实验五 果蝇二对因子的自由组合指导老师：王桔红 陈晓芸1一. 实验目的 了解两对基因的杂交方法 记录交配结果和掌握统计处理方法 正确认识二对基因自由组合的原理2二. 实验原理位于非同源染色体上的两对基因，它们所决定的两对相对性状在杂种第二代是自由组合的。因为根据孟德尔第二定律，一对基因的分离与另一对(或另几对)基因的分离是独立的，所以一对基因所决定的性状在杂种第二代是3：1之比，而两对不相互连锁的基因所决定的性状在杂种第二代就呈9：3：3：1之比。3三. 实验材料、器具及试剂1.实验材料：残翅果蝇（VgVg/+）、黑檀体果蝇（+/ee） vg的座位是第二染色体67.0，e的座位是第三染色体70.7。2.器具：麻醉瓶、白瓷板，海绵，放大镜，毛笔，镊子，培养瓶。3. 药品：乙醚，玉米粉，琼脂，蔗糖酵母粉，苯甲酸。4四、实验步骤1.正交：P 残翅 黑檀体 vgvg+ +eeVg+ +e+ + vg e去亲本 78天基因型配子F1 基因型F1 表现型 野生型5野生型 野生型 + + + + Vg e vg e 去亲本78天F1 代自交F2 基因型F2+ + evg +vg e+ + + + + + + e+ + vg + + vg e+ e+ + + e+ e + evg + + evg e + evg + + vg + e vg +vg + vg +vg e vg +vge+ + vge+ e vg evg + vg evg e vg eF2表型比例为 9（野生型）:3(残翅):3（黑檀体）:1(残翅黑檀体)62.反交与正交不同之处在于亲本： P 黑檀体残翅 ，以下步骤相同。7五、实验结果与分析观观察结结果 统计时间统计时间正交：残翅 黑檀体反交：黑檀体 残翅长长灰长长黑残灰残黑长长灰长长黑残灰残黑合计计F1表型统计正反交的表型间是否有差异：8观观察结结果 统计时统计时 间间正交：残翅 黑檀体反交：黑檀体 残翅长长灰长长黑残灰残黑长长灰长长黑残灰残黑合计计F2表型统计 正反交的表型间是否有差异：9将正反交实验中相同表型的个体数目累加起来， 用X2测验观察数与理论数符合程度：长长灰长长黑残灰残黑合计计实验观实验观 察数（ O）理论论数9:3:3:1 （C）偏差 （O-C）（O-C）2/C10k表示子代表型数。自由度df= k-1 = X2= (O-C) 2C(查表得出P值，若P 0.05，说明“差异不显著”，实验值 与理论值相符合，即实验符合二对因子自由组合的假说。若 P 0.05，说明“差异显著”，实际值与理论值不符合，即实 验数据不能用二对因子的自由组合来解释。若P 0.01说明 “差异极显著”。)结论：P ,观察值与期望值之间的差异 （不 显著/显著/极显著），实验结果 （符合/不符合）9 ：3：3：3：1的分离比。11