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实验四 硅胶薄层层 析 n掌握薄层硬板的制备方法。n掌握薄层色谱的一般操作方法。n了解薄层色谱在中药分析中的应用。目的仪器与试剂n双槽层析缸n玻璃板1020 cm(厚3mm)n毛细管0.5mmn研钵n电吹风n天平(0.1mg)n硅胶G(薄层层析用)n生药当归、丹参n层开剂:正已烷:乙酸乙酯(:)硅胶G薄层板的制备:称取硅胶G 10g和0.5%的羧甲基纤维素钠溶液30ml在研钵中向一方向研磨混匀,去除表面的气泡后,在玻璃板上平稳移动进行涂布铺好后于室温下,置水平台上晾干,在反射光和透射光下检视,表面应均匀,平整,无麻点,无气泡,无损坏及污染,于110烘30min,冷却后立即使用或置于干燥箱中备用。注意:两人做三块薄层板!硅胶G薄层板的制备(已完成)样品的制备当归、丹参各2g,分别加10ml乙 醇,置于50ml锥形瓶中超声振 荡10分钟,取上清液点样用毛细管吸取上述二种溶液各10l,分别点于 同一硅胶G薄层板上。1.点样一般为圆点,点样基线距底边cm2.点样直径一般不大于2mm3.点间距离大于0.8cm 4.点样时必须注意勿损伤薄层表面。展开点好样的薄层板放入展开缸的展开剂中,以正 已烷:乙酸乙酯(9:1)20ml为展开剂,浸入 展开剂的深度为距原点5mm为宜,密封,待 展开至6-8cm,取出薄层板,晾干,用电吹风 热风吹薄层板,至有斑点出现观察记录 日光下紫外分析仪点样层析7cm2cmn画展开后的层析图并记算各斑点的Rf值 Rf值斑点到原点的距离原点到溶剂前沿的距离思考题n1.影响吸附薄层色谱Rf值的因素有哪些?n2.薄层板的主要显色方法有哪些?
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