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紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案细菌感染的病原学检查赵一鸣 2015.1.5紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案第一节 标本的采集和处理原则一、标本采集的一般原则1.早期采集2.无菌采集 n无菌部位:严格无菌操作n有正常菌群部位:明确目的菌;选择合适的 选择培养基紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案3.采用不同方法采集n需氧菌或兼性厌氧菌n厌氧菌:穿刺法采集 4.采集适量标本和适当标本n采集有明显病变的标本n根据病程采集不同的临床标本 5.安全采集紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案二、标本的处理 1.及时送检 2.运送与保存1)根据待检菌特点对标本进行冷藏、保温或保持厌氧状态2)注意安全防护紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案第二节 细菌形态学检查显微镜种类 1.普通光学显微镜(light microscope)光源:可见光 2. 暗视野显微镜( darkfield microscope )暗背景,菌体发光n用于检查不染色的活细菌和螺旋体的形态及运 动观察紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案3. 相差显微镜 n检查不染色活细菌的形态及某些内部结构 4. 荧光显微镜光源:100W200W的高压汞灯 5. 电子显微镜 n透射电镜:观察细菌内部超微结构n扫描电镜:对细菌表面结构及附件观察 紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(一)常用染料 1. 碱性染料n电离后色基带正电荷n细菌染色常用,如美蓝、结晶紫、碱性复红等 2. 酸性染料n用于细胞浆染色,如伊红、酸性复红、刚果红紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案3. 复合染料(中性染料)n碱性染料与酸性染料的复合物,如瑞氏染料 、姬姆萨染料等4. 单纯染料n如苏丹染料,溶于脂肪溶剂,不溶于水,化 学亲和力低紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(二)常用的细菌染色法n单染色法只用一种染料,如吕氏美蓝n复染色法用两种或两种以上不同颜色的染料紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案细菌染色的一般程序1. 涂片 2. 干燥:自然干燥为好 3. 固定 4. 初染 5. 媒染 媒染剂 6. 脱色 脱色剂 7. 复染紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案1. 革兰染色法(Gram stain) (1)原理 1)细胞壁学说:两种细菌细胞壁通透性不同 (2)方法:制片结晶紫初染碘液媒染 酒精脱色复红复染结果革兰阳性菌G:紫色革兰阴性菌G:红色紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(3)影响染色结果的因素 1)操作技术:涂片和脱色 2)染色液: 3)细菌:1824h培养物为好 (4)意义: 1)鉴别细菌 2)选择药物 3)与致病性有关紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案2. 抗酸染色法细菌着色后不被盐酸酒精脱色的染色方法 染料:石炭酸复红、盐酸酒精、美蓝 方法 初染:5%石炭酸复红加热染色5min脱色:3%盐酸酒精复染:吕氏美蓝紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案3.荧光染色 4.特殊染色法n细胞壁染色、荚膜染色、芽胞染色、 鞭毛染色 、异染颗粒染色5.负染法 背景着色 紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案肺炎链球菌荚膜染色 墨汁负染法芽胞染色紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案第三节 细菌分离培养和鉴定一、培养基的种类和选择 培养基(culture medium)由人工方法配制而成的,专供微生物 生长繁殖使用的混合营养物制品。紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(一)培养基的组成成分1. 营养物质 碳源、氮源、无机盐、水、生长因子 (1)蛋白胨 提供氮源植物胨: 大豆动物胨:牛肉、动物组织等 (2)肉浸液 碳源、氮源 (3)牛肉膏 氮源 (4)糖(醇)类 碳源和能源紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(5)血液 提供特殊生长因子、观察溶血 (6)无机盐类 常用元素:P、S、K、Na、Mg、Ca、Fe等 微量元素:Co、Zn、Mn、Cu、Mu等 (7)鸡蛋与动物血清用于某些特殊培养基 (8)生长因子维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案2.凝固物质 即赋形剂 (1)琼脂 (2)明胶 动物胶原组织熬制而成 3. 