免疫细胞的类型及特性,非特异性免疫的组成细胞与功能,非特异性免疫（nonspecific immunity）：生物体在种系发育和进化过程中，逐渐形成的一系列防卫机制。参与的细胞：皮肤粘膜上皮细胞、吞噬细胞、NK细胞、NK1.1T细胞、 T细胞、B-1B细胞。 特异性免疫（specific immunity）:个体在生命过程中接受抗原刺激后，主动产生的或接受免疫球蛋白分子后被动获得的。参与的细胞：T细胞、 B细胞、抗原呈递细胞,非特异性免疫的作用时相,即可非特异性免疫应答阶段：发生于感染后0-4小时之内。皮肤粘膜上皮细胞、吞噬细胞参与。 早期非特异性免疫应答阶段：发生于感染后4-96小时之内。吞噬细胞、 NK细胞、 T细胞参与。 特异性免疫应答诱导阶段：发生于感染后96小时之后，抗原呈递细胞、特异性淋巴细胞参与。,上皮细胞及其附属成分的作用 吞噬细胞及其作用：单核吞噬细胞系统 (长驻边防部队)中性粒细胞 ( 野战部队、敢死队),抗原提呈细胞与特异性免疫应 答的诱导,抗原提呈细胞（antigen presenting cell）:加工处理抗原，将抗原肽提呈给抗原特异性淋巴细胞的一组免疫细胞。主要的APC细胞：巨噬细胞、树突状细胞、郎汉斯细胞、 B细胞 提呈过程：,树突状细胞与免疫激活与耐受： 免疫激活：提呈抗原提供T细胞活化的第一、第二信号可用于肿瘤的治疗 免疫耐受：T细胞阴性选择的重要细胞用于移植排斥反应的预防,B. CD3:(1) 表达于所有成熟T细胞表面, 是T细胞的表面标志(2) 形成TCR-CD3复合体, 稳定TCR的结构,传递活化信号,2. CD4和CD8:(1) 参与T细胞在胸腺内的发育成熟分化(2) 将T细胞分为不同的亚群CD4 ( TH,TD) CD8( Ts, Tc)(3) CD4 MHCII, CD8 MHCI， 加强T细胞与APC细胞的作用，参与TCR-CD3信号转导,CD4、CD8与临床应用： 1. CD4分子是HIV的主要受体，HIV感染CD4阳性 T细胞，导致AIDS 2. 检测HIV患者外周血CD4/CD8比值，对辅助诊断和判断病情有重要作用,3.协同信号分子A. CD28:(1) T细胞活化的重要协同刺激受体分子CD28 B7(2) CTLA-4 B7结合，给予活化的T细胞抑 制信号B. CD40L:表达于活化的T细胞，与B细胞表面的CD40结合，参与B细胞的应答C. LFA-1:配体是ICAM-1,2,3，功能为促进T细胞与靶细胞的相互作用，增强细胞免疫效应,D. CD2:（1）表达于成熟T细胞, 胸腺细胞, NK细胞 （2）T细胞活化的旁路途径（3）细胞间粘附分子: E花环，计数和鉴定和分离T细胞E. 结合丝裂原的膜分子:（1） 与丝裂原结合促使T细胞活化和诱 导细胞分裂（2） 植物血凝素(PHA), 刀豆蛋白(ConA)是 常用的T细胞丝裂原（3）转化实验用于T细胞功能检测,一种新的T细胞表面分子-BLyS,一、BLyS的发现及命名 1999年，BLyS被不同的研究小组发现并分别称为BLyS(B lymphocyte stimulator)SCIENCETHANK(TNF homologue that activates apoptosis, nuclear factor B, and c-jun NH2-terminal kinase)J Biol ChemTALL-1(TNF and apoptosis ligand-related leukocyte- expressed ligand 1) J Leukoc BiolzTNF4 NATUREBAFF(B cell activating factor belonging to the TNF family) J Exp Med,二. BLyS的表达及其受体T细胞、 