第二节 布鲁氏菌病,主讲：张红见 副教授,内容,一、病性： 二、病原学： 三、流行病学: 四、临床症状： 五、病理变化： 六、诊断: 七、防制: 八、兽医公共卫生学：,一、病性,布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属的细菌引起的人和动物共患的一种慢性传染病。在家畜中以牛、羊、猪最为易感。 其特征是：生殖器官和胎膜发炎，引起流产，不育和各种组织的局部病灶。 人主要表现为：波浪热、多汗、关节炎、睾丸炎、肝脾肿大等症状。 本病广泛分布于世界各地，可引起不同程度的流行。,二、病原学,1.布鲁氏菌的生物型及形态染色： 2.致病性： 3.抵抗力：,1.布鲁氏菌的生物型及形态染色,本菌分：牛型、羊型、猪型、沙林鼠型、绵羊型和犬型布鲁氏菌。 在我国人、畜中有牛、羊、猪和犬4种布鲁氏菌的存在，最近几年来，发现在进口羊的后代中发生了几例由绵羊布鲁氏菌引起的公绵羊附睾炎。 至于沙林鼠布鲁氏菌引起鼠布鲁氏菌病，在国内日前尚未报道。,根据布鲁氏菌的血清学特征，生长特性，对某些染料的抑制作用及对Tb噬菌体裂解作用的感受性等的不同，又将其分为不同的生物型： 羊布鲁氏菌有3个生物型；牛布鲁氏菌有9个生物型；猪布鲁氏菌有5个生物型。即布鲁氏菌属有6个种20个生物型。 各个种与生物型菌株之间在形态及染色特性等方面无明显的差异，均为细小的球杆菌或短杆菌，革兰氏染色阴性。 常用科兹罗夫斯基法染色，本菌被染成红色，而其他细菌为绿色或兰色。,形态及染色特性,细菌呈球形、球杆形或短杆形，新分离者趋向球形。0.50.7um0.61.5um，多单在，很少成双、短链或小堆状。不形成芽孢和荚膜，偶尔有类似荚膜样结构，无鞭毛不运动。革兰氏染色阴性，姬姆萨氏染色呈紫色。经柯兹罗夫斯基或改良Ziehl Neelsen、改良Koster等鉴别染色法染成红色，可与其他细菌相区别。,2.致病性,本菌不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素。 本属细菌可感染的动物种类极多，目前查知者已有60多种，包括各种家畜、野生哺乳动物、啮齿动物、鸟类、爬虫类、两栖类和鱼类。 布氏杆菌可引起豚鼠、小鼠和家兔等实验动物感染，豚鼠最为易感。 各种布鲁氏菌分别引起该种动物的布鲁氏菌病，即：牛布鲁氏菌通常引起牛布鲁氏菌病；羊布鲁氏菌引起羊布鲁氏菌病；猪布鲁氏菌引起猪布鲁氏菌病。但在个别情况下，这三种布鲁氏菌也有由原来的宿主转移到其他种动物上的可能。 牛感染羊布鲁氏菌的事例，在我国是常见的。鹿感染羊种和牛种布鲁氏菌，狗感染羊种布鲁氏菌在我国也常见到。猪种布鲁氏菌有时也能感染家兔、鹿、牛、羊。,3.抵抗力,布鲁氏菌的抵抗力和其他不能产生芽胞的细菌相似。 如：巴氏灭菌法10-15分钟可杀死，0.1升汞数分钟，1来苏儿或2福尔马林或5生石灰乳15分钟，而直射同光需要0.54小时，在布片上室温干燥5天，在干燥处经37天才死亡，在冷暗处，在胎儿体内可存活6个月。,Pseudomonas aeruginosa,续 抵抗力,本菌对外界环境的抵抗力较强。在污染的土壤和水中可存活14个月，皮毛上24个月，鲜乳中8d，乳、肉食品中约2个月，粪便中120d，流产胎儿中至少75d，子宫渗出物中200d。在直射阳光下可存活4h。 对湿热的抵抗力不强。60加热30min或705min即杀死，煮沸立即死亡。,电镜下的布氏杆菌,光镜下的布氏杆菌,Pseudomonas aeruginosa colonies on agar,三、流行病学,1.易感动物： 2.传染源： 3.传播途径： 发病机理:,1.易感动物,1.易感动物：本病的易感动物的范围很广泛，如：羊、牛、猪、水牛、野牛、羚羊、鹿、野猪、马、狗、猫、狐、狼、野兔、猴、鸡、鸭以及一些啮齿动物等，但主要以牛、羊和猪为主。,2.传染源,本病的传染源是病畜和带菌动物(包括野生动物)。 其中受感染的妊娠母畜是最危险的 。 布鲁氏菌感染的睾丸及阴囊中也有布鲁氏菌存在，这种情况在公猪显得更加重要。,3.传播途径,本病的传播途径主要是消化道，也可通过污染的饲料与饮水而感染，但经皮肤感染也具有一定的重要性。 