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第35讲讲 细细胞工程最新考纲纲 1.植物的组织组织 培养()。2.动动物细细胞培养与体细细胞克隆()。3.细细胞融合与单单克隆抗体()。考点一 植物细细胞工程1.细细胞工程(1)操作水平:。(2)目的:按照人的意愿来改变细变细 胞内的 或获获得。细胞水平或细胞器水平遗传物质细胞产品2.植物细细胞的全能性(1)概念:具有某种生物全部的任何一个细细胞,都具有发发育成的潜能。(2)原理:细细胞内含有本物种的。(3)全能性表达条件:具有完整的细细胞结结构,处处于状态态,提供一定的和其他适宜外界条件。遗传信息完整生物体全部遗传信息离体营养、激素3.植物组织组织 培养技术术(1)原理:植物细细胞具有。(2)过过程:全能性人工种子脱分化再分化4.植物体细细胞杂杂交技术术(1)概念:将 的植物体细细胞,在一定条件下融合成,并把杂杂种细细胞培育成的技术术。(2)原理:体细细胞杂杂交利用了细细胞膜的,杂杂种细细胞培育成杂杂种植株利用了植物细细胞的。不同种杂种细胞新的植物体流动性全能性(3)过过程(4)意义义:克服不同种生物远缘杂远缘杂 交的性。纤维素酶和果胶原生质体 物理 PEG细细胞壁不亲亲和5.植物细细胞工程的实际应实际应 用(1)植物繁殖的新途径微型繁殖:用于快速繁殖优优良品种的植物组织组织 培养技术术。作物脱毒技术术:选选取作物 (如茎尖)进进行组织组织 培养,获获得脱毒苗的技术术。人工种子:以植物组织组织 培养得到的、不定芽、顶顶芽和腋芽等为为材料,经过经过 人工薄膜包装得到的种子。遗传遗传 特性无毒组织组织胚状体(2)作物新品种的培育单单倍体育种a.实质实质 :花药药离体培养过过程就是植物组织组织 培养过过程。c.优优点:后代不发发生性状分离,都是,能够稳够稳 定遗遗传传,明显显。单单倍体幼苗纯纯合子纯纯合子缩缩短了育种年限突变变体的利用:在植物组织组织 培养过过程中,由于培养细细胞一直处处于不断的分生状态态,因此容易受到培养条件和外界压压力(如射线线、化学物质质等)的影响而发发生突变变。从这这些产产生突变变的个体中可以筛选筛选 出对对人们们有用的突变变体,进进而培育成。(3)细细胞产产物的工厂化生产产细细胞产产物:蛋白质质、脂肪、糖类类、药药物、香料、生物碱等培养阶阶段:阶阶段技术术基础础:植物组织组织 培养技术术新品种愈伤组织伤组织(教材P40讨论题讨论题 解答)人工种皮是保证证包裹在其中的胚状体顺顺利生长长成小植株的关键键部分,请请探讨讨:人工种皮中应该应该 具有的有效成分是什么?为为了促进进胚状体的生长发长发 育,我们还们还 可以向人工种皮中加入哪些物质质?提示 针对针对 植物种类类和土壤等条件,在人工种子的包裹剂剂中还还可以加入适量的养分、无机盐盐、有机碳源以及农药农药 、抗生素、有益菌等。为为了促进进胚状体的生长发长发 育,还还可以向人工种皮中加入一些植物生长调节剂长调节剂 。1.(2013全国课标课标 卷,40)甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药药用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小组拟组拟 培育同时时含有A和B的新型药药用植物。回答下列问题问题 :(1)为为了培育该该新型药药用植物,可取甲和乙的叶片,先用_酶和_酶去除细细胞壁,获获得具有活力的_,再用化学诱导剂诱导诱导剂诱导 二者融合。形成的融合细细胞进进一步培养形成_组织组织 ,然后经过经过 _形成完整的杂杂种植株。这这种培育技术术称为为_。(2)上述杂杂种植株属于多倍体,多倍体是指_。假设设甲与乙有性杂杂交的后代是不育的,而上述杂杂种植株是可育的,造成这这种差异的原因是_。