,CD4,一种更有效的肿瘤杀伤细胞？中山大学 附属第三医院血液科郭小燕 硕士研究生,肿瘤免疫治疗 肿瘤疫苗 :灭活的肿瘤细胞，肿瘤抗原，癌基因产物。CTL 肿瘤特异性细胞毒性T细胞,T细胞的分化成熟,T细胞分类,按TCR亚基的不同可分为：T细胞 T细胞 按表面标志和分化抗原的不同分为：CD4T CD8T 按分泌的细胞因子和介导的功能不同CD4可分为：Th1 Th2 Th17 细胞毒性T细胞 CTL 调节性T细胞 CD4+CD25+Treg,CTL识别肿瘤细胞TCR MHC I/II类分子 辅助信号分子,T细胞抗原受体,TCR1由两条肽链组成 510TCR2由两条肽链组成 9095,ITAM immunoreceptor tyrosine-based activation motif 免疫受体酪氨酸激活基序,MHC分子在人类主要是： HLA I类分子 典型的是HLA-A,B,C （表达在除绒毛外滋养层细胞外的所有有核细胞） HLA II类分子 典型的是HLA-DR,DQ,DP,DM,DOA,DOB （表达在巨噬细胞，树突状细胞，成熟B细胞等APC,激活的T细胞和激活 的单核细胞）,MHC I类分子是有一个 重链（链）和一个轻链 （链）组成的异二聚体。链由细胞外结构，穿膜 区和胞质区组成。肽结合区、免疫球蛋白样区、跨膜区、胞浆区,链 链,MHC II类分子结构示意图,T细胞的活化需要两个信号TCR识别p-MHC辅助活化信号,CTL的杀伤作用,CTL的杀伤作用,释放穿孔素 引起靶细胞内电解质的外溢，导致细胞死亡。 释放颗粒酶 1）直接裂解胱天蛋白前酶 pro-caspase3,或间接裂解pro-caspase8而启动细胞凋亡。2）通过裂解BID而引起Bcl-2家族分子如Bax转位至线粒体，引起细胞色素C释放和caspase9与衔接蛋白酶活化因子的相互作用而诱导细胞凋亡。 3）释放线粒体凋亡因子，使线粒体失能，继而诱导内源性核酸酶活化，引起caspase非依赖途径的凋亡。,有实验研究证实CD4也有直接的肿瘤杀伤作用，但是目前的主要研究还是集中在CD4的辅助性杀伤作用上。,CD4的辅助抗肿瘤作用,1 释放多种细胞因子如IL-2等，激活CD8T细胞、NK细胞和巨噬细胞，增强效应细胞的杀伤能力。 2 释放IFN-、TNF等作用与肿瘤细胞促进MHC I类分子表达，也提高靶细胞对CTL的敏感性；TNF有直接破坏肿瘤细胞的作用。 3 促进B细胞增殖、分化和产生抗体，通过体液免疫途径杀伤肿瘤细胞。 4 少数CD4细胞可直接识别肿瘤细胞MHC II类分子提呈的抗原肽直接杀伤肿瘤细胞。,实验材料：转基因小鼠 MataHari ,Marilyn 肿瘤细胞 MB49 膀胱癌细胞 B6 黑色素瘤细胞,实验结果,MataHari 转基因小鼠CD8表达情况； Marilyn 转基因小鼠CD4表达情况；（ CD4/8在淋巴结和脾脏混合细胞所占的比率）,实验结果,In vitro antitumor activity. Eighteen-hour JAM test to measure killing activity of MataHari cells (left panel) or Marilyn cells (right panel) against MB49 (circles) or B16 (squares) tumor targets that had been incubated with IFN- as in C (lled symbols) or not (open symbols). R/Tresponder to target ratio.,体内实验,(A) Survival of RAG.KO mice (dashed line), MataHari mice (circles) or Marilyn mice (triangles) after challenge with MB49 tumor cells. (B) Survival of RAG.KO mice that were infused one day after tumor challenge with 106 MataHari cells (circles) or 105 Marilyn cells (triangles) or no cells (dashed line).,CD4T细胞可以直接杀伤肿瘤细胞，而且其肿瘤杀伤作用比CD8细胞要强。,谢谢,