单核细胞、树突状细胞其受体仅存在于B淋巴细胞 三. BLyS的作用 四. BLyS与SLE的关系,二， T细胞亚群的分类,（一） 根据CD分子不同：1. CD4+ T细胞：主要是Th细胞和TDTH细胞，识别抗原受自身MHC II类分子的限制2. CD8+T细胞主要是Tc细胞和Ts细胞，识别抗原受自身MHC I类分子的限制 （二） 根据TCR分为:1.TCRT细胞:多为单阳性细胞,识别与MHC分子结合的多肽,2. TCRT细胞:多数为CD4-CD8-双阴性T细胞， 表面的抗原识别受体缺乏多样性，抗原识别谱狭窄（三） 根据功能分为1. Th细胞Th0、Th1、Th22. Tc细胞Tc1、Tc23. Ts细胞4. TDTH细胞,（四）初始T细胞和记忆T细胞 1.初始T细胞TCR结构显示高度的异质性，表达CD45RA,但不表达IL-2受体 2.活化T 细胞表达IL-2受体，IL-2低浓度条件下实现自分泌增殖 3.记忆性T细胞表达CD45RO、MHC II类分子、ICAM,（五） NK1.1+ T细胞：1. 分布于骨髓、肝、脾、淋巴结中，皮 肤粘膜和外周血中有少量存在。2. 大多数为TCR 型，少数为TCR3 . 多数为CD4-CD8- , 少数为CD4+4. TCR识别的抗原为CD1分子提呈的脂类,三，T细胞的功能,（一） CD4+辅助性T细胞:1. TCR识别抗原是MHCII类分子限制2. Th细胞辅助B,T及其它免疫细胞的增殖分化3. 根据产生细胞因子的种类不同分:Th0细胞：分化为Th1和Th2细胞Th1: 与细胞免疫有关Th2: 与体液免疫有关,（二）CD8+杀伤性T细胞(CTL):1.TCR识别抗原是MHCI类分子限制2.识别存在于靶细胞表面上的MHCI 类分子与抗原复合物,杀伤靶细胞杀伤机制： 细胞裂解、细胞凋亡杀伤过程：1.接触相 2. 分泌相 3.裂解相,（三）.抑制性T 细胞1. 具有免疫抑制功能2. 作为一个非独立群体既可表达CD4又可表达CD83. Th1、Th2细胞可通过细胞因子相互抑 制 （四） 迟发型超敏反应性T细胞 介导迟发型超敏反应主要为Th1细胞，CTL细胞也发挥作用 Th1细胞分泌细胞因子，引起炎症反应CTL细胞直接杀伤靶细胞,（五） NK1.1+ T细胞1. 细胞毒作用分泌穿孔素，通过FasL/Fas途径诱导 CD4CD8双阳性胸腺细胞凋亡2. 免疫调节1）抗原刺激后分泌大量IL-4, 诱导Th0细胞分化为Th2细胞，参与体液 免疫，诱导Ig类别转换、产生IgE2）病毒抗原作用下，产生IFN-r，使Th0 细胞分化为Th1细胞，增强细胞免疫,自然杀伤细胞及其作用,一，自然杀伤细胞（natural killer, NK）:无须抗原预先作用，可直接杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞，在机体免疫监视和早期抗感染过程中起重要作用 二，NK细胞的表面标志CD3-、CD56 + 、CD16 + 抗体依赖细胞介导细胞毒作用（ADCC）:IgG抗体与靶细胞表面的表位特异性结合后，可通过其Fc段与NK细胞表面FcrRIII结合，使NK细胞对靶细胞产生定向非特异性杀伤作用。,三，NK细胞的受体与识别的分子 1，杀伤细胞活化受体（KAR）:识别自身组织细胞、病毒感染细胞、和肿瘤细胞表面的糖类配体，使 NK细胞活化产生杀伤作用。 2，杀伤细胞抑制受体（KIR）:识别自身组织细胞表面的MHC I类分子，介导抑制信号。 3，两种受体对NK细胞杀伤作用的调节,五，NK细胞的生物学功能：1，抗感染和抗肿瘤作用2，免疫调节作用,. 