动物的易感性是随着性成熟年龄接近而增高 。,发病机理,布鲁氏菌侵入牛体后，在几日内到达侵入门户附近的淋巴结，由此再进入血液中发生菌血症，菌血症引起体温升高，其时间长短不等，菌血症消失，经过长短不等的间歇后，可再发生菌血症。侵入血液中的布鲁氏菌散布至各器官中，可在停留器官中引起病理变化同时可能有细菌从粪、尿中排出。但是到达各器官的布鲁氏菌也有的不引起任何病理变化，常在48小时之内死亡，以后只能在淋巴结中。布鲁氏菌在胎盘、胎儿和胎衣组织中特别适宜生存繁殖，其次是乳腺组织、淋巴结（特别是乳腺组织相应的淋巴结）、骨骼、关节、腱鞘和滑液囊，以及睾丸、精囊等。,四、临床症状,1.牛： 2.羊（绵羊和山羊）： 3.猪：,1.牛,潜伏期：2周至6个月。 母牛最显著的临床症状：流产。流产可以发生在妊娠时的任何时期，最常见的发生在第68个月，少数发生于怀孕后的第3-4个月或第8-9个月。 流产的胎儿多为：死胎或弱胎，在怀孕8-9个月流产的胎儿有些虽能存活，但往往发育不良，流产前一般无体温变化，阴唇和阴道黏膜潮红肿胀，阴道流出不洁的棕红色黏液，乳腺受损，轻者不表现出症状，仅产乳量减少，继而发生流产或不呈现任何前驱症状的突然流产。 患病公畜有时可见：阴茎潮红肿胀，更常见的是睾丸炎及附睾炎使睾丸肿大，配种能力下降，急性病例，则睾丸肿胀、疼痛 。 临诊上常见的症状还有：关节炎，甚至可以见于未流产的牛只，关节肿大疼痛。,2.羊（绵羊和山羊）,通常呈急性经过，常不表现症状；而首先被注意到的症状也是流产。 在自然条件下，流产多发生于怀孕的后期，既怀孕的第3或第4个月。怀孕初期流产较为少见。 流产的胎儿多死亡，有的虽能成活但也极度衰竭、发育不良。 少数母羊在流产前体温升高，精神萎顿、食欲减退，伏卧不起。口渴，由阴道流出黄色黏液或血样分泌物等，流产后持续排出黏液。但产后胎盘滞留现象在羊上较为少见。经常发生子宫内膜炎，病程短的可达几个月甚至更长。 此外，有个别的早发生关节炎和滑液囊炎，病羊表现为跛行。 公羊除表现为关节炎外，有时还发生睾丸炎、附睾炎，睾丸肿大，触摸时局部发热并有热痛感。,3.猪,最明显的症状：流产，多发生在妊娠的第3个月（412）周。有的在妊娠第23周即流产，有的接近妊娠满即早产，在流产的1-3天内，常出现拉稀、乳房、阴唇肿胀、阴道流出粘性或粘脓性分泌物。 公猪常见睾丸炎和附睾炎 。 猪布鲁氏菌病病程缓慢，往往预后不良。,下：患病公猪睾丸肿大,上：患病公猪的右侧睾丸显著肿大,布氏杆菌病：母牛流产，产出发育不全的胎儿，全身肿胀，有出血斑,流产的母牛从阴道排出污灰白色或棕红色有恶臭分泌物,布氏杆菌病：母牛流产，产 出发育比较完全的死胎,病牛系部滑膜炎引起关节肿大,布氏杆菌性关节炎,布氏杆菌性关节炎,布氏杆菌性睾丸炎,五、病理变化,1.牛： 2.羊（绵羊和山羊）： 3.猪：,1.牛,主要为子宫内部的变化，胎膜呈黄色胶冻样浸润，有些部位覆有纤维蛋白絮片和脓液，有的部位增厚而杂有出血点。绒毛叶部分或全部贫血呈苍黄色，或覆有灰色或黄绿色纤维蛋白或脓液絮片或覆有脂肪状渗出物。 胎儿的病变主要为败血症变化，表现为：浆膜、黏膜有出血点和出血斑，皮下结缔组织发生浆液出血性炎症，脾和淋巴结肿大，肺常有支气管肺炎。 病母牛流产后常继发子宫炎，剖检可见子宫内膜充血、水肿、肥厚，呈污红色，有时可见弥漫性红色斑纹。,病牛髋关节化脓性坏死性炎及股骨头坏死,2.羊（绵羊和山羊）,本病在子宫、胎儿与胎盘等处的病理变化与牛基本相同。 但淋巴结、肝、脾的病变较为明显，表现为：网状内皮系统细胞增生，有时呈弥漫性，从而引起淋巴结、肝、脾的肿大，有时表现为大量的结节性肉芽肿。病公羊表现为睾丸炎、附睾肿大，坚硬，并有多量的坏死灶和脓肿。,3.猪,其病理变化与牛的基本相似，但也有许多不同之处。不同之处：流产后子宫黏膜很少发生化脓性病变，但常有许多灰黄色帽针至粟粒大的小结节，结节中央有脓汁或干酪样物质。淋巴结水肿切面也可见小的结节，胎盘有多量的出血点，表面覆有黄色渗出物。 相似之处：胎儿在流产前很久已经死亡，可见其干死化，胎儿绒毛膜充血，有时水肿或杂有小出血点，还可能覆盖一层灰黄色渗出物。 睾丸和附睾在实质中有豌豆大或更大的坏死或化脓灶，其中可能已有钙盐沉积。