实验二花粉生活力的测定一 实验目的 掌握花粉生活力鉴定的方法和原理二 实验材料 羽衣甘蓝、矮牵牛、三色堇等植物的花粉三 仪器及药品 载玻片、盖玻片、解剖针、镊子、标签、记号笔、显微镜、天平、烧杯、培养 皿、玻璃棒、滴管、量筒、电炉、石棉网、烘箱 蔗糖、琼脂、蒸馏水、磷酸二氢钾、磷酸二钠、TTC 四 实验原理 花粉的形态、花粉中酶的活性以及积累淀粉的多少通常与其生活力密切相关， 因此可利用花粉的形态观察过氧化物酶、脱氢酶活性的高低、 淀粉的含量以及在 人工培养基上花粉管萌发的情况作为鉴定花粉生活力高低的标准。 鉴定花粉生活力的方法很多，主要有 1 直接鉴定法2 形态观察法3 染色观察法4 培养基发芽法五 实验步骤 花粉生活力的测定 染色观察法 TTC 染色 1 配置 TTC 染色液，称取 0.5gTTC 溶于 100ml 磷酸盐缓冲液中， 装入棕色 瓶 2 制片：取少量花粉于载玻片上， 滴入 12 滴 0.5%TTC 染色液，用镊子搅 拌均匀，盖上盖玻片，于3540C 条件静置 1520min。 3 观察统计：在显微镜下观察三个不同视野。凡被染成红色或玫瑰色都是 有生活力的花粉 . 培养基发芽法固体培养基 1 配制培养法：取 1g 琼脂，5g 蔗糖，量 94ml 蒸馏水，装入烧杯，加热使琼脂 溶化，配成 5%浓度培养基。同法配置10%、15%、20%浓度的培养基。 2 制片：用滴管吸取少量培养基，趁热滴在载玻片上，使放置凝固。 3 播种花粉：少量的花粉均匀撒播 4 培养与观察：将制好的片子放在垫有湿润滤纸的培养皿内，于2022温箱 中培养。待花粉萌发后于显微镜下观察，并统计发芽率， 观察是每片随机取三个 视野，统计花粉总数，计算平均发芽率。六 作业及思考题花 粉 来 源花 粉 总 数红 色黄 色生 活 力花 粉 总 数红 色黄 色生 活 力花 粉 总 数红 色黄 色生 活 力羽 衣 甘 蓝 三 色 堇花粉来 源培养基 浓度1 2 3 平均生 活力 （%）发芽数 /总数发芽率发芽数 /总数发芽率发芽数 /总数发芽率羽衣甘 蓝5% 10% 15% 20% 三色堇5% 10% 0 0 0 0 0 0 0 15% 0 0 0 0 0 0 0 20% 0 0 0 0 0 0 0 比较不同方法，不同浓度， （培养基法）测得的花粉生活力的高低，分析原因 同种植物材料培养基法测得的花粉生活力较低染色法测得的花粉生活力较高 原因：因为用染色法时， 只要是有活力的花粉粒就会被染上颜色，而有活力的花 粉粒却不一定会萌发。