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奈达铂与阿霉素、丝裂霉素及5-氟尿嘧啶对 人肝癌SMMC7721细胞株的细胞毒作用,奈达铂是一新型铂类抗肿瘤药,其与顺铂相比具有肾毒性和胃肠道副反应较轻等优点。Muramatsu等对犬的研究表明,经肝动脉给药时奈达铂有相对低的肝排出率,认为比顺铂更适于动脉灌注。但目前尚缺乏奈达铂对人肝癌细胞的研究资料。,目的:研究奈达铂对人肝癌SMMC7721细胞株的细胞毒作用及其与阿霉素、丝裂霉素及5-氟尿嘧啶的相互作用。,材料与方法,细胞株 为人肝癌SMMC7721细胞株,引自上海细胞研究所,常规传代培养。药物与试剂 奈达铂(南京东捷药业有限公司,批号:20030501);顺铂(江苏豪森药业股份有限公司,批号:030801);阿霉素(日本明治医药有限公司,批号:960202);丝裂霉素(浙江海达药业股份有限公司,批号:030303);5-氟尿嘧啶(南通制药厂,批号031202),四氮甲唑蓝(MTT)系Merk公司产品,实验方法 取处于对数生长期的SMMC7721细胞,用0.25%胰酶消化后,以含10%灭活小牛血清,2mmol/l谷氨酰胺,4万U/L庆大霉素的PRMI1640培养液调至1105/ml,加入96孔板(Nunc产品),每孔100l,置37,5%CO2条件下培养24小时,然后按嵌套设计,加入不同浓度的药物100l(每种浓度3个复孔),以单纯培养液为对照,继续在上述条件下培养48小时,每孔加入MTT溶液50l,再培养4小时后弃去上清,每孔加入100l二甲基亚砜,震荡5分钟后用酶联免疫测定仪在波长570nm处测定各孔的光密度(OD)值,按下列公式计算细胞毒指数(CI):,细胞毒指数CI=(1-实验孔OD均值/对照组OD均值)100% 用Karber法计算奈达铂对SMMC7721细胞的半数抑制剂量(IC50)。,统计学处理 奈达铂与对SMMC7721细胞CI的关系用直线相关分析;联合用药与单纯用药的比较采用t检验,数据用SPSS 11.5软件处理。,结 果,单纯奈达铂对SMMC7721细胞株有抑制作用(IC50为20.1g/ml),其CI与药物浓度呈正相关。 顺铂对对SMMC7721细胞株有抑制作用(IC50为13.7g/ml),其CI与药物浓度呈正相关。,Suppression of nedaplatin combined with adrimycin on SMMC7721 cell(OD,xs),Suppression of nedaplatin combined with mitomycin on SMMC7721 cell(OD,xs),Suppression of nedaplatin combined with mitomycin on SMMC7721 cell(OD,xs),结论,奈达铂与阿霉素、丝裂霉素或5-氟尿嘧啶联合应用在一定剂量范围内呈现协同效应,可联合用于肝癌的治疗。,
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