,Department of Microbiology, HMU,Medical Microbiology,第三篇 医学相关病毒,第32章 呼吸道病毒微生物学教研室 张凤民,教学大纲,掌握内容 常见呼吸道感染的病毒及引起疾病；流感病毒主要生物学性状，包括形态结构、分型与变异；微生物学检查法。麻疹病毒形态结构、培养特性、致病性及其与SSPE的关系 熟悉内容 流感病毒的致病性与免疫性；流感的防治原则；腮腺炎病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒的致病性；风疹病毒致病特点 了解内容 鼻病毒、冠状病毒、呼肠病毒的致病性,问题,流感病毒有哪些型别？分型和分亚型的依据是什么？ 甲型流感病毒为什么易引起世界性大流性？ 副粘病毒有哪些？引起什么疾病？ 麻疹病毒引起什么疾病？如何预防？ 简述风疹病毒与优生优育的关系 普通冠状病毒与SARS冠状病毒有何异同？ 腺病毒的生物学性状与致病性,呼吸道病毒种类,正粘病毒 流感病毒A, B, C型 副粘病毒 副流感病毒 腮腺炎病毒 麻疹病毒 呼吸道合胞病毒,风疹病毒 腺病毒 鼻病毒 冠状病毒,流感病毒（Influenza Virus）,属正粘病毒科（Orthomyxovirus） 19181919年期间的大流行全球有2000万人死于流感,生物学性状,球形或者椭圆形，80120nm，有包膜 包膜上有放射状突起糖蛋白，主要是血凝素和神经氨酸酶分子,80-120 nm -ssRNA，分节段 甲、乙型8个节段 丙型7个节段,8 Structural proteins: Glycoproteins HA (H1-H15) NA (N1-N9) M1, M2 8 nucleocapsid segments RNA, NP, PB1, PB2, PA HA-attachment to receptors,initiation NA-degradation of receptors, release,主要抗原结构,核糖核蛋白 血凝素 神经氨酸酶,被胰蛋白酶消化成二个多肽：HA1、HA2 HA的主要功能 凝聚红细胞 吸附宿主细胞 主要中和抗原 HA抗原结构易发生变异,血凝素（Hemagglutinin, HA）,能水解红细胞表面的神经氨分子。是弱中和抗原 功能 参与病毒释放 促进病毒扩散,神经氨酸酶（Neuraminidase, NA）,抗原变异机制,抗原漂移（Antigen drift） 抗原转变（Antigen shift）,Influenza pandemics associated with antigenic shift,致病性,有季节性、地区性 甲型易变异，曾多次引起世界性大流行 乙型常造成局部爆发流行 丙型只侵犯婴幼儿，很少流行,Influenza pathogenesis,Transmission Aerosoles Infection Epithelial cellsReplication cycle 4 6 hCell death Necrosis,apoptosisIncubation 18 72 hPBMC Non-productive,传播途径：飞沫传播 传染源：患者、隐性感染者、被感染动物 机理 在呼吸道柱状上皮增殖，不引起病毒血症 NA可降低细胞表面粘度，使细胞表面受体暴露，便于病毒侵袭 致病特点是发病率高，死亡率低。,Influenza natural course,并发症：多见于婴幼儿、老人、慢性病患者 原发性病毒性肺炎 继发细胞性肺炎 Seyes综合症：,Primary influenza pneumonia,微生物学诊断,血清学诊断 补体结合实验查病毒可溶性抗原 病毒分离 标本：口腔含漱液 培养：猴肾细胞和鸡胚尿囊腔 结果：红细胞凝集、血凝抑制试验分型 快速诊断 间接免疫荧光检查鼻咽分泌物,Influenza - diagnosis,Specimens: throat swabs, NPS, nasal aspirates, sputum Culture: conventional, rapid Direct detection (EIA, IF, PCR) Serologic response: 4-fold or greater rise in IgG titers,预防,灭活病毒疫苗，定期注射 病毒亚单位疫苗：血凝素 对症治疗，防止细菌性并发症,Treatment: Amantadine,bind M2 protein, inhibit uncoating selective influenza A reduce symptom score Disadvantages : side effects CNS drug-resistance,zanamivir, oseltamivirSialic acid analogues, Inhibit influenza A,B Highly effective if started early, effective in prophylaxis,NA Inhibitor,副粘病毒（Paramyxoviruses）,副流感病毒 腮腺炎病毒 麻疹病毒 呼吸道合胞病毒,副粘病毒共同性状,150-300nm，比正粘病毒要大 -ssRNA核酸不分节段，没有感染性 在猴肾细胞增殖，并有血凝现象 病毒表面有两种蛋白突起 血凝素（HA）或HN蛋白 溶血素（HL）或F蛋白（融合蛋白）,麻疹病毒（Measles Virus）,儿童最常见的急性发热性呼吸道传染病 通常症状轻微，预后良好 但并发症常见 60年代使用疫苗后发病显著下降 仍是发展中国家儿童死亡的主要原因,120-250nm，-ssRNA，不分节段 包膜有HA和HL两种糖蛋白突起 HA只凝集猴RBC，是与细胞吸附的蛋白 HL使细胞发生融合，形成多核巨细胞 病毒抗原稳定，只有一个血清型 唯一自然储存宿主是人 是WHO计划消灭的病毒 病毒抵抗力弱，一般消毒即可灭活,传染源急性期患者。