(3)这这种杂杂种植株可通过过制作人工种子的方法来大量繁殖。经经植物组织组织 培养得到的_等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。答案 (1)纤维纤维 素 果胶 原生质质体 愈伤伤 再分化(分化) 植物体细细胞杂杂交技术术 (2)体细细胞中含有三个或三个以上染色体组组的个体 在减数分裂过过程中,前者同源染色体联联会异常,而后者同源染色体联联会正常 (3)胚状体、不定芽、顶顶芽、腋芽2.(2016江西九江七校第一次联联考,29)根据下面植物体细细胞杂杂交技术术流程图图,回答相关问题问题 。(1)运用传统传统 有性杂杂交(即用番茄、马铃马铃 薯杂杂交)自然状态态下不能得到杂杂种植株,原因是_。(2)在利用杂杂种细细胞培育杂杂种植株的过过程中,依据的原理是_,其中过过程称为为_,植物体细细胞融合完成的标标志是_。(3)已知番茄、马铃马铃 薯分别为别为 四倍体、二倍体,则则“番茄马铃马铃薯”属于_倍体植株。(4)已知柴油树树种子含有的柴油是植物细细胞的代谢产谢产 物,可用植物组织组织 培养来实现实现 柴油的工业业化生产产。若利用此技术术,将柴油树细树细 胞培养到_阶阶段即可(填字母编编号)。(5)若培育抗虫棉,将抗虫基因通过过适当的途径导导入棉花受精卵,然后进进行组织组织 培养,该过该过 程相当于_(填字母编编号)。(6)人工种子是由发发育到_过过程(填字母编编号)的结结构包裹上人工种皮制备备的。答案 (1)不同种的植物存在生殖隔离(2)细细胞的全能性 原生质质体融合 产产生新的细细胞壁(3)六(4)e(5)(6)f1.植物组织组织 培养的关键键(1)条件:离体,一定营营养物质质,激素(生长长素、细细胞分裂素)等。(2)培养基状态态:固体培养基(需再分化生根培养基及生芽培养基)(3)体内细细胞未表现现全能性的原因:基因的表达具有选择选择 性。(4)光照的应应用脱分化阶阶段不需要给给予光照,再分化阶阶段需要给给予光照,以利于叶绿绿素的形成。2.植物激素在植物组织组织 培养中的作用生长长素/细细胞分裂素的比值值作用效果比值值高时时促进进根分化、抑制芽形成比值值低时时促进进芽分化、抑制根形成比值值适中促进进愈伤组织伤组织 形成3.杂杂种植物遗传遗传 物质质的变变化(1)遗传遗传 特性:杂杂种植株中含有两种植物的遗传遗传 物质质,故杂杂种植株具备备两种植物的遗传遗传 特性。(2)染色体组组数染色体组组数两种植物体细细胞内染色体组组数之和。植物体细细胞杂杂交形成的杂杂种植株,有几个染色体组组就称为为几倍体。若一植物细细胞含有2x条染色体,2个染色体组组,基因型为为Aabb,另一植物细细胞含有2y条染色体,2个染色体组组,基因型为为ccDd,则则新植株应为应为 异源四倍体,其体细细胞中染色体为为(2x2y)条,4个染色体组组,基因型为为AabbccDd。考点二 动动物细细胞工程1.动动物细细胞培养(1)地位:动动物细细胞工程常用的技术术手段有动动物细细胞培养、动动物细细胞核移植、 等。其中是其他动动物细细胞工程技术术的基础础。动动物细细胞融合动动物细细胞培养(2)培养过过程胰蛋白酶原代培养二氧化碳 培养箱胰蛋白酶传传代(3)培养条件营营养:除糖、氨基酸、促生长长因子、无机盐盐、微量元素之外通常还还需加入等一些天然成分。适宜的温度:36.5 0.5 ;适宜的pH:7.27.4。抗生素 培养液血清、血浆浆细细胞代谢谢2.动动物体细细胞克隆技术术(核移植技术术)(1)原理:。(2)核移植分类类: 移植和体细细胞核移植。(3)核移植过过程(以克隆高产产奶牛为为例)(4)应应用:加速家畜进进程,促进优进优 良畜群繁育。保护护。生产产医用蛋白。作为为异种移植的供体。用于组织组织 器官的移植。动动物细细胞核具有全能性胚胎细细胞核去核细细胞融合移植遗传遗传 改良濒濒危物种3.