Clear键,单个 可以手动来删除。 2.选择磷酸化程度,可以选择:DNA单磷酸化, RNA单磷酸化和三磷酸化。 3.如果需要可以选择双链,互补的双链序列能够 包括在计算中。 4.在下拉框中,选择检测的核酸类型,默认的为 DNA。 5.如果要添加序列选择Modification并输入相关 的分子量。thanks
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