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灵芝糖肽复合物(GPSPc)的研究,前 言,概述 GPSPc国内外研究现状 本实验室研究情况,概 述,抗菌消炎、调节免疫、调节机体营养物质代谢,多糖是指由十个以上单糖通过糖苷键连接而成的碳水 化合物,活性多糖专指具有某种特殊生物活性的多糖化合物,如真菌多糖(灵芝多糖)、植物多糖和壳聚糖等,两个概念,灵芝(Ganoderma lucidum)是担子菌门,非褶菌目,灵芝科,灵芝属真菌。具有极高的营养、保健、医疗价值,担孢子,菌丝,菌丝体,子实体原基,担子果 (子实体),灵芝菌的生长过程,无性繁殖,无性繁殖,有性繁殖,灵芝多糖是灵芝真菌中含有的多糖类高分子活性物质,由于绝大多数有生物活性的灵芝多糖都含有肽链,因此近年来又将此类多糖称为灵芝糖肽复合物( Ganoderma lucidum polysaccharide-peptide complex, GPSPc),子实体PSPc,菌丝体PSPc,分类,胞内PSPc,胞外PSPc,GPSPc国内外研究现状,结构 功能 研发产品 应用及问题,GPSPc的结构,以-(13)糖苷健为主链, - (16)及(14)为侧链,其侧链数目大小不一, 组成侧链的糖基及肽链成分复杂,主要含有以下单糖:-葡萄糖、-半乳糖、-木糖、-甘露糖、-阿拉伯糖、-鼠李糖、L-岩藻糖等,分子量一般大于104道耳顿。主链越长, 侧链频率越高,分子量越大, 生物活性越高, 其分子量小于104道耳顿一般活性很低或完全没有(Shiao et al,1994),国内外研究现状,GPSPc的功能,抗菌、抗病毒、抗炎(“三抗”) 促进有益菌生长,保持健康 全面激活免疫系统,提高免疫力、抗病力 促进核酸、蛋白质的合成与代谢和提高糖代谢 抗辐射、降血脂、降血糖、抗水肿等,国内外研究现状,GPSPc的产品,GPSPc液,GPSPc粉,GPSPc胶囊,富硒GPSPc胶囊,国内外研究现状,GPSPc的应用,临床医学:国内外应用较多,治疗多种疾病抗癌或抗肿瘤、抗衰老、降血糖、降血脂等,畜牧业上:,应用很少,国内外研究现状,有待解决的问题,灵芝野生资源稀缺,人工栽培生长周期长,GPSPc产量较低,成本高 天然灵芝生长受环境(季节)影响大,GPSPc产量及品质不稳定,多集中在人类保健、医疗方面,对动物及微生物的作用及应用研究很少,功能、应用领域还有待开发,生产效率较低,国内外研究现状,解决方法,菌种选育 获得高产菌株 液体深层发酵技术 缩短生产周期 GPSPc提取工艺研究 提高糖肽得率 研究GPSPc对动物及微生物的作用 填补研究空白,国内外研究现状,本实验室研究情况,GPSPc发酵液对肉仔鸡生产性能的影响,GPSPc高产真菌的诱变选育,试验内容简介,GPSPc发酵液对肉仔鸡生产性能的影响,实验动物1日龄爱维因肉鸡500只,随机分为5个处理组,每个处理组100只,每个处理分5个重复,每个重复20只鸡,处理组设计,肉仔鸡日粮配方及营养水平,结果,GPSPc对肉鸡生产性能的影响,GPSPc对肉鸡体内牛血清白蛋白抗体滴度的影响,GPSPc对肉鸡淋巴细胞转化的影响,GPSPc高产真菌的诱变选育,方法:原生质体紫外诱变育种,步骤: 原生质体的获取紫外线照射原生质体的再生培养生产性能测定传代稳定性测定,测定指标:菌丝生长速度(cm/7d)胞外PSPc含量(mg/ml),结果,传代稳定性实验:诱1、诱4为高产新菌株,试验内容简介,筛选高产菌株 培养基的优化 发酵参数的确定 GPSPc对肠道微生物的作用,供试菌株: 7株随机分为7个处理组,每组3个重复测定指标:菌丝生长速度(菌丝长度/7天)胞外多糖产量(醇提+苯酚-硫酸法 )菌丝体生物量(细胞干重法),实验一 GPSPc高产菌株的筛选,营养因子正交实验L16(4)5 :碳氮比、碳源浓度、KH2PO4、MgSO4.7H2O、VB1非营养因子正交实验L9(3)4:转速、装液量、初始PH值、接种量测定指标:同实验一,实验二 高产菌株培养基的优化,单因素实验 确定最佳发酵参数温度 (26、28、30、32、35)时间 (3 d、4 d、5 d、6 d、7d)溶氧量初始PH值(自然、4、4.5、5、5.5、6 )搅拌速度(90、100、120、140) 测定指标:同实验一,实验三 放大发酵试验,GPSPc对微生物生长增殖的影响乳酸杆菌 酵母菌芽孢杆菌 大肠杆菌粪链球菌 沙门氏菌,测定指标:光密度(OD)值,测定方法:微生物生长的混浊度测量每12h取样测定,实验四 GPSPc对肠道微生物作用的研究,GPSPc对混合细菌体外培养生长的影响,检测方法:平板计数法细菌计数,分组方法:,GPSPc的制备方法,野外采集,人工栽培,孢子 培养,种子液 培养,发酵,发酵 产物,提取,提取,灵芝子 实体,传统方法,现代方法:生物发酵,褐色 GPSPc,脱色,干燥粉碎,大于2-3个月,菌种筛选,获GPSPc高产菌,培养基优化,确定最佳培养基成分,发酵,确定最佳培养条 件及发酵参数,胞外PSPc,菌丝体,上清液,产品,PSPc对微生物的 作用研究,发酵液,技术路线图,谢谢大家 敬请指正,
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