出疹前6天和出疹后3天都有传染性。 传播途径飞沫传播，也可通过玩具传播 临床表现,呼吸道并发症 气管炎、咳嗽，支气管肺炎，最常见（4%） 神经系统并发症： 脑炎 SSPE,免疫性 中和保护作用 HA和HL蛋白抗体 好发于6个月到5岁儿童 6个月内从母体得到抗体 麻疹发病期间免疫系统受到抑制 终生免疫,微生物学诊断 病毒分离：复杂费时，临床不用。血清学诊断 快速诊断：免疫荧光检测病毒抗原,预防 隔离患者 人工自动免疫 被动免疫,副流感病毒,球形，120250nm，不分节段-ssRNA 核蛋白呈螺旋对称 包膜糖蛋白突起 HN蛋白 有血凝素和神经氨酸酶活性 F糖蛋白（融合蛋白 使细胞融合和溶解红细胞 属副粘病毒科副粘病毒属 5个血清型,飞沫传播或直接接触传播 仅在呼吸道上皮细胞增殖，不入血 上呼吸道感染、婴幼儿严重哮喘、支气管肺炎和肺炎 诊断 病毒分离和免疫荧光查抗原,呼吸道合胞病毒 Respiratory Syncytial Virus，RSV,属副粘病毒科肺病毒属 球形 不能在鸡胚培养，但可在组织培养增殖 胞浆嗜酸性包涵体 一个血清型,流行于冬季、早春，传染性强，是医院感染的主要病原之一 潜伏期45天，排毒可持续13周 引起婴幼儿的严重呼吸道感染：细支气管炎和肺炎,腮腺炎病毒（Mumps virus）,属副粘病毒科副粘病毒属 鸡胚羊膜腔增殖 能在猴肾细胞增殖，导致细胞融合、多核巨细胞等CPE 一个血清型 人是唯一自然储存宿主,飞沫传播 引起流行性腮腺炎 病后免疫力持久 可用减毒活疫苗,风疹病毒（Ruella virus）,披膜病毒科（Togaviridae）风疹病毒属 一个血清型 人是唯一宿主,致病性,儿童是主要易感者 呼吸道传播 局部淋巴节增殖后经病毒血症散播全身 可垂直传播导致胎儿先天性感染,预防及免疫,自然感染后可获持久免疫力 母亲抗体可保护胎儿 接种风疹减毒活疫苗 三联疫苗（MMR）,冠状病毒 Coronavirus，CoV,冠状病毒科（Coronaviridae）冠状病毒属 呈多形性，80nm160nm，+ssRNA，不分节段 核衣壳呈螺旋状。包膜表面有多形性花瓣状突起，形如花冠而得名,重症急性呼吸综合症冠状病毒 SARS Coronavirus, SARS CoV,SARS 2002年底在佛山首次报道,SARS症状,空气飞沫或密切接触传播 潜伏期：212天，通常45天 呈显著家庭和医院集聚现象,生物学性状,60-130nm，包膜表面有明显突起 +ssRNA，29.7KB，有14个ORF，主要是RNA聚合酶、S、E、M、N结构蛋白 在Vero细胞上有明显CPE 感染灵长类动物，出现典型的SARS症状,SARS Genome,SARS传播和流行,中国的SARS流行,诊断,主要依靠临床和流行病学资料 病原学 病毒分离 RT-PCR 免疫荧光、ELISA 实验室要求严格生物安全资格（P3） 病原学诊断尚不成熟,预防,SARS CoV比普通CoV抵抗力强，室温下痰、粪便、尿中可稳定存活12天 对温度敏感，37oC存活4天，56oC存活90分钟，75oC30分钟 对含氯消毒剂、过氧乙酸及UV均敏感， WHO推荐中效以上的消毒剂，如过氧乙酸,Summary: Respiratory Infected Viruses,Orthomyxoviruses Influenza viruse Paraomyxoviruses Measles virus Parainfluenza virus Respiratory syncytial virus Mumps virus,Rubella virus Coronavirus and SARS Coronavirus Adenoviruses,Influenza Viruses,Orthomyxoviruses: Influenza Viruses A middle-sized enveloped virus with fragmented RNA genome,Variation,There two surface proteins in the surface of the envelope. HA is the main neutralizing antigen Hemagglutinin neuaminidase Since the highly variation of the genome, Influenza happens frequently due to people have no immunity to the mutated viruses,Other Respiratory Infected Viruses,Paraomyxoviruses Measles virus Parainfluenza virus Respiratory syncytial virus Mumps virus Rubella virus Coronavirus and SARS Coronavirus Adenoviruses,小结,常见呼吸道感染的病毒及引起疾病 流感病毒生物学性状，微生物学检查法 麻疹病毒与SSPE的关系 腮腺炎病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒的致病性；风疹病毒致病特点,