第第 11 课时课时 专题复习专题复习一、菊花茎的组织培养与月季花药培养技术的异同菊花茎的组织培养月季花药培养 外植体细胞类型 _细胞_细胞 培养结果_植株_植株不同 点光的要求每日照射 12 h幼苗形成后才需要光照相同点二者都是快速、大量繁殖花卉的技术手段，理论依据、 培养基的配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同 另外，花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花药；花药裂开后释放出的 愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基；花药培养对培养基配方的要求更为严格。这些都 使花药培养的难度加大。 训练 1 关于花药培养技术与植物组织培养技术的不同，下列说法不正确的是( ) A花药培养需时期适宜的花蕾 B花药培养对培养基配方的要求更为严格 C培养基配制方法不同 D花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体要及时更换培养基 训练 2 在花药的培养过程中，应当注意的问题是( ) A如果花药开裂长出愈伤组织，使其在原培养基上培养即可 B如果花药开裂释放出胚状体，应尽快将其分开，分别移植到新的培养基上培养 C如果花药开裂释放出胚状体，使其在原培养基上培养即可 D在花药培养的整个过程中，都必须给予光照 二、植物组织培养中污染的预防 污染就是指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育， 从而导致培养失败的现象。植物组织培养不同于扦插、分叶、分根、叶插等常规无性繁殖。 由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件的要求较高，对无 菌操作的要求非常严格。 1污染有两种类型 (1)细菌污染。菌斑呈黏液状，界限比较明显，一般接种后 12 天即能发现。主要是 大肠杆菌和链球菌。一般是由接种人员造成的。(2)真菌污染。菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子，接种后 310 天才能发现。主要是霉菌污染，可能是植物材料灭菌不当造成的。 2可以通过以下措施做好预防 (1)防止_带菌。选择好外植体采集时期和采集部位。外植体采集以春秋为宜， 优先选择地上部分作为外植体，阴雨天勿采，晴天下午采，采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑 料袋。在室内或无菌条件下进行预培养。外植体严格灭菌。做灭菌效果试验，多次灭 菌和交替灭菌。 (2)保证_及_彻底灭菌。分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿 粘瓶口。检查封口膜是否有破损。扎瓶口要位置适当、松紧适宜。保证灭菌时间和 高压锅内温度。接种工具用前彻底灭菌。工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热 灭菌。 (3)操作人员严格遵守_规程。如一定要规范着装，操作过程中不说话等。 (4)保证_与_环境清洁。污染瓶经高压灭菌后再清洁。接种环境定 期熏蒸消毒、紫外灯照射或用臭氧灭菌和消毒。定期对培养室消毒、防止高温。 特别提醒 对外植体进行表面消毒时，既要考虑到药剂的消毒效果，又要考虑到植物的耐受力。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。消毒用过的有毒药品应收集后统一交给有关专业部门处理，以免引起环境污染。一旦发现培养材料被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将所有被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽灭菌锅中灭菌后，再打开培养瓶进行清洗。训练 3 外植体接种前，需要将接种室、接种箱灭菌并对外植体消毒。某同学依次进 行了如下操作，你认为合理的操作步骤依次是( ) 接种前一天，将接种室的四个角用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸 将接种室和接种箱 内 用紫外灯灭菌 接种前，操作者用肥皂清洗双手并擦干，再用酒精棉球擦拭双手 接种前 1 h，在接种室内用喷雾器喷洒来苏水；桌椅也用来苏水擦拭；接种箱内用甲醛溶液 和高锰酸钾熏蒸 用次氯酸钙溶液将外植体消毒 A B C D 训练 4 无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键，以下说法正确的是( ) 由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对无菌操作的要求非常严格 对培养基及器械用高压蒸汽灭菌 对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑药剂的 消毒效果，另一方面还要考虑植物材料的耐受能力 不同药剂、不同植物材料甚至不同 器官要区别对待 对培养材料可用高压蒸汽灭菌 如果不小心导致污染，将可能造成 培养工作的前功尽弃 A B C D 三、外源激素的种类和浓度 常用于植物组织培 养的植物激素有两大类：_类和_类。 生长素类的主要作用是重新启动有丝分裂，使已停止分裂的植物细胞恢复分裂能力。 常用的生长素类似物有 2,4二氯苯氧乙酸(2,4D)、萘乙酸(NNA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚 丁酸(IBA)等。植物生长素通常被用来诱导_形成及增殖。