抑制剂和指示剂 (1)抑制剂:胆盐、煌绿、染料、抗生素等 选择培养基:加入一定种类的抑制剂,以抑 制杂菌生长或减少生长,有利于检出菌生长 的培养基。 (2)指示剂: 酚红、中性红、中国蓝等鉴别培养基:加入特定底物和指示剂紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(二)培养基的种类1.按培养基的物理性状 (1)液体培养基:增菌(2)固体培养基:纯化,增菌(3) 半固体培养基:动力检测,保种紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案液体培养基液体培养基 固体斜面培养基固体斜面培养基 半固体培养基半固体培养基紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案2. 按营养成分和用途分类(1)基础培养基:只有基本营养成分(2)营养培养基:加有血液 、血清等(3)鉴别培养基:含有特定底物和指示剂(4)选择培养基:含有抑制剂(5)特殊培养基:厌氧、细菌L型紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(三)培养基的选择1.血平板 最常用 2.巧克力血平板 奈瑟菌属、流感嗜血杆菌 3.肠道选择培养基 分离肠道细菌常用中国蓝、EMB、MAC、SS 4.碱性琼脂或TCBS 分离霍乱弧菌 5.血液增菌培养基 血液、骨髓增菌用 6.营养肉汤 增菌用紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(四)培养基的制备1. 常用各种器具灭菌前的准备 (1)培养皿:用纸包裹 (2)试管:加塞后用纸包好 (3)吸管和毛细管 (4)烧瓶紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案2. 培养基制备的一般程序(1)调配 根据培养基组成,准确称取各组分,先加需要蒸 馏水的一部分,再加培养基干粉,最后补足水量 。 (2)溶化 液体培养基不需加热 (3)调整pH值 一般7.27.6 (4)过滤澄清(一般可以省略)n液体培养基: 滤纸n固体培养基: 纱布 紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(5)分装 n平板:灭菌后冷却至50 60时倾倒90mm 2530ml(4mm):药敏用90mm 1315ml(3mm):培养用n琼脂斜面:分装量为试管的1/41/3,灭菌后 趁热制成斜面,斜面长度2/3n高层、半固体、液体:分装量为试管长度 1/42/3紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案( 6)灭菌n高压蒸汽灭菌 n无糖:103.4kPa 121.31530minn含糖: 68.4kPa 115 15minn流动蒸汽灭菌法血清、牛乳、鸡蛋n间歇蒸汽灭菌法紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(7)鉴定n无菌试验:将制好的培养基在35孵育过 夜,判定是否灭菌合格。n效果检查:按不同的培养要求,接种相应菌 种,观察细菌的生长状况,判断培养基是否 符合要求。 (8)保存4 冰箱保存,一周左右紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案注意事项1. 器皿 中性硬质玻璃器皿 2. 化学药品 化学纯以上 3. 准确称量,正确溶解 4. 准确测定培养基酸碱度 5. 保持澄清 6. 灭菌时间不宜过长,不宜反复灭菌紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案二、分离培养(一)细菌的分离 1.无菌技术 是防止微生物进入物品和机体,同时防止 被检物中可能存在的病原微生物污染周围 环境及工作人员的规范化操作技术。 2.操作要点 左手负责持平皿、试管等物品 右手持接种工具取菌并划种紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案3.常用的接种方法(1)平板划线法n分区划线法 用于杂菌量较多的标本n连续划线法 用于杂菌不多的标本 (2)琼脂斜面接种法纯培养 (3)穿刺法观察细菌动力 (4)液体培养基接种法 增菌 (5)倾注平板法计数细菌数量 (6)涂布法 纸片法药敏试验紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(二)细菌的培养方法1.需氧培养法 普通培养 2.二氧化碳培养 (1)二氧化碳培养箱 (2)烛缸法 (3)化学法 3.厌氧培养紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(三)细菌的生长现象1.固体培养基上的生长现象n菌落:单个细菌在培养基上分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团。n细菌菌落的描述 大小、形状、突起或扁平、边缘、颜色、表面、透明度紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案(1)光滑型菌落(S型菌落) 表面光滑、湿润、边缘整齐 (2)粗糙型菌落(R型菌落) 表面粗糙、干燥、边缘不齐 (3)粘液型菌落(M型菌落) 菌落粘稠、有光泽、似水珠样紫荆电影院成都校园营销策划推广方案海报设计培训精品教程海马M5新车试驾品鉴会活动策划方案海南第一车展策划案卷发样菌落
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