陆地棉基因 40业部西北内陆区棉花生物学与遗传育种重点实验室/新疆兵团棉花遗传改良与高产栽培重点实验室,新疆石河子832000冤摘要院揖目的铱研究旨在研究0具有较高相似性袁故命名为 40用电子克隆及反转录0具有转录激活活性遥 0甘露醇诱导上调表达遥揖结论铱 推测40献标志码院32000, )0,400一作者简介院司爱君渊1981)袁女袁助理研究员袁1260360)曰兵团青年科技创新资金专项渊2011个大约60个氨基酸残基所组成的保守的含有7个绝对保守的氨基酸残基由此得名为棉花学报 9(2):1661762期干旱2低温2,6尧高温3,7等冤的诱导表达袁通过特异地与靶基因调控区的顺式元件结合袁调节靶基因表达的强度及时空特异性8袁在抗逆信号传导及诱导下游功能基因的表达中起关键作用遥袁随后在拟南芥尧 水稻和烟草等模式植物以及马铃薯9尧大麦10尧灌木11尧辣椒12尧遏蓝菜13尧葡萄14尧番茄15尧小麦16等植物中均发现了参与逆境胁迫的中袁在拟南芥和水稻中分别发现了70多个和100多个7目前关于我国重要经济作物棉花中0过电子克隆及对其进行序列比对及系统进化树分析袁初步明确该基因的功能袁为今后深入研究该基因的分子生物学特性及遗传进化等奠定基础遥材料与方法植物材料与处理试验材料为陆地棉品种珂字棉312渊中国科学院遗传与发育生物学研究所杨维才研究员提供遥 挑选籽粒饱满尧均匀的棉花种子种植于蛭石中袁待幼苗第3片真叶完全展开时袁 将棉苗分别用甘露醇渊冤尧脱落酸渊诱导处理240保存备用遥试剂琼脂糖凝胶回收试剂盒尧杆菌菌株元载体转录试剂盒渊冤 购自制性内切酶R尧 H尧 与 自他试剂均为国产或进口分析纯试剂遥方法遥 以上述低温尧高用酚法提取棉花整株总9袁交由博奥生物有限公司完成基因表达谱芯片遥 同时袁采用化后袁取25 滋0和 40袁以对照样品0冤1 滋冤2滋冤1 滋 1 冤 变性5性30性30伸106729卷棉 花 学 报0遥 系统进化树构建步骤为院 采用 件内置的据多重比对结果构建系统发生树遥 参数设置院 采取邻接法渊用随机逐步比较的方式搜索最佳系统树袁对生成的系统发生树进行用的 用 40码的蛋白质中潜在修饰位点进行预测袁通过过站渊()对转录因子进行电子定位袁 分析 40I/ 限制性内切酶酶切粒袁 获得双酶切后的40因的5端融合袁 构建由35方法参考ht