第6章分子生物学研究法(下)E吊仁沥闹仁张应E阮s吴医怀一E吴u口育八朋T伟E王东002一木一目人“一64基团芯片及数据分析6.1基因表达研究技术【怀园园人1才伟沥a技Ec合,包括mRNA、rRNA、tRNA、sSRNA.。t八吴医a匹沥前基因表达研究的基本惠路icnt5siDE【沥i八林刑仪向一次测序获得的短的cDNA部分序列,代表一个完整Ea李2芸沥2林刃7000bp不等,平均长度为360土120bp。0毗定坏境下cDNAjfn许该6讨而f因厂医沥d江宇技达样品m噩N喹的捉取逆转录合戊mNA枸建2)基因表达系列分析(SAGB)次原理:E白林玲达丰富度不同的SAGE标签序列。E伟技Es三操作流程:E江人怀ai国河s朐/将cDN萱HB两部,分别违接接头A或接头B丫用标签墓cb戛n暨篡暑DNA池的短mNA片段构咸双杆签后，EE纳55A“DMA烈一TTTTTe一生牧ATTTTTeE张AimasttitArTTTTT4AAAAA广orc-一TTTTT(巳乙荣coovcucH。国国国00ctoxACCCrorTTTTTCCCToATTTTT1标符T阜16口Tgachcero15ocAckroocecrorcccrarhcooooo1车英1dsAcuitoooboboooocccrorsATooo*curaxooo0000oocurorcccccromcoo00000006IAckaoegd高在化氓大作ooo00oooockrg-reTatA命邹月计笃标刁SAGE基本流程3)转录组高通量则序(RNA-Seq)A所有的茼通量侧序技木都能进行RNA测序。Y对cDNA进行高通量测序,E技E逸水余i应迸行门通量检侧Tv样品RNA准备U达继人沥江EE6.1.2RNA的选择性剪接技术E吴林人口Ep园口育口2沥应庆刑E志【河2圆伟庞人服3选择性剪切、外显子ELLt-伟育技剪切。/_伯的相互排斥型刊拳7050一E2s26540。园一一一国命-一国脱唐命吴招腾振咤一招国E1674ne26260。国相一一-河团1g29920。国命一跋嘱国睿真一国-深招-渡相LE圆llieinmmininnnlES16:9P外晒子5不“外星子外昧子2外星子350b2800bp16Ibp4500bp203bp327bpDNA-初姆牧录本:在喉腺中轻录曰芊】二_二_二_白丨成熟mRNA: