血清尿素氮的测定目的要求 n了解血清尿素氮测定的方法及 临床意义。n复习尿素的生成机理及其意义 。实验原理 n血清（或血浆）中的尿素，在尿素氮试剂的酸性环境中与二乙酰-肟（DAM）共沸后，可缩合成一红色化合物，称为fearon反应。其颜色的深浅与血清（或血浆）中尿素的含量成正比，与同样处理的尿素氮标准液比色，即可测算出血清（或血浆）中尿素氮的含量。 实验材料 n1.器材 刻度吸管（0.1ml、 2ml、10ml） 恒温水浴箱 分光光度计n2.试剂 n（1）待测血浆 n（2）尿素氮试剂 n（3）二乙酰-肟试剂 n（4）尿素氮标准液 操作步骤 n取试管三支按下表操作 试管试剂（ml） 测定管 标准管 空白管 1：4稀释血清（或血浆） 0.1 尿素氮标准液（ 0.02mg/ml） 0.1 蒸馏水 0.1 二乙酰-肟 0.5 0.5 0.5 尿素氮试剂 5.0 5.0 5.0 混匀，置沸水浴中加热15min，立即用自来水冷却5分钟 。分光光度计选用540nm波长，以空白管调零点，读取 各管吸光度。计算及结果分析n尿素（mg%）= 尿素氮标准液浓度*5(mg/ml；mg/100ml)测定管吸光度标准管吸光度注意事项 n1. 此法灵敏度高，用量极微（一般只需 0.02ml血清即可）。本实验是先将血清用 生理水以1：4加以稀释再取0.1ml，故最 后计算时，应乘以稀释倍数“5”n2. 试剂中加入硫胺脲和镉离子，可增进显 色强度和色泽稳定性，但仍有轻度褪色现 象（小于5%/h）。n3. 此法操作简单，特异性强，不受其他非 蛋白质含氮化合物如尿酸、肌酸等影响， 但应控制好实验条件。n4. 吸管必须校正，使用时务必注意清洁干 净，加量务必准确。n5.尿液中的尿素氮也可用此法进行测定。 由于尿液中尿素氮含量高，标本需用蒸馏 水以1:50稀释。如果呈色后吸光度仍超过 本法的线性范围，还需将尿液再稀释，重 新测定。思考题 n血清尿素氮测定的方法及临床 意义。