细胞因子活化的杀伤细胞1. LAK细胞:IL-2淋巴细胞 增殖活化 LAK功能: 杀伤肿瘤细胞 2. TIL细胞:IL-2肿瘤组织淋巴细胞 增殖 TIL功能: 杀瘤作用,TCR基因结构和发生重排的特点,胚系基因结构（一）V区基因和C区基因 V区基因：TCR，链由V,D,J 基因片段在T细胞发生过程中拼接TCR，链由V,J 基因片段在T细胞发生过程中拼接C区基因：V区基因的下游是编码C区基因,T细胞抗原受体的胚系基因结构,淋巴细胞分化成熟过程中抗原受 体基因的重排,一.重排和重组信号序列(RSS)重组信号序列：七聚体(CACAGTG)-间隔序列(12或23碱基对)-九聚体(ACAAAAACC)间隔序列：七聚体和九聚体之间的非保守序列，为12或23碱基对“12-23”规则：带有12 bp间隔序列RSS的基因片段只能和带有23bp间隔序列的片段组合，保证了片段的正确连接环出：重排连接时，基因片段与七聚体之间被切断，两个基因片段连接，两个连接片段之间的序列相连形成环，被切除出染色体,多样性产生的机制,组合造成的多样性连接造成的多样性N区插入：通过不需膜板的末端脱氧核苷酸转移酶将核苷酸加到DNA断端,T细胞在胸腺内的发育,T细胞库：在一个体内能特异性识别各种抗原 的T细胞克隆的总数T细胞库特征：1. 识别抗原时的自身MHC分子限制性2. 对自身抗原的耐受性,T细胞在胸腺内的发育过程,双阴性细胞( double negative ,DN) 阶段:CD4- CD8-双阳性细胞(double positive, DP) 阶段:CD4+ CD8+ 单阳性细胞(single positive, SP)阶段:CD4+ CD8- 或 CD8+ CD4-,早期T细胞发育阶段,Pro-T 经Pre-T细胞发育为DN细胞表 达TCR pT 诱导CD4和CD8的表达发育为DP细胞 (TCR基因重排, 形成TCR-CD3 复合体）胸腺内选择发育为成熟的SP细胞库,胸腺选择过程,阳性选择:过程:1. 与胸腺上皮细胞表达的自身MHC分子有适当亲和性的DP细胞克隆增殖分化为SP细胞2. 不与自身MHC分子发生有效结合的DP细胞克 隆死亡结果:1. 排除所有非己MHC限制性T细胞克隆2. 保存自身MHC限制性和自身反应性T细 胞克隆,二. 阴性选择过程:过程:DP及SP细胞的TCR与胸腺巨噬细胞表达的自身肽+自身MHC分子有高亲和性结合,导致细胞克隆死亡或受抑制不能活化结果:1. 排除自身反应性T细胞克隆, 产 生自身耐受2. 识别非己抗原与自身MHC分子结合的T细胞克隆存活,B淋巴细胞与特异性体液免疫,B淋巴细胞的表面分子（一）BCR复合物1. 膜表面免疫球蛋白（mIg）特异性识别抗原, 成熟B细胞的mIg主要为mIgM, mIgD2. Ig, （CD79a, CD79b） 信号转导, 参与mIg 链的表达和转运 （二）替代型BCR复合物,BCR与TCR的比较,BCR TCR结构 BCR- Ig, TCR-CD3 结合形式 抗原-BCR 抗原-MHC-TCR 结合抗原 游离抗原 MHC-抗原肽与任何蛋白质抗原应答 MHC-肽应答 识别表位 空间构像决定簇 线性肽片段,二. 参与B细胞活化的其它分子（一）B细胞活化的辅助受体CD19、CD21（二）协同刺激分子CD40、CD86、CD801. CD40 结合CD40L，在B细胞活化中起协同刺激作用2. CD86/CD80结合CD28，在T细胞活化中起协同刺激作用,(三) 补体受体: (1) CR1(CD35)结合C3b, 促进B细胞的活化 (2) CR2(CD21)结合C3d, EB病毒受体 （四）其它分子1.CD22特异表达于B细胞2.CD20表达于B细胞前体细胞及成熟B细胞3.CD32参与免疫调节,(五)细胞因子受体:结合细胞因子促进B细胞增殖分化 （六）丝裂原受体: (1) 结合B细胞有丝分裂原(美洲商陆 PWM, 脂多糖 LPS) 刺激B细胞转化 (2) B 淋巴细胞转化实验检测B细胞功能,