不同植物种类对生长 素的浓度反应不同，对多数植物材料的离体培养而言，2,4D 是生长素类中诱导愈伤组织 形成和实现细胞悬浮培养的最有效的物质，常用浓度为 0.22.0 mg/L，较高浓度的 2,4D 溶液对组织培养中再生芽和再生根的诱导非常有效。植物的生根多数是用生长素单 独实现的。适宜浓度的脱落酸可抑制不正常胚状体的形成，防止胚状体过早萌发。 细胞分裂素类的主要作用是_，能使茎增粗，但抑制茎伸长， 诱导芽的分化，促进侧芽萌发生长。常用的细胞分裂素有激动素(KT)、6苄基嘌呤 (6BA)、玉米素(ZT)等。细胞分裂素在诱导愈伤组织时，一般要和生长素配合使用，增加 生长素的诱导作用效果。当诱导出胚性愈伤组织之后，进行愈伤组织的增殖(继代)、分化 再生植株或诱导形成体细胞胚时，细胞分裂素的独特作用就得到了体现，因为此时培养基中生长素的浓度一般要降低甚至除去。 在愈伤组织的诱导、器官发生和细胞增殖过程中，细胞分裂素和生长素的含量比例是 非常重要的。当细胞分裂素与生长素的含量比值较_时，产生不定芽；反之，产生 不定根；比值适中时，促进愈伤组织的形成。 训练 5 在植物组织培养过程中要使用植物激素，但不同的植物激素的浓度以及使用 的先后顺序和用量的比例都影响细胞的分裂、分化。下列叙述中错误的是( ) A先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化 B先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化 C生长素与细胞分裂素用量比值低，有利于芽的分化，抑制根的形成 D不使用植物激素，有利于愈伤组织的形成 训练 6 安祖花、蝴蝶兰等洋花卉，过去主要靠进口，因其价格昂贵，难以走进寻常 百姓家，近几年我国科技工作者采用植物组织培养技术在温室大棚内生产出大量质优价廉 的各种洋花卉，满足了市场需求。如图所示是蝴蝶兰芽尖通过无菌操作接入试管后，在一 定条件下形成试管苗的培育过程。(1)芽尖组织在接种到培养基之前，必须进行_处理，整个组织培养过程需 _操作，并控制好各个时期的培养条件。 (2)要促使芽尖组织细胞分裂生长，培养基中应有细胞分裂素和_两类植物激素。 当前者用量比后者用量的比值较_时，有利于芽的分化，抑制根的形成。 (3)再分化时，除必要的营养供应和激素调节外，还必须给予光照，原因是 _。 (4)从高度分化的芽尖组织繁殖出大量具有亲代优良性状的蝴蝶兰植株，充分证明了植 物细胞具有_。 (5)植物组织培养的优点是 _。 (6)此过程培养的细胞始终受_调节。一、选择题 1细胞分化是生物界普遍存在的一种生命现象，下列不正确的是( ) A分化发生在生物体的整个生命进程中 B分化是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果 C未离体的体细胞不会表现出全能性 D分化过程中遗传物质发生了改变 2下列关于植物组织培养中的灭菌操作，错误的是( ) A外植体可以用酒精消毒 B镊子等器械需酒精消毒 C操作前手需酒精消毒 D培养基需高压蒸汽灭菌 3将水稻(基因型 AaBb)的花药通过无菌操作，接入试管，经过如图所示过程形成试 管苗，以下选项中正确的是( )Aa：用花药离体培养法获得单倍体植株；b：通过有丝分裂产生愈伤组织；c：培养 基中应有乙烯和脱落酸；d：试管苗的生长发育不需要光照Ba：用花药离体培养法获得二倍体植株；b：通过减数分裂产生愈伤组织；c：培养 基中应有生长素和细胞分裂素；d：试管苗的生长发育不需要光照 Ca：用花药离体培养法获得单倍体植株；b：通过有丝分裂产生愈伤组织；c：培养 基中应有生长素和细胞分裂素；d：试管苗的生长发育需要光照 Da：用花药离体培养法获得二倍体植株；b：通过有丝分裂产生愈伤组织；c：培养 基中应有乙烯和脱落酸；d：试管苗的生长发育需要光照 4下列实例中能体现细胞全能性的是( ) 用悬浮液培养胡萝卜单个细胞可形成可育的植株 植物用种子繁殖后代 用烟 草组织培养的单个组织形成可育的完整植株 A B C D 5产生花粉植株的两种途径中，得到胚状体和愈伤组织都是通过哪个过程进行的( ) A分化 B脱分化 C再分化 D诱导 6用花药培养马铃薯单倍体植株，当它进行减数分裂时，观察到染色体两两配对，形 成 12 对，据此现象可推知产生花药的马铃薯是( ) A二倍体 B三倍体 C四倍体 D六倍体 7植物的组织培养与微生物培养的相同之处是( ) A都需要配制培养基并灭菌 B前者培养基中需多种矿质营养，后者不需要 C培养基中都需要加入有机物 D都需要在相同的温度条件下培养 8单倍体育种的常用方法是花药培养，为了促进花粉迅速发育为单倍体植株，培养基 中除必需营养外，还需加入( ) A秋水仙素 B三磷酸腺苷 C吲哚乙酸 D纤维素酶 二、简答题 9下图是植物组织培养过程的示意图，据图分析回答：植物体植物的 器官取下并放入培养基 中培养脱分化A再分化B (1)图中 A 是_，B 是_。 (2)培养基中除含有丰富的营养物质外，应加入_和_(植物激素)以 刺激植物组织脱分化形成 A。 (3)脱分化和再分化这两个过程的进行还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的 _等，二是_，否则植物组织培养就不能取得成功。 10植物组织培养的培养基中加有激素。下表是培养基中两种激素在不同比例时的实 验结果。请分析完成下列问题：实验组别激素种类及 浓度关系结果16BA产生愈伤组织 26BAIBA愈伤组织分化出芽 36BAIBA愈伤组织不断生长 46BAIBA愈伤组织有长根趋势 (1)6BA 属于_类激素，它的作用是 _。 (2)IBA 属于_类激素，它在本实验中的作用是_。 (3)在植物组织培养中，脱分化可用的激 素组合是实验_和实验_中的激素 浓度关系，再分化时可用的激素组合是实验_和实验_中的激素浓度关系。 (4)植物组织培养的培养基中，除激素外，还必须含有_，它的成分至少应该 含有_、_等。 (5)判断愈伤组织是否产生的依据是看是否产生了_的细胞。 第第 11 课时课时 专题复习专题复习 一、体 生殖 正常 单