蛋白水解酶活力测定,一、原理 1、蛋白水解酶的概念 专门催化蛋白质的肽键水解，生成游离的氨基酸和短肽 的一类酶。 2、酶活力的定义 一定条件下（温度，pH，底物浓度等），酶催化某一化 学反应的能力。其大小可用反应速度来表示。因此酶活力的 测定也就是酶催化反应速度的测定。,蛋白水解酶活力测定,3、蛋白水解酶活力单位的定义 在40及pH7. 0条件下以酪蛋白为底物，每min水解产生 1ug酪氨酸的酶量为一个活力单位。 4、本实验的测定原理,酪蛋白,胰蛋白酶,短肽，蛋白质等,三氯乙酸,短肽,Folin-酚乙试剂,蓝色物 680nm处具特征光吸收，OD值与肽含量（即酶活力）成正比，可据此进行比色测定。,过滤,蛋白水解酶活力测定,二、操作方法 1、酪氨酸标准曲线的制作，参P112 2、蛋白水解酶活力测定 三、实验结果及处理 1、制作酪氨酸标准曲线 2、酶活力的计算 由样品中测得的光密度（A）值，从酪氨酸标准曲线上 查出相当于酪氨酸的质量（ug），即可按下式计算酶活力：,蛋白水解酶活力测定,Up:蛋白水解酶的活力单位数 A：查得相当于酪氨酸的质量（ug） f: 酶液的稀释倍数,