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2018/9/4,该资料由764723079友情提供,基因工程,专题1,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,基因工程,又叫DNA重组技术。是指按照人们的愿望,在DNA分子水平上进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。,基因工程的概念,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,视频: 热推视频 转基因的前世今生!(3)-安全,http:/v.17173.com/v_102_616/OTc3MjMxMg.html,http:/v.17173.com/v_102_616/NjkyOTY2Mg.html,视频: 解析转基因的秘密【上,http:/v.ifeng.com/news/society/201306/658f20c3-c701-4e82-b559-064b3ea07e79.shtml,20130607世界看中国 :转基因食品,http:/news.sina.com.cn/c/2014-04-01/025429835754.shtml,海南证实现非法转基因作物 9个试验作物被销毁,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,G,1,2,3,4,5,A,3,5-磷酸二酯键,3端,5端,3端,5端,3,5,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,1、限制性核酸内切酶,一种限制性内切酶只能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开(切割DNA分子),来源:主要从原核细胞分离 作用:,作用结果:,EcoRI,平未端 和 粘性未端,1.1、 DNA重组技术的基本工具,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,限制酶的识别序列,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,黏性末端,黏性末端,EcoRI限制酶的切割,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,平末端 平末端,SmaI限制酶的切割,当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,黏性末端,练习使用EcoRI剪切目的基因,模型构建3,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来,DNA连接酶的缝合作用,注意:DNA连接酶可连接双链DNA中的DNA单链缺口,但不能连接单链DNA!,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,DNA连接酶的缝合作用,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,1.连接酶的作用:,用DNA连接酶连接两个相同的黏性未端要连接几个磷酸二酯键?,2.连接的部位:,2.DNA连接酶-分子缝合针,3.种类(比较),将互补配对的两个黏性末端连接起来, 使两个DNA片段成为一个完整的DNA分子。,磷酸二酯键,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?,1)只能将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上,形成磷酸二酯键,形成磷酸二酯键,1)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,2)以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接成一条互补的DNA链,2)将DNA双链上的两个缺口同时连接起来,不需要模板,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,DNA1,重组DNA,练习使用DNA连接酶制作重组DNA分子,模型构建4,由于切割后的载体和目的基因具有相同的末端,故重组DNA存在3中可能连接。即 、 、 。,重组DNA一定是载体-目的基因连接吗?,载体-目的基因,载体-载体,目的基因-目的基因,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,1.要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性(平)末端?要切两个切口,产生四个黏性(平)末端。 2.把两种来源不同的DNA用同种限制酶来切割,产生的末端相同吗?会产生相同的黏性(平)末端 3.如果把具有相同黏性(平)末端的DNA连接起来,又会怎样呢? 得到重组DNA,2018/9/4,该资料由764723079友情提供,5.如图,就下列与核酸相关酶的作用机理填空: 限制酶 解旋酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶,A.切断a处的酶为_ B.连接a处的酶为_ C.切断b处的酶为_ D.连接b处的酶为_,无,
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