实验7 用生长谱法测定微生物 的营养要求 一、实验目的 学习并掌握用生长谱法测定微生物营养的基本原理和方法。 二、实验内容 用生长谱测定大肠杆菌和枯草杆菌所需要的碳源。 三、实验原理 为了使微生物生长繁殖，必须供给所需碳源、氮源 、无机盐、微量元素、生长因子等，如果缺少其中 一种该微生物便不能生长。根据这一特性，可将微 生物接种在一种只缺少其中某些营养物的完全适合 的琼脂培养基中，倒成平板，再将所缺的这种营养 物（如各种碳源）点植于平板上，经适温培养该营 养物便逐渐扩散于植点周围。该微生物若可利用或 需要此种营养物，便在这种营养物扩散处生长繁殖 ，微生物繁殖之处便出现圆形菌落圈，即生长图形 ，故此法为生长谱法。这种方法可以定性，定量地 测定微生物对各种营养物质（如碳源、氮源维生素）的需要，字微生物育种和营养缺陷型的鉴定中也用此法。 四、实验仪器、材料和用具 一)实验仪器 37恒温培养箱、1000ul取液器 二)微生物材料 大肠杆菌及枯草杆菌斜面。 三)培养基 合成培养基（详细配方见附录4.16） 加12ml 0.04%的溴甲酚紫（PH5.2-PH6.8，颜色由黄 色变紫色，作为指示剂）0.1Mpa灭菌20min。 四)试剂 分别放有小滤纸片的10%木糖，葡萄糖，半乳糖，麦 芽糖，蔗糖，乳糖无菌溶液，无菌生理盐水。五)实验用具 无菌平板，无菌镊子，无菌试管，无菌1000ul吸头，酒精灯。 五、实验步骤 将大肠杆菌斜面和枯草杆菌斜面用无菌生理盐水洗 下，制成菌悬液。 将合成培养基约20ml,熔化后冷却到50 左右加入 1000 ul大肠杆菌悬液，摇匀，立即倾注于直径为 90mm的无菌培养皿中，待冷却凝固后，在平板背 面用记号笔划分六个区，并标明要点植的各种糖类 ， 用无菌镊子，分别夹取6种糖中的滤纸片对号点植。 （注意防止交叉糖份污染） 倒置于37温箱培养18-24h，观察各种滤纸片周围 有无菌落圈。六结果与讨论 绘图表示生长情况。 根据实验结果，大肠杆菌和枯草杆菌所能利用的碳源各是什么？