1,赵庆彦武汉大学人民医院心内科,刺激迷走神经对心房肌电生理 影响的机制研究,2,迷走神经或乙酰胆碱和房颤的关系迷走神经张力升高或刺激胆碱能受体能诱发和维持房颤发生 刺激迷走神经诱发房颤的机制主要是心房有效不应期离散升高和折返的发生,研究背景,3,研究背景,迷走神经刺激,M2 受体,ACh,G 蛋白,IKACh,外向 K+ 电流,4,研究背景,犬和人的心房肌也分布有M3和M4受体亚型 M3和M4受体激活的IKM3和IK4AP也与动作电位时程（APD）缩短和房颤的诱发有关,5,研究目的,观察心房肌外膜APD的变化来探讨AF诱发的机制,迷走神经刺激,乙酰胆碱灌注,6,研究目的,用Western-blot检测M2、M3和M4受体蛋白在心房不同部位的分布,7,试验方法,成年杂种犬10只，体重15-21 kg,戊巴比妥钠30 mgkg腹腔麻醉,气管插管,人工通气 经胸骨行正中开胸术，切开心包暴露心脏，缝制心包吊床,8,实验方法,6根包被有聚四氟乙烯的银针,右心耳 (RAA),高位右心房 (HRA),低位右心房 (LRA),左心耳 (LAA),高位左心房 (HLA),低位左心房 (LLA),9,实验方法,迷走神经干切断迷走神经刺激乙酰胆碱灌注,10,实验方法,心房早搏, AT, AFAPD50APD90dAPD,11,实验方法,分组,对照组VNS 组ACh 灌注组,12,实验方法,Western Blot 分析,电生理监测后，迅速取出心脏，分别取左心耳、右心耳、左房后壁和右房游离壁M2、M3、M4 受体检测,13,统计学分析,实验数据以均数标准差表示，数据用SPSS软件分析，采用t检验和方差分析统计结果，以P 0.05为差异有显著性,14,结果,对照组有2例诱发房早，无一例诱发出房速和房颤 VNS组10只犬全部诱发房早，3例诱发房速，7例诱发房颤 ACh灌注组10只犬全部诱发房早，4例诱发房速，6例诱发房颤,15,结果,APD50(ms),心房肌外膜的不同部位在不同情况下APD50变化,16,结果,APD90(ms),心房肌外膜的不同部位在不同情况下APD90变化,17,结果,dAPD(ms),心房肌外膜在不同情况下dAPD的变化,18,LLA,HLA,LAA,RAA,HRA,LRA,对照组VS组ACh 灌注组记录MAP图形的比较,19,结果,LAA RAA LA RA(83kDa),Arbitrary Unit, P 0.05 vs RA; P 0.05 vs LA,LAA RAA LA RA,20,结果,LAA RAA LA RA(105kDa),Arbitrary Unit, P 0.05 vs LA and RA,LAA RAA LA RA,21,结果,LAA RAA LA RA(70kDa),Arbitrary Unit, P 0.05 vs LA and RA,LAA RAA LA RA,22,讨论,正常犬的心房肌存在APD和AERP的离散，这种 本身的不同可能是导致房颤发生的驱动因素 充血性心衰犬模型发现M3受体蛋白和其激活的 IKM3通道均明显升高，M2和M4受体蛋白表达下 降，他认为充血性心衰易发生房颤的原因与此 M受体亚型的重构有关,23,讨论,VNS和ACh灌注都可以明显缩短APD和升高dAPD, dAPD90在VNS和ACh灌注存在差异可能迷走神经与M受体的分布不同,电刺激正常犬右心耳不能诱发房颤，在VNS或 Ach灌注下能明显诱发房颤,24,讨论,M2和M3在心房和心耳的分布都是在左右心耳分布最高，其次是左心房和右心房而且左心房比右心房高.M受体分布的不同可能是VNS诱发房颤的原因APD 在左右心房外膜没有明显差异,25,