动动物细细胞融合和单单克隆抗体的制备备(1)动动物细细胞融合原理:。融合方法:聚乙二醇(PEG)、电电激等。意义义:突破了 的局限,使成为为可能,也为为制造开辟了新途径。细细胞膜的流动动性灭灭活的病毒有性杂杂交方法远缘杂远缘杂 交单单克隆抗体(2)单单克隆抗体制备过备过 程优优点:特异性强、 ,可大量制备备。用途:作为为;用于治疗疗疾病和 。杂杂交瘤细细胞能产产生所需抗体灵敏度高诊诊断试剂试剂运载药载药 物1.进进行核移植时时,为为何选选用去核的“卵母细细胞”?提示 选选用去核卵(母)细细胞的原因;卵(母)细细胞比较较大,容易操作;卵(母)细细胞细细胞质质多,营营养丰富,含有促进进核全能性表达的物质质。2.(教材P49讨论讨论 2解答)用于核移植的供体细细胞一般都选选用传传代10代以内的细细胞,想一想,这这是为为什么?提示 培养的动动物细细胞一般当传传代至1050代左右时时,部分细细胞核型可能会发发生变变化,其细细胞遗传遗传 物质质可能会发发生突变变,而10代以内的细细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此,在体细细胞核移植中,为为了保证证供体细细胞正常的遗传遗传 基础础,通常采用传传代10代以内的细细胞。3.图图中a、b分别为别为 骨髄瘤细细胞和已免疫的B淋巴细细胞,图图2为单为单克隆抗体制备备流程(顺顺序已被打乱)。请请思考图图1图图2解读读(1)针对图针对图 1为为了能充分发挥图发挥图 中两种细细胞各自的特点,经经特殊处处理,在促细细胞融合因子的作用下,两种细细胞发发生融合,形成图图中的d细细胞,d细细胞的特点是_。由d细细胞产产生的抗体与普通血清抗体相比较较,具有_等特点。(2)图图2中B注射的物质质是什么?其目的是什么?(3)在获获取C细细胞时时,曾筛选筛选 淘汰了哪些细细胞?(4)请请用箭头头把代表各图图解的字母按单单克隆抗体制备过备过 程的顺顺序连连接起来。提示 (1)既能无限增殖,又能产产生特定的抗体 特异性强、灵敏度高、并可大量制备备(2)特定抗原,刺激机体发发生免疫应应答,从而产产生效应应B淋巴细细胞(浆细浆细 胞)。(3)未融合的细细胞和同种细细胞融合后形成的细细胞(“BB”细细胞、“瘤瘤”细细胞)都会被淘汰,只有融合的杂杂交瘤细细胞(“B瘤”细细胞)才能生长长。(4)如图图所示: 1.(2016全国课标课标 卷,40)下图图表示通过过核移植等技术获术获 得某种克隆哺乳动动物(二倍体)的流程。回答下列问题问题 :(1)图图中A表示正常细细胞核,染色体数为为2n,则则其性染色体的组组成可为为_。过过程表示去除细细胞核,该过该过 程一般要在卵母细细胞培养至适当时时期再进进行,去核时时常采用_的方法。代表的过过程是_。(2)经过经过 多次传传代后,供体细细胞中_的稳稳定性会降低。因此,选选材时时必须须关注传传代次数。(3)若获获得的克隆动动物与供体动动物性状不完全相同,从遗传遗传 物质质的角度分析其原因是_。(4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样样,其他克隆动动物的成功获获得也证证明了_。解析 (1)提供体细细胞的供体可能为为雌性,也可能为为雄性,因此图图中A(正常细细胞核)的性染色体组组成为为XX或XY。常采用显显微操作去核法来去除卵母细细胞的细细胞核。过过程表示将早期胚胎移入受体,其过过程为为胚胎移植。(2)取供体动动物的体细细胞培养,一般选选用传传代10代以内的细细胞,因为为10代以内的细细胞一般能保持正常的二倍体核型,保证证了供体细细胞正常的遗传遗传 基础础。超过过10
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