本课件主要参考有关网上资源制作，因未能找到作 者，不能明确说明，特此致谢！离体小肠平滑肌的 生理特性v观察哺乳动物胃肠平滑肌的一般生理特性。v学习哺乳类动物离体器官灌流的一种方法。实验目的实验原理v哺乳动物消化管平滑肌具有肌组织共有的特性，如兴奋 性、传导性和收缩性等。但是消化道平滑肌肉有其特点 ，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性 、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等 。v将离体组织器官至于模拟体内环境的溶液中，可以在一 定时间内保持其功能。本实验以台氏液作灌流液，在体 外观察及记录家兔离体肠段的一般生理特性。v生理学实验中，常用的生理溶液有生理盐水、任氏 液(Rinne)、乐氏液(Locke)及台氏液(Tyrode)。这些 生理溶液是为了在进行离体器官或组织实验时，使 标本尽可能处于近似在体内的环境中，以保证其正 常的功能活动。而用于灌流组织的液体，其电解质 成分、晶体渗透压、pH、缓冲能力、温度及营养物 质应与组织液相近。实验材料v实验动物：家兔v器械、药品：电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能 器、生物机能实验系统、注射器、培养皿、温度 计、烧杯、螺丝夹、台氏液、0.01%去甲肾上腺 素、0.01%乙酰胆碱、阿托品。方法和步骤 1、标本制备流程 击昏家兔：用木槌猛击兔头枕部，使其昏迷。立即 剖开腹腔，找出胃幽门与十二指肠交界处，快速取 长2030cm的肠管，先将与该肠管相连的肠系膜沿 肠缘剪去，置于供氧台氏液中轻轻漂洗，把肠内容 物基本洗净。将肠管分成数段，每段长2-3cm，两 端各系一条线，保存于供氧的38左右的台氏液中 。2、仪器安装与调试实验安装v恒温水浴锅控制加热，恒温工作点定在38。将 充满氧气的道氏袋与通气钩相连接，将肠段一端 系在通气管钩上，另一端与张力换能器相连。控 制通气量，使氧气从通气管前端呈单个而不是成 串逸出。v仪器调试：选择“实验项目”中的“消化实验”选中“ 消化道平滑肌生理特性”。3、观察项目(附部分参考实验结果）v待标本稳定后，记录小肠平滑肌收缩的对照曲线 。停止供气1min，记录曲线变化。出现明显变化 后立即供气。v将药液管中的台氏液全部换成25度的台氏 液，观察变化。再更换38度台氏液，观察 有何反应。v同法将药液管中的台氏液全部换成45度的台 氏液，观察变化。再更换38度台氏液，观察 有何反应。4）记录对照肠段运动曲线后，加入2滴肾上 腺素(1：10 000)，观察并记录曲线变化。 5）记录对照肠段运动曲线后加入12滴乙酰 胆碱(1：100 000)，观察并记录曲线变化。6）记录对照肠段运动曲线后加入3滴阿脱 品后立即加入与前面同样剂量的乙酰胆碱 ，记录并观察曲线变化。注意事项v 实验过程中，台氏液应保持38，浴槽内液面高度应保 持恒定。v 通气管的气泡逸出速度不可太快，以单个气泡陆续出现 为宜。否则会影响肠段运动的曲线记录。v 每项实验效果明显后，立即更换新鲜台氏液，一般应冲 洗23次，待肠段恢复正常活动后再进行下一项目。 v 放大器零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线。 结论v消化道平滑肌具有自律性，但其收缩缓慢，节 律性不规则。v消化道平滑肌具有一定的紧张性。v消化道平滑肌的活动易受温度、pH值及其它化 学因素、药物因素的影响。实验讨论（参考）v正常情况下，我们观察到离体小肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓 慢地收缩，但其节律性很不规则。v小肠平滑肌自律性产生的离子基础尚未完全清楚。目前认为， 它的产 生可能与细胞膜上生电性钠泵的活动具有波动性有关，当钠泵的活动 暂时受抑制时，膜便发生去极化；当钠泵活动恢复时，膜的极化加强 ，膜电位便又回到原来的水平。v在浴槽中加入0.01%乙酰胆碱 （Ach ）2滴（约0.2ml ）后，可见离体肠管活动增强，描记曲线出现收缩频 率变快，幅度增加。出现上述现象的机理，目前认为 与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+ 的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合，使得 两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另 一类为特异性受体活化Ca2+ 专用通道。前一类通道对 Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach 相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通 道开放都使得肌浆中 Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白 肌凝蛋白ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。v在浴槽中加入0.01%肾上腺素2滴（约0.2ml）后，可见离体肠管活动 减弱，描记曲线出现收缩频率变慢，幅度减小以及基线下移。出现 上述现象的机理，目前认为与肠肌细胞膜上存在和两种受体，受 体又分为抑制型受体和兴奋型受体有关。肾上腺素作用于抑制型 受体，引起肠肌膜上一种特异性受体活化，使K+外流增多，细胞膜 发生超极化，肠肌兴奋性降低，肌张力下降。同时，肾上腺素还作 用于受体，它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增 多， cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动，使肌浆中Ca2+浓度降低 ，亦使肌张力降低； 受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加，加 速膜的超极化，促进了肠肌肌张力的减低。v浸浴小肠肠管的台氏液温度以3840为宜，低于或高 于这个温度，都会影响结果。因为肠管平滑肌对温度改 变极为敏感，当温度降到30以下时，由于代谢水平的 降低，兴奋性减弱，可出现收缩曲线基线下移，频率变 慢，收缩幅度变小。有时可能会见到基线先上移后下降 的现象。这是因为降温本身对肠管是一种刺 激，也可短 暂地加强代谢活动，所以肌张力升高。当温度高于40 时，由于酶活性提高，各离子通道活性增加，使得基线 上移，收缩频率增高，幅度增加。当然， 如果台氏液温 度过高（50以上），可因蛋白变性，使肠管收缩功能 消失。