有时精囊发炎，有关节炎、化脓性腱鞘炎和滑液囊炎。,病猪化脓性子宫内膜炎,病猪死胎、畸形胎（箭头示四肢呈鸭蹼形）和木乃伊胎,病猪死胎和木乃伊胎,左：病猪流产死胎，胎膜上散在出血点,右：病猪流产胎儿及胎膜的严重出血,病猪胎膜上发生弥漫性、粟粒大、灰白色坏死灶,病猪胎膜变薄，散在芝麻粒大近似圆形颗粒，可挤出黄白色脓汁,六、诊断,布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染，其诊断和检疫主要依靠:血清学检查及变态反应检查。细菌学检查仅用于发生流产的动物和其他特殊情况。 1.细菌学检查： 2.血清学检查： 3.变态反应检查:,1.细菌学检查,病料最好用流产胎儿的胃内容物、肺、肝和脾以及流产胎盘和羊水等。也可采用阴道分泌物、乳汁、血液、精液、尿液以及急宰病畜的子宫、乳房、精囊、睾丸、附睾、淋巴结、骨髓和其他有局部病变的器官。 显微镜检查：病料直接涂片，作革兰氏和柯兹洛夫斯基染色镜检。若发现革兰氏阴性、鉴别染色为红色的球状杆菌或短小杆菌，即可作出初步的疑似诊断。此法更适合于作流产材料及流产数日月内的阴道分泌物检查。,2.血清学检查,有多种检查方法，归纳起来不外乎血清中布氏杆菌抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法。 用已知抗体可检查病料中是否存在布氏杆菌，或分离培养物是否为布氏杆菌，比细菌学检查法简便快速，因而具有较大实用价值。 常用方法有：荧光抗体技术、反向间接血凝试验、间接炭凝集试验以及免疫酶组化法染色等。,动物在感染布氏杆菌715d可出现抗体，检测血清中的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的主要手段。方法多，各有所长，目前还没有一种完美的方法。因此在实际工作中，最好用一种以上的方法相互配合。,在大规模检疫时可采用准确性较差、操作较简便的方法进行普遍筛选 (初筛试验)，然后再用准确性较高、但操作复杂的方法予以复核 (确定试验)。 国内常用：玻板凝集试验、虎红平板凝集试验、乳汁环状试验进行现场或牧区大群检疫，以试管凝集试验和补体结合试验进行实验室最后确诊。,牛布鲁氏菌病虎红平板凝集试验 阳性：出现明显凝集颗粒（箭头） 阴性：不出现凝集颗粒,3.变态反应检查,皮肤变态反应一般在感染后的2025d出现，因此不宜作早期诊断。本法适于动物的大群检疫，主要用于绵羊和山羊，其次为猪。,七、防制,本病目前尚无有效的治疗方法，主要以预防为主，菌苗接种虽有显著效果，但欲根除此病，则尚须严格执行畜群全面检疫及淘汰病畜的措施。已有的菌苗种类很多，我国创制和应用的菌苗有羊型和猪型两种弱毒菌苗。 消灭布鲁氏菌病的措施是：检疫、隔离、控制传染源，切断传播途径，培育健康牛群及主动免疫接种。,目前对布鲁氏菌疫苗的研究较多，常用的有以下几种,1.布鲁氏菌19#菌苗： 2.猪布鲁氏菌2#弱毒活苗：3.羊布氏杆菌5#苗：,1.布鲁氏菌19#菌苗,此苗仅用于牛和绵羊，其毒力弱且较稳定，注射后有轻度的体温反应，一般经3-7天恢复正常。牛，5-8月龄注射一次，以后根据流行情况，决定是否进行注射。该苗对绵羊的免疫力也很好，成年绵羊在配种前1-2个月注射一次，免疫期约为9-12个月。5个月以下的犊牛、哺乳羔羊、怀孕的牛与羊及弱牲畜均不能使用。 方法：用生理盐水将该疫苗稀释成每毫升含菌120-160亿个，牛每头皮下注射5毫升，绵羊皮下注射2.5毫升。,2.猪布鲁氏菌2#弱毒活苗,简称S2苗，是我国选育的一种优良布鲁氏菌苗。对牛、羊免疫期为2年，猪均为1年。 方法： 1).饮服和喂服：健康动物、怀孕动物较适用于饮服和喂服。牛：服用剂量500亿个活菌；羊：100亿；猪：需服用2次，间隔30-45天，每次200亿。 2).气物雾免疫：适用于大面积免疫，室内效果可靠，露天时应避风。剂量：牛：250亿活菌；羊：50亿活菌。 3).注射接种：仅用于非怀孕母畜、公畜、瘦弱动物、孕畜禁用。方法：生理盐水将该疫苗溶解稀释成每毫升含活菌100亿个。牛：皮下注射5ml；羊：肌肉注射0.5ml；猪：皮下注射2次，每次2ml，